(1)索式提取法
原理: 樣品經(jīng)前處理后,放入圓筒濾紙內(nèi),將濾紙筒置于索式提取管中,利用乙醚或石油醚在水浴中加熱回流,使樣品中的脂肪進(jìn)入溶劑中,回收溶劑后所得到的殘留物,即為脂肪(粗脂肪)。
采用這種方法測(cè)出游離態(tài)脂,此外還含有磷脂、色素、蠟狀物、揮發(fā)油、糖脂等物質(zhì),所以用索氏提取法測(cè)得的脂肪為粗脂肪。
索氏提取法適用于脂類含量較高,結(jié)合態(tài)的脂類含量較少,能烘干磨細(xì),不宜吸濕結(jié)塊的樣品的測(cè)定。
此法只能測(cè)定游離態(tài)脂肪,而結(jié)合態(tài)脂肪無(wú)法測(cè)出,要想測(cè)出結(jié)合態(tài)脂肪需在一定條件下水解后變成為游離態(tài)的脂肪方能測(cè)出。
另外此法是經(jīng)典方法,對(duì)大多數(shù)樣品結(jié)果比較可靠,但需要周期長(zhǎng),溶劑量大。(2)巴布科克氏法
巴布科克氏法和蓋勃氏法的原理相似,蓋勃氏法較巴布科克法簡(jiǎn)單快速,多用一種試劑異戊醇。使用異戊醇是為了防止糖炭化。該法在歐洲比在美國(guó)使用更為廣泛。
(3)蓋勒氏法
原理: 用濃硫酸溶解乳中的乳糖和蛋白質(zhì)等非脂成分,將牛奶中的酪蛋白鈣鹽轉(zhuǎn)變成可溶性的重硫酸酪蛋白,使脂肪球膜被破壞,脂肪游離出來(lái),再利用加熱離心,使脂肪完全迅速分離,直接讀取脂肪層的數(shù)值,便可知被測(cè)乳的含脂率。
適應(yīng)范圍與特點(diǎn):這兩種方法都是測(cè)定乳脂肪的標(biāo)準(zhǔn)方法,適用于鮮乳及乳制品脂肪的測(cè)定。對(duì)含糖多的乳品(如甜煉乳、加糖乳粉等),采用此方法時(shí)糖易焦化,使結(jié)果誤差較大,故不適宜。此法操作簡(jiǎn)便,迅速。對(duì)大多數(shù)樣品來(lái)說(shuō)測(cè)定精度可滿足要求。
(4)羅斯-哥特里法
巴布科克氏法、蓋勃式法、羅斯-哥特里法主要用于乳、及乳制品中脂類的測(cè)定
(5)酸水解法
酸水解法測(cè)出的脂肪為游離態(tài)脂和結(jié)合脂全部脂類。
原理: 將試樣與鹽酸溶液一同加熱進(jìn)行水解,使結(jié)合或包藏在組織里的脂肪游離出來(lái),再用乙醚和石油醚提取脂肪,回收溶劑,干燥后稱量,提取物的重量即為脂肪含量。
適用范圍與特點(diǎn)
適用于各類食品中脂肪的測(cè)定,對(duì)固體、半固體、粘稠液體或液體食品,特別是加工后的混合食品,容易吸濕、結(jié)塊,不易烘干的食品,不能采用索氏提取法時(shí)。用此法效果較好。
本測(cè)定方法有哪些需要改進(jìn)的地方
通常使用示蹤法,即向一穩(wěn)定流動(dòng)的系統(tǒng)中輸入示蹤劑,在出口處檢測(cè)流出物料中示蹤劑含量的變化,從而定出物料的停留時(shí)間分布。所用示蹤劑應(yīng)不起化學(xué)變化,不會(huì)被器壁或器內(nèi)填充物所吸附并易于檢測(cè),如電解質(zhì)、染料等。輸入示蹤劑要不影響裝置內(nèi)原來(lái)的流動(dòng)狀況。示蹤剤的輸入方式有脈沖式:
脈沖法,在t=0瞬間,向流量為v的流入物料中脈沖地注入示蹤劑A(其量為M),同時(shí)記錄流出物料中A的摩爾分子濃度CA隨時(shí)間t的變化,繪出CA-t曲線,曲線所圍的面積為:
若以C0表示M/v,并按E(t)定義:
E(t)dt=vCAdt/M,
則 E(t)=CA/C0。
本測(cè)定方法有哪些需要改進(jìn)的地方通常使用示蹤法,即向一穩(wěn)定流動(dòng)的系統(tǒng)中輸入示蹤劑,在出口處檢測(cè)流出物料中示蹤劑含量的變化,從而定出物料的停留時(shí)間分布。
