ms培養基配置([高中生物]MS培養基是什么??它的成分是??用于做什么實(shí)驗的?)
1.[高中生物]MS培養基是什么??它的成分是??用于做什么實(shí)驗的?
MS培養基是Murashige和Skoog于1962年
為煙草細胞培養設計的，其特點(diǎn)是無(wú)機
鹽和離子濃度較高，是較穩定的離子平
衡溶液，它的硝酸鹽含量高，其養分的
數量和比例合適，能滿(mǎn)足植物細胞的營(yíng)
養和生理需要，因而適用范圍比較廣，多
數植物組織培養快速繁殖用它作為培養
基的基本培養基。
注意事項：
1.母液Ⅱ及母液Ⅳ的配制方法是：每
種母液中的幾種成分稱(chēng)量完畢后，分別
用少量的蒸餾水徹底溶解，然后再將它
們混溶，最后定容到1
2.母液Ⅲ的配制方法是：將稱(chēng)好的
FeSO4·7H2O和Na2-EDTA·2H2O分別
放到450
mL蒸餾水中，邊加熱邊不斷攪
拌使它們溶解，然后將兩種溶液混合，
并將pH調至5.5，最后定容到1
L，保存
在棕色玻璃瓶中。
3.MS培養基中還需要加入2,4-二氯苯
氧乙酸（2,4-D）、萘乙酸（NAA）、6
芐基
嘌呤（6BA）等植物生長(cháng)調節物質(zhì)，并且分
別配成母液（0
1
mg/mL）。其配制方法
是：分別稱(chēng)取這3種物質(zhì)各10
mg，將
2,4-D和NAA用少量（1
mL）無(wú)水乙醇預
溶，將6BA用少量（1
mL）的物質(zhì)的量濃
度為0.1
mol/L的NaOH溶液溶解，溶解過(guò)
程需要水浴加熱，最后分別定容至100
mL，即得質(zhì)量濃度為0
1
mg/mL的母液。
4.組織培養是否能夠獲得成功，主要取
決于對培養基的選擇。不同的培養基具
有不同的特點(diǎn)，也就適合于不同的植物
種類(lèi)和接種材料。在開(kāi)展組織培養項目
時(shí)，首先要對各種培養基進(jìn)行了解和分
析，以便能從中選擇合適的使用。組培
用的培養基一般包括基礎培養基和激
素，但是植物激素的種類(lèi)和數量，隨著(zhù)
不同培養階段和不同材料有變化，因此
各培養基配方中均不列入植物激素。
2.MS培養基配方的注意事項
配制培養液時(shí)應注意：
①在使用提前配制的母液時(shí)，應在量取各種母液之前，輕輕搖動(dòng)盛放母液的瓶子，如果發(fā)現瓶中有沉淀、懸浮物或被微生物污染，應立即淘汰這種母液，重新進(jìn)行配制；為防止母液被微生物污染，有機母液放在冰箱里4℃保存；
②用量筒或移液管量取培養基母液之前，必須用所量取的母液將量筒或移液管潤洗2次；
③量取母液時(shí)，最好將各種母液按將要量取的順序寫(xiě)在紙上，量取1種，劃掉1種，以免出錯。溶化瓊脂 用粗天平分別稱(chēng)取瓊脂9 g、蔗糖30 g，放入1 000 mL的搪瓷量杯中，再加入蒸餾水750 mL，用電爐加熱，邊加熱邊用玻璃棒攪拌，直到液體呈半透明狀。然后再將配好的混合培養液加入到煮沸的瓊脂中，最后加蒸餾水定容至1 000 mL，攪拌均勻。
需要注意的是，在加熱瓊脂，制備培養基的過(guò)程中，操作者千萬(wàn)不能離開(kāi)，否則沸騰的瓊脂外溢，就需要重新稱(chēng)量、制備。此外，如果沒(méi)有搪瓷量杯，可用大燒杯代替。但要注意大燒杯底的外表面不能沾水，否則加熱時(shí)燒杯容易炸裂，使溶液外溢，造成燙傷。調pH 用滴管吸取物質(zhì)的量濃度為1 mol/L的NaOH溶液，逐滴滴入溶化的培養基中，邊滴邊攪拌，并隨時(shí)用pH試紙測培養基的pH，一直調到培養基的pH為6(5.8~6.5)左右為止。培養基的分裝 溶化的培養基應該趁熱分裝。分裝時(shí)，先將培養基倒入燒杯中，然后將燒杯中的培養基倒入錐形瓶（50 mL或100 mL）中。注意不要讓培養基沾到瓶口和瓶壁上。錐形瓶中培養基的量約為錐形瓶容量的1/5~1/4。每1 000 mL培養基，可分裝25~30瓶。培養基分裝完畢后，應及時(shí)封蓋瓶口。用2塊硫酸紙（每塊大小約為9 cm*9 cm）中間夾1層薄牛皮紙封蓋瓶口，并用線(xiàn)繩捆扎。最后在錐形瓶外壁貼上標簽。
3.MS培養基配方的注意事項
去百度文庫，查看完整內容>內容來(lái)自用戶(hù)：MBBMMS培養基母液的配制：20*MS大量元素（1 L）:38 g KNO3,33 g NH4NO3,8.8 g CaCl2·2H2O,7.4 g MgSO4·7H2O,3.4 g KH2PO4。
