雜交授粉(玉米雜交授粉的操作步驟及注意事項)
1.玉米雜交授粉的操作步驟及注意事項
調(diào)節(jié)開花期
玉米由于單性花，在調(diào)節(jié)開花期方面，必須使母本的雌穗和父本的雄穗的花期一致。可用分期播種的方法調(diào)節(jié)父、母本的花期。
選株
父、母本均應選擇生長健壯、無病蟲害和具有本品種典型性狀的植株，作為雜交對象。
套袋隔離
當母本植株的雌穗已經(jīng)露出而沒有伸出柱頭以前，用牛皮紙袋套好雌穗。當母本雌穗開始抽出柱頭時，要在當天用牛皮紙袋套在父本植株的雄穗上，雌、雄穗的紙袋，要用細繩或回形針扎緊，以免脫落。玉米雜交
采粉
從上述玉米的開花習性中可以知道，其雄穗在始花后的第2~4天內(nèi)開花最多，進入盛花期，一天中開花最多的時間是上午8~10時，而此時花粉的生活力也最強；雌穗在始花后的第2~4天，處于盛花期，柱頭已基本抽齊。因此，采粉時間應選擇父、母本的盛花期、并選擇上午8~10時進行采粉。采集花粉時，將父本雄穗稍稍下彎，輕輕抖動，用人工輔助授粉器盛接花粉、采粉時要防止其它品種的花粉混入。
人工輔助授粉器是用光滑的厚紙制成1個圓錐形的紙筒，用厚紙作紙蓋蓋住下口，另外用細鐵絲網(wǎng)做成1個篩子，平放于低筒內(nèi)。采集的花粉可通過篩子均勻授到柱頭上。
授粉
授粉時，先取下雌穗上的紙袋，立即用人工輔助授粉器的下口對準雌穗的柱頭，輕輕抖動授粉器，使花粉落在柱頭上。
授粉后，仍用原來的紙袋將雌穗套好，但應在袋頂和穗頂之間留出一定的距離，以防止因果穗伸長而頂破紙袋。紙袋套好后，應在雌穗基部拴上紙牌（或塑料牌），寫明雜交組合、授粉日期和操作者姓名等項內(nèi)容。
收獲
母本果穗成熟后，應連同紙牌（或塑料牌）一起單獨收獲，并單獨保存，供來年播種檢驗雜交是否成功。
2.怎樣進行雜交授粉
在進行雜交授粉時，應按照以下步驟進行： （1） 去雄和套袋在雜交授粉之前，為了防止母本自花授粉，首 先要把雄蕊全部拔掉。
一般花卉的雄蕊都比雌蕊成熟早，為了保險起 見，最好在花蕾全部展開前就把花瓣剝開，隨著將雄蕊全部拔掉，也 可將花瓣一起拔掉，防止它們招蜂引蝶而造成天然雜交。 去雄后應立 即套上透明紙袋，讓柱頭、花柱和子房在袋內(nèi)慢慢發(fā)育。
（2）花粉的采集和JC存雜交授粉都是在品種間進行的，不同品 種的父本和母本開花期有早有晚，因此需將父本的花粉事先采集下來 進行C存，待母本開花后再進行授粉。 花粉的壽命因花卉種類的不同而不同。
一般花卉的花粉粒在低溫 干燥環(huán)境下能夠保存很長時間，采粉時應當用新毛筆收集花粉，或者 連同花絲一起拔下來，收集到干凈的玻璃器皿中，然后放入避光的冷 藏箱或冷箱的下層，保持5?10oC的低溫和50%以下的相對濕度。 為 了防止花粉粒受潮，最好用細紗布包上一包氯化鈣或變色硅膠等干燥 劑，放在裝有花粉的器皿中，或將它們裝入化學試驗室用的干燥瓶 中，再放入冷藏箱，一般可C存1個月以上。
（3） 人工授粉當父本花藥上的花粉粒顆顆顯現(xiàn)，顏色變黃，母 本的柱頭顯出亮晶晶的黏液時，說明它們都已成熟，這時即可采集花 粉進行授粉。 如果雄蕊的花絲粗壯，花藥較胖，可直接用鑷子把它們 拔下來，打開母本上的紙袋，在柱頭上輕輕涂抹。
如果雄蕊的花絲細 小而無法拔取，可用新毛筆把花粉撣到白紙或玻璃盤中，再用筆尖蘸 上花粉涂點在雌蕊的柱頭上。 人工授粉在1天內(nèi)應間隔進行2次，或者隔日重復授粉。
每次授 粉后仍用紙袋把花頭套好，同時掛上寫有父、母本品種名稱和授粉日 期的標牌。待子房或花托開始膨大并結出幼果時，再把紙袋去掉。