所用示蹤劑應(yīng)不起化學(xué)變化,不會(huì)被器壁或器內(nèi)填充物所吸附并易于檢測(cè),如電解質(zhì)、染料等。輸入示蹤劑要不影響裝置內(nèi)原來(lái)的流動(dòng)狀況。
示蹤剤的輸入方式有脈沖式:脈沖法,在t=0瞬間,向流量為v的流入物料中脈沖地注入示蹤劑A(其量為M),同時(shí)記錄流出物料中A的摩爾分子濃度CA隨時(shí)間t的變化,繪出CA-t曲線,曲線所圍的面積為:若以C0表示M/v,并按E(t)定義:E(t)dt=vCAdt/M,則 E(t)=CA/C0。
微生物油脂含量測(cè)定首先要把油脂提取出來(lái),然后通過(guò)“油/微生物”就可以知道含量了。
油脂提取方法主要有索氏抽提法,熱酸法,比重法,超聲波提取法等,最常用的是抽提法。
1、索氏抽提法:采用索氏抽提法中的殘余法,即用低沸點(diǎn)有機(jī)溶劑(乙醚或石油醚)回流抽提,除去樣品中的粗脂肪,以樣品與殘?jiān)亓恐睿?jì)算粗脂肪含量。由于有機(jī)溶劑的抽提物中除脂肪外,還或多或少含有游離脂肪酸、甾醇、磷脂、蠟及色素等類脂物質(zhì),因而抽提法測(cè)定的結(jié)果只能是粗脂肪。
具體點(diǎn)就是首先烘干樣品,稱重,通過(guò)索氏抽提儀進(jìn)行脂肪提取,再烘干殘?jiān)亓浚涂梢缘玫接椭苛恕?/p>
2、酸水解法:樣品烘干,稱重,然后向其中加入10 mL鹽酸.將抽脂瓶放入70℃~80℃水浴中,每5 min~10 rain用玻璃棒攪拌一次,至樣品脂肪游離消化完全為止需40 min~50 min。取出輕搖,冷至室溫。加入10 mL乙醇,混勻。加入25 mL乙醚,加塞振搖1 rain,開(kāi)塞放出氣體,靜置,使醚層、水層分開(kāi)。用石油醚一乙醚等量混合液沖洗塞及筒口附著脂肪,靜置,有機(jī)層轉(zhuǎn)入燒瓶中,減壓濃縮至近干。
您所說(shuō)的是食用油脂的檢測(cè)方法,還是飼料用油脂的檢測(cè)法方法呢?飼料用油脂的話,一般需要檢測(cè)的包括:
1、總脂肪酸
此系包括游離脂肪酸及與甘油結(jié)合之脂肪酸總量。動(dòng)物性或植物性油脂其量通常為92%—94%。油脂能量大部分系由脂肪酸供應(yīng),因此總脂肪酸量為能量值之指標(biāo)。
2、游離脂肪酸
脂肪分解后會(huì)產(chǎn)生游離脂肪酸,故其量可做為鮮度判斷之根據(jù),完全飼料所用油脂一般約在15%—35%。在營(yíng)養(yǎng)上而言,游離脂肪酸對(duì)動(dòng)物無(wú)害,但太高的游離脂肪酸(50%以上)表示油脂原料不好,對(duì)金屬機(jī)械、器具有形蝕性,而且會(huì)降低嗜口性。
3、水分
油脂中含有水分,不但引起加工設(shè)備的腐蝕,同時(shí)易使油脂起水解作用產(chǎn)生游離脂肪酸,加速脂肪之酸敗,并降低脂肪之能量含量。
4、不溶物或雜質(zhì)
包括纖維質(zhì)、毛、皮/骨、金屬、砂土等細(xì)小顆粒無(wú)法溶解于石油醚之物質(zhì)。這些物質(zhì)沒(méi)有能量?jī)r(jià)值,而且會(huì)阻塞篩網(wǎng)和管口,或在貯存椅造成沉積。其量應(yīng)限制在0.5以下。
5、不可皂化物
包括白酶類、碳?xì)浠衔铩⑸亍⒅敬肌⒕S生素等不與堿發(fā)生皂化反應(yīng)之物質(zhì),大部分成分仍有飼用價(jià)值,對(duì)動(dòng)物無(wú)不良影響,但其中蠟、焦油等則無(wú)營(yíng)養(yǎng)價(jià)值,甚至有些成分對(duì)動(dòng)物有害,如水腫因子。