200*MS微量元素（1 L）:0.166 g KI,1.24 g H3BO3,4.46 g MnSO4·4H2O,1.72 g ZnSO4·7H2O,0.05 g Na2MoO4·2H2O,0.005 g CuSO4·5H2O,0.005 g CoCl2·6H2O。200*MS維生素和氨基酸（1 L）:20 g肌醇，0.1 g煙酸，0.1 g鹽酸吡哆醇（VB6）,0.02 g鹽酸硫胺素（thiamine hydrochloride, VB1）,0.4 g甘氨酸。
200*MS鐵鹽（1 L）:5.56 g FeSO4·7H2O,7.46 g Na2EDTA·2H2O，先溶于500 mL ddH2O，加熱，調pH至5.5，定容至1 L。注意：配制大量元素母液時(shí)，為避免產(chǎn)生沉淀，要用純度高的重蒸餾水溶解，藥品采用分析純。
化學(xué)藥品先以少量重蒸餾水充分溶解后然后混合，混合時(shí)需注意邊攪拌邊混合。CaCl2·2H2O要在最后單獨加入，在溶解CaCl2·2H2O時(shí)，蒸餾水需加熱沸騰，除去水中的CO2，以防沉淀。
配制鐵鹽母液時(shí)，FeSO4和Na2-EDTA應分別加熱溶解后混合，并置于磁力攪拌器上不斷攪拌至溶液呈金黃色（約加熱20-30 min），調pH值至5 .5，室溫放置冷卻后，再冷藏。使用上述配好的母液，按照稀釋倍數，配制基礎MS培養液：1*MS大量元素，1*MS微量元素，1*MS維生素和氨基酸，1*MS鐵鹽，蔗糖30 g/L，定容后調節pH至5.8，高溫高壓滅菌。
固體培養基含植物凝膠3.5 g/L或瓊脂9 g/L。另MS基本培養基可用Murashige and Skoog Basal Salt Mixture。
4.配制ms培養基母液時(shí)應注意哪些問(wèn)題
剛剛復習了這里，借花獻佛~~ 培養基配制應遵循的原則 1、根據不同微生物的營(yíng)養需要配制不同的培養基。
2、注意各種營(yíng)養物質(zhì)的濃度及合適配比，保持合適滲透壓 。 3、將培養基的 pH 控制在適宜的范圍之內，以利于不同類(lèi)型微生物的生長(cháng)繁殖或代謝產(chǎn)物的積累。
4、經(jīng)濟節約的原則。在所選培養基成分能滿(mǎn)足微生物培養要求的前提下，盡可能選用價(jià)格低廉，資源豐富的材料作培養基成分。
5、控制氧化還原電位。對厭氧的微生物尤其重要。
6、培養基應無(wú)菌。故在培養基配制后應徹底殺死培養基中的雜菌 。
5.配制ms培養基母液時(shí)應注意哪些問(wèn)題
剛剛復習了這里，借花獻佛~~ 培養基配制應遵循的原則 1、根據不同微生物的營(yíng)養需要配制不同的培養基。
2、注意各種營(yíng)養物質(zhì)的濃度及合適配比，保持合適滲透壓 。 3、將培養基的 pH 控制在適宜的范圍之內，以利于不同類(lèi)型微生物的生長(cháng)繁殖或代謝產(chǎn)物的積累。
4、經(jīng)濟節約的原則。在所選培養基成分能滿(mǎn)足微生物培養要求的前提下，盡可能選用價(jià)格低廉，資源豐富的材料作培養基成分。
5、控制氧化還原電位。對厭氧的微生物尤其重要。
6、培養基應無(wú)菌。故在培養基配制后應徹底殺死培養基中的雜菌 。
6.MS培養基配方的配制步驟
原發(fā)布者：鯊魚(yú)鮮生
MS培養基母液的配制：20*MS大量元素（1L）:38gKNO3,33gNH4NO3,8.8gCaCl2·2H2O,7.4gMgSO4·7H2O,3.4gKH2PO4。200*MS微量元素（1L）:0.166gKI,1.24gH3BO3,4.46gMnSO4·4H2O,1.72gZnSO4·7H2O,0.05gNa2MoO4·2H2O,0.005gCuSO4·5H2O,0.005gCoCl2·6H2O。200*MS維生素和氨基酸（1L）:20g肌醇，0.1g煙酸，0.1g鹽酸吡哆醇（VB6）,0.02g鹽酸硫胺素（thiaminehydrochloride,VB1）,0.4g甘氨酸。200*MS鐵鹽（1L）:5.56gFeSO4·7H2O,7.46gNa2EDTA·2H2O，先溶于500mLddH2O，加熱，調pH至5.5，定容至1L。