3.植物體雜交注意事項
植物體細胞雜交（plant somatic hybridization），又稱原生質體融合（Protoplast fusion ）是指將植物不同種、屬，甚至科間的原生質體通過人工方法誘導融合，然后進行離體培養(yǎng)，使其再生雜種植株的技術。植物細胞具有細胞壁，未脫壁的兩個細胞是很難融合的，植物細胞只有在脫去細胞壁成為原生質體后才能融合，所以植物的細胞融合也稱為原生質體融合。
說道植物細胞融合，它和動物細胞融合還是有很大差別的。
第一，前者因為有細胞壁，對融合有負面影響，首先要除壁變成原生質體，可以用纖維素酶和果膠酶除壁。
第二，后者除了要加必要的營養(yǎng)物質外，還要加血清保持環(huán)境穩(wěn)定。
細胞融合方法主要有化學、生物和物理方法。一般學生實驗室使用PEG（主要含有聚乙二醇）法融合。其優(yōu)點是操作簡單不需要特殊的設備。只需在去壁的細胞加入適量的PEG處理適當?shù)臅r間，然后終止PEG的作用，然后在普通光學顯微鏡即可看到融合細胞。這種方法也有缺點，如不好控制PEG作用的時間，而且PEG對細胞也可能有害。
只有處理時間得當，細胞壁去除了才可能提高成活率。
優(yōu)點：植物體細胞雜交是兩種異源原生質體，在誘導劑誘發(fā)下相互接觸，從而發(fā)生膜融合、胞質融合和核融合并形成雜種細胞，進一步發(fā)育成雜種植物體。通過細胞融合技術可以克服種、屬以上職務有性雜交不親和障礙，為廣泛重組遺傳物質開辟了新途徑，也為攜帶外源遺傳物質（信息）的大分子滲入細胞創(chuàng)造了條件，從而更進一步擴大了遺傳物質的重組范圍。
4.雜交制種時應注意哪些技術環(huán)節(jié)
為了配制數(shù)量多、質量好、成本低的雜交種子，除了要有高質量的、配套的親本，還要有相應的生產(chǎn)條件和栽培管理措施，如安全隔離區(qū)、合理的父母本行比和調(diào)節(jié)好播種期以保證花期相遇等。
此外，在生長過程中還要嚴格掌握以下技術環(huán)節(jié)。（1） 去雜去劣為了保證制種質量，獲得純、優(yōu)的雜交種子，在親本繁殖區(qū)嚴格去雜的基礎上，對制種區(qū)的親本也要分期地嚴格進行去雜去劣。
尤其是當父本種子下一年要連用時，更應從嚴要求以保證雜交種質量。去雜去劣的時間，除在苗期結合定苗進行外，還應在抽穗開花前、收獲后分別進行，必須把雜株在開花前拔除干凈，以防雜株花粉的干擾。
（2}及時徹底去雄和人工輔助授粉母本去雄是整個制種工作的中心環(huán)節(jié)，是獲得高質量雜交種子的關鍵。 去雄的要求是及時、徹底、干凈。
及時，就是指雄花未散粉前即去除；徹底，是指全隔離區(qū)所有母本的雄穗（花）一個不漏地全部去除；干凈，是要將母本的整個雄穗或所有雄蕊拔除，不得殘留。目前，除高粱、水稻和部分玉米、油菜可以利用雄性不育特性簡化去雄手續(xù)外，玉米、棉花等作物多數(shù)還是利用人工去雄的方法制種。
如果去雄不及時、徹底、干凈，就很難保證雜交種子質量。去雄工作應有專人負責，按不同作物的開花習性，掌握好去雄時間，保證去雄質量。
去雄后的母本除刮風、昆蟲等傳粉外。為了提高結實率，增加產(chǎn)種量，必須進行若干次人工輔助授粉，也可采用一些特殊的措施，如對玉米剪苞葉、花絲，對水稻割苞葉、趕粉、噴赤霉素等來提高結實率。
目前，玉米制種時，全田授粉結束后，常把父本行砍掉，用做青伺，以防止父本自交系流失。第二年制種時，用繁殖田做父本，種子質量也好。