6、酸價(jià)
酸價(jià)雖測(cè)定容易,但通常不能單純以之評(píng)價(jià)油脂品質(zhì),須配合其他方法供簽定。油脂酸價(jià)之提高,部分由于油脂水解而生成游離脂肪酸,部分由于過(guò)氧化物的分解所產(chǎn)生羥基化合物再氧化而生游離脂肪酸,因此游離脂肪酸生成機(jī)構(gòu)隨條件而異,不易做為油脂氧化程度的判斷指標(biāo)。
7、過(guò)氧化價(jià)
羰氧化物系在油脂氧化過(guò)程中生成,該過(guò)氧化價(jià)可做氧化程度判斷。但過(guò)氧化物在水中的存在或高濕下甚易分解,因此油脂氧化至某一程度后,過(guò)氧化價(jià)反而會(huì)降低。因此我們應(yīng)了解,過(guò)氧化價(jià)==所存在過(guò)氧化物量與分解量之差,故需配合其他氧化測(cè)定方法,以利品質(zhì)之正確判斷。
8、羰基化合物
測(cè)定油脂中經(jīng)酸敗而產(chǎn)生的羰基化合物含量,亦為判斷油脂氧化程度的一種方法。
9、TBA試驗(yàn)(硫代巴比妥酸試驗(yàn)),一般要求不大于2。
通常TBA與上述油脂氧化生成物作用而呈紅色,于530毫米下測(cè)吸光度,可供酸敗程度之鑒定。TBA試驗(yàn)可測(cè)出丙二醛(Malonaldehede)含量,丙二醛乃油脂氧化過(guò)程中第二階段產(chǎn)物,故本試驗(yàn)無(wú)法測(cè)出初期氧化變化,加之丙二醛本身亦不穩(wěn)定,可再氧化變成丙二酸(Malonicacid)人造成氧化與否之誤判。
10、Kreis試驗(yàn)
此為醛類及酮類化合物之簡(jiǎn)便呈色反應(yīng),可做油脂氧化變質(zhì)與否之定性反應(yīng)。
11、AOM(活性氧法,Active Oxygenmethod)
系將油脂保持一定高溫而通入定量空氣以促進(jìn)氧化而評(píng)價(jià)。油脂之穩(wěn)定性以過(guò)氧化價(jià)達(dá)到某一定值所需時(shí)間來(lái)表示,不同種類油脂有不同過(guò)氧化物標(biāo)準(zhǔn),通常對(duì)植物性油脂之過(guò)氧化物標(biāo)準(zhǔn)為100meg/千克;對(duì)動(dòng)物性油脂則為20meg/千克(如豬油),并以不超過(guò)20小時(shí)為飼料級(jí)油脂規(guī)格。由于AOM測(cè)定系采用光電比色法,對(duì)某些顏色較深之飼料級(jí)油脂而言,其有效性雖有待商榷,但仍不失為最佳之方法。
12、安全性及其他
農(nóng)藥、多氯聯(lián)苯、殺蟲(chóng)劑、氯戴奧興及其他具毒性物質(zhì)均可能移行油脂中,為防止可能之中毒,應(yīng)行李一伯二氏(Liberman Buchard)反應(yīng)及Hdphen反應(yīng)及其他試驗(yàn)檢出。
食用植物油中涉及的技術(shù)指標(biāo)主要有色澤、加熱試驗(yàn)、煙點(diǎn)、酸價(jià)、過(guò)氧化值、羰基價(jià)、浸出油溶劑殘留量、黃曲霉毒素B1等。
色澤:植物油通常是淡黃色或淡綠色等不同的色澤,這是由于胡蘿卜素、葉綠素、葉黃素、維生素E的氧化物等油溶性色素存在所致。不同油料、不同加工方法的油脂具有不同的色澤。每種植物油有其正常的顏色范圍和數(shù)值,如國(guó)家強(qiáng)制性標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定,一級(jí)花生油不得超過(guò)黃25紅2,一級(jí)大豆油不得超過(guò)黃70紅4,一級(jí)菜籽油不得超過(guò)黃35紅4。若超過(guò)此范圍值表明油脂精煉不好或已劣變。