注意：配制大量元素母液時(shí)，為避免產(chǎn)生沉淀，要用純度高的重蒸餾水溶解，藥品采用分析純。化學(xué)藥品先以少量重蒸餾水充分溶解后然后混合，混合時(shí)需注意邊攪拌邊混合。CaCl2·2H2O要在最后單獨加入，在溶解CaCl2·2H2O時(shí)，蒸餾水需加熱沸騰，除去水中的CO2，以防沉淀。配制鐵鹽母液時(shí)，FeSO4和Na2-EDTA應分別加熱溶解后混合，并置于磁力攪拌器上不斷攪拌至溶液呈金黃色（約加熱20-30min），調pH值至5.5，室溫放置冷卻后，再冷藏。使用上述配好的母液，按照稀釋倍數，配制基礎MS培養液：1*MS大量元素，1*MS微量元素，1*MS維生素和氨基酸，1*MS鐵鹽，蔗糖30g/L，定容后調節pH至5.8，高溫高壓滅菌。固體培養基含植物凝膠3.5g/L或瓊脂9g/L。另MS基本培養基可用(Sigma-Aldrich)快速配制。播種方法：
7.MS培養基的配制與滅菌
植物組織培養中常用的一種培養基是MS培養基。
MS培養基的配制包括以下步驟。 培養基母液的配制和保存 MS培養基含有近30種營(yíng)養成分，為了避免每次配制培養基都要對這幾十種成分進(jìn)行稱(chēng)量，可將培養基中的各種成分，按原量的20倍或200倍分別稱(chēng)量，配成濃縮液，這種濃縮液叫做培養基母液。
這樣每次使用時(shí)，取其總量的1/20(50 mL)或1/200(5 mL)，加水稀釋?zhuān)瞥膳囵B液。現將制備培養基母液所需的各類(lèi)物質(zhì)的量列出，供配制時(shí)使用。
大量元素（母液Ⅰ） mg/L NH4NO3 33 000 KNO3 38 000 CaCl2·2H2O 8 800 MgSO4·7H2O 7 400 KH2PO4 3 400 微量元素（母液Ⅱ） KI 166 H3BO3 1 240 MnSO4·4H2O 4 460 ZnSO4·7H2O 1 720 Na2MoO4·2H2O 50 CuSO4·5H2O 5 CoCl2·6H2O 5 鐵鹽（母液Ⅲ） FeSO4·7H2O 5 560 Na2-EDTA·2H2O 7 460 有機成分（母液Ⅳ） ⅣA 肌醇 20 000 ⅣB 煙酸 100 鹽酸吡哆醇（維生素B6） 100 鹽酸硫胺素（維生素B1） 100 甘氨酸 400 以上各種營(yíng)養成分的用量，除了母液Ⅰ為20倍濃縮液外，其余的均為200倍濃縮液。 上述幾種母液都要單獨配成1 L的貯備液。
其中，母液Ⅰ、母液Ⅱ及母液Ⅳ的配制方法是：每種母液中的幾種成分稱(chēng)量完畢后，分別用少量的蒸餾水徹底溶解，然后再將它們混溶，最后定容到1 L。 母液Ⅲ的配制方法是：將稱(chēng)好的FeSO4·7H2O和Na2-EDTA·2H2O分別放到450 mL蒸餾水中，邊加熱邊不斷攪拌使它們溶解，然后將兩種溶液混合，并將pH調至55，最后定容到1 L，保存在棕色玻璃瓶中。
各種母液配完后，分別用玻璃瓶貯存，并且貼上標簽，注明母液號、配制倍數、日期等，保存在冰箱的冷藏室中。 MS培養基中還需要加入2,4-二氯苯氧乙酸（2,4-D）、萘乙酸（NAA）、6芐基嘌呤（6BA）等植物生長(cháng)調節物質(zhì)，并且分別配成母液（01 mg/mL）。
其配制方法是：分別稱(chēng)取這3種物質(zhì)各10 mg，將2,4-D和NAA用少量（1 mL）無(wú)水乙醇預溶，將6BA用少量（1 mL）的物質(zhì)的量濃度為0.1 mol/L的NaOH溶液溶解，溶解過(guò)程需要水浴加熱，最后分別定容至100 mL，即得質(zhì)量濃度為01 mg/mL的母液。 配制培養液 用量筒或移液管從各種母液中分別取出所需的用量：母液Ⅰ為50 mL，母液Ⅱ、Ⅲ、ⅣA和ⅣB各5 mL。
再取2,4D 5 mL、NAA 1 mL，與各種母液一起放入燒杯中。 配制培養液時(shí)應注意：①在使用提前配制的母液時(shí)，應在量取各種母液之前，輕輕搖動(dòng)盛放母液的瓶子，如果發(fā)現瓶中有沉淀、懸浮物或被微生物污染，應立即淘汰這種母液，重新進(jìn)行配制；②用量筒或移液管量取培養基母液之前，必須用所量取的母液將量筒或移液管潤洗2次；③量取母液時(shí)，最好將各種母液按將要量取的順序寫(xiě)在紙上，量取1種，劃掉1種，以免出錯。
溶化瓊脂 用粗天