280℃加熱試驗(yàn):主要用來(lái)鑒別磷脂含量多少的一種簡(jiǎn)易方法。油脂中磷脂含量多時(shí),經(jīng)加熱后產(chǎn)生絮狀沉淀物;油脂酸敗時(shí),油色則變深或變黑。國(guó)家強(qiáng)制性標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定,一級(jí)花生油、大豆油和菜籽油的280℃加熱試驗(yàn),油色不得變深,無(wú)析出物;二級(jí)油油色允許變深,但不得變黑,允許有微量析出物。
煙點(diǎn):是油脂在空氣中被加熱時(shí)對(duì)其熱穩(wěn)定性進(jìn)行衡量的指標(biāo)之一。煙點(diǎn)的產(chǎn)生是由于存在一些沸點(diǎn)相對(duì)較低的物質(zhì)而引發(fā)的,如游離脂肪酸、甘一酯、不皂化物等。一般精煉程度低的油脂的煙點(diǎn)遠(yuǎn)低于色拉油及高級(jí)烹調(diào)油。國(guó)家推薦性標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定色拉油的煙點(diǎn)為不低于220℃。
酸價(jià):是油脂的精煉程度和品質(zhì)好壞的重要標(biāo)志之一。除米糠油和椰子油可能由于油料中本身游離脂肪酸含量高外,酸價(jià)高說(shuō)明油脂精煉程度較低,或由于某種因素如溫度較高、含水量過(guò)多、含有某些金屬離子或長(zhǎng)期存放與空氣接觸氧化,導(dǎo)致油脂劣變。酸價(jià)高的油脂不宜儲(chǔ)存,也不宜食用。國(guó)家強(qiáng)制性標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定,一級(jí)油酸價(jià)不得超過(guò)1.0mgKOH/g,二級(jí)油酸價(jià)不得超過(guò)4.0mgKOH/g,色拉油酸價(jià)不得超過(guò)0.3mgKOH/g。
過(guò)氧化值:油脂與空氣中的氧發(fā)生氧化作用所產(chǎn)生的氫過(guò)氧化物,是油脂自動(dòng)氧化的初級(jí)產(chǎn)物,它具有高度活性,能夠迅速地繼續(xù)變化,分解為醛酮類和氧化物等致使油脂酸敗變質(zhì)。因此,氫過(guò)氧化物是油脂初期氧化程度的標(biāo)志。氫過(guò)氧化物對(duì)人體健康有害,過(guò)氧化值高的油脂不宜食用。國(guó)家強(qiáng)制性標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定,花生油、葵花油、米糠油的過(guò)氧化值不得超過(guò)20meq/kg,菜籽油、大豆油、棉籽油的過(guò)氧化值不得超過(guò)12meq/kg,色拉油的過(guò)氧化值不得超過(guò)10meq/kg。
羰基價(jià):油脂氧化過(guò)程中生成的氫過(guò)氧化物聚集到一定程度時(shí),便會(huì)有一定程度的分解、聚合,其分解產(chǎn)物會(huì)產(chǎn)生許多羰基化合物如醛、酮等。該項(xiàng)指標(biāo)是一項(xiàng)重要的衛(wèi)生指標(biāo),用來(lái)評(píng)價(jià)油脂的品質(zhì)。國(guó)家強(qiáng)制性標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定,羰基價(jià)不得超過(guò)20 meq/kg,色拉油不得超過(guò)10 meq/kg。
浸出油溶劑殘留量:食用油脂的制取多采用浸出的方法。浸出溶劑是以六碳烷烴為主要成份的六號(hào)溶劑,溶劑內(nèi)含有烷烴、環(huán)烷烴、烯烴和芳香烴等化合物,其中芳香烴毒性較大,烷烴毒性較小,主要作用于人的中樞神經(jīng),使神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)的類脂物質(zhì)平衡失調(diào)。國(guó)家強(qiáng)制性標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定,浸出油溶劑殘留量不得超過(guò)50 meq/kg。
黃曲霉毒素B1:黃曲霉毒素是由黃曲霉和寄生曲霉在生長(zhǎng)的后期分泌產(chǎn)生的一類次生代謝產(chǎn)物,其分子由一個(gè)二氫呋喃環(huán)和一個(gè)香豆素構(gòu)成。黃曲霉毒素的毒性極強(qiáng),主要危害肝臟器官,可引起人和動(dòng)物的急性中毒、慢性中毒及引起癌癥,是危害最大的天然毒素之一。黃曲霉毒素B1在黃曲霉毒素群中的毒性最強(qiáng),在食品中的分布最廣。國(guó)家強(qiáng)制性標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定,花生油中黃曲霉毒素B1不得超過(guò)20μg/kg,其他植物油中不得超過(guò)10μg/kg。
脂肪檢測(cè)方法可用索式提取法:
一、索式提取法(經(jīng)典方法)
1、原理:
樣品經(jīng)前處理后,放入圓筒濾紙內(nèi),將濾紙筒置于索式提取管中,利用乙醚或石油醚在水浴中加熱回流,使樣品中的脂肪進(jìn)入溶劑中,回收溶劑后所得到的殘留物,即為脂肪(粗脂肪)
采用這種方法測(cè)出游離態(tài)脂,此外還含有磷脂、色素、蠟狀物、揮發(fā)油、糖脂等物質(zhì),所以用索氏提取法測(cè)得的脂肪為粗脂肪。
2、適用范圍與特點(diǎn)
索氏提取法適用于脂類含量較高,結(jié)合態(tài)的脂類含量較少,能烘干磨細(xì),不宜吸濕結(jié)塊的樣品的測(cè)定。此法只能測(cè)定游離態(tài)脂肪,而結(jié)合態(tài)脂肪無(wú)法測(cè)出,要想測(cè)出結(jié)合態(tài)脂肪需在一定條件下水解后變成為游離態(tài)的脂肪方能測(cè)出。
另外此法是經(jīng)典方法,對(duì)大多數(shù)樣品結(jié)果比較可靠,但需要周期長(zhǎng),溶劑量大。
二、實(shí)驗(yàn)操作流程
1、濾紙筒的制備
將濾紙剪成長(zhǎng)方形8*375px ,卷成圓筒,直徑為150px,將圓筒底部封好,最好放一些脫脂棉,避免向外漏樣。
2、稱取樣品,將樣品烘干磨細(xì),稱取一定量與紙筒封好上口,最好用測(cè)定水的樣品。
3、索式抽提器的準(zhǔn)備
索氏抽提器由三部分組成,回流冷凝管、提取管、提脂瓶組成。提脂瓶在使用前需烘干并稱至恒重。其它要干燥。
4、抽提
將裝好樣的紙筒放入抽提管 , 倒入乙醚,乙醚的量從提取管加入,加入的量為提取瓶體積的2/3 接上冷凝裝置,在恒溫水浴中抽提,水浴溫度大約為55℃左右,可用濾紙檢驗(yàn),理論值抽提6-8小時(shí),實(shí)際值3-4小時(shí),但也根據(jù)樣品性質(zhì)來(lái)決定。
5、回收乙醚
當(dāng)乙醚在提取管內(nèi)即將虹吸時(shí)立即取下提取管,將其下口放到乙醚回收瓶?jī)?nèi),使之傾斜,然后將提取瓶放到100-150℃烘箱烘至恒重。
6、計(jì)算
脂肪%= (W2-W1)/W x 100
W2——瓶和樣品重(g)W1——瓶子重量(g) W——樣品重量(g)
或:脂肪%=(抽提后濾紙與樣品重量—抽提前濾紙重量)/樣品重量 * 100
濾紙筒應(yīng)事先放入燒杯與100-105℃烘箱烘至恒重。
擴(kuò)展資料:
索式提取法注意事項(xiàng)
(1)樣品應(yīng)干燥后研細(xì),裝樣品的濾紙筒一定要緊密,不能往外漏樣品,否則重做。
(2)放入濾紙筒的高度不能超過(guò)回流彎管,否則乙醚不易穿透樣品,使脂肪不能全部提出,造成誤差。
(3) 碰到含多糖及糊精的樣品要先以冷水處理,等其干燥后連同濾紙一起放入提取器內(nèi)。
(4) 提取時(shí)水浴溫度不能過(guò)高,一般使乙醚剛開(kāi)始沸騰即可(約45℃左右),回流速度以8-12次/時(shí)為宜。
(5) 所用乙醚必需是無(wú)水乙醚,如含有水分則可能將樣品中的糖以及無(wú)機(jī)物抽出,造成誤差。
(6) 若用干樣品測(cè)定脂肪,可按下式計(jì)算原來(lái)樣品脂肪的含量
脂肪(%)= (W1-W2)(100-A) / W
A— 100克樣品中水分的含量(g)
(7) 冷凝管上端最好連接一個(gè)氯化鈣干燥管,這樣不僅可以防止空氣中水分進(jìn)入,而且還可以避免乙醚揮發(fā)在空氣中。這樣可防止實(shí)驗(yàn)室微小環(huán)境空氣的污染,如無(wú)此裝置,塞一團(tuán)干脫脂棉球亦可。
(8)如果沒(méi)有無(wú)水乙醚可以自己制備,制備方法如下:在100ml乙醚中,加入無(wú)水石膏50克,振搖數(shù)次,靜止10小時(shí)以上,蒸餾,收集35℃以下的蒸餾液,即可應(yīng)用。
(9)將提取瓶放在烘箱內(nèi)干燥時(shí),瓶口向一側(cè)傾斜45度防止揮發(fā)物乙醚易與空氣形成對(duì)流,這樣干燥迅速。
(10)如果沒(méi)有乙醚或無(wú)水乙醇時(shí),可以用石油醚提取,石油醚沸點(diǎn)30-60℃為好。
(11)使用揮發(fā)乙醚或石油醚時(shí),切忌直接用火源加熱,應(yīng)用電熱套、電水浴、電燈泡等。
(12) 這里恒重的概念有區(qū)別,它表示最初達(dá)到的最低重量,即溶劑和水分完全揮發(fā)時(shí)的恒重,此后若在繼續(xù)加熱,則因油脂氧化等原因會(huì)導(dǎo)致重量增加。
(13) 在干燥器中的冷卻時(shí)間一般要一致。
參考資料:百度百科—索式提取法
具體檢驗(yàn)方法就不知道了 找到幾個(gè)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn),看一下用不 用的上
標(biāo)準(zhǔn)編號(hào):GB/T 8873-1988
標(biāo)準(zhǔn)名稱:油脂工業(yè)名詞術(shù)語(yǔ)
標(biāo)準(zhǔn)狀態(tài):現(xiàn)行
英文標(biāo)題:Terminology of oils and fats industry
實(shí)施日期:1988-7-1
頒布部門(mén):國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)局
內(nèi)容簡(jiǎn)介:本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了油脂工業(yè)的名詞術(shù)語(yǔ),適用于生產(chǎn)、教學(xué)、科研及其它有關(guān)領(lǐng)域。
出處:
下載:
下載:/upload/qy/yn/GB-T%2012529.4-19901.pdf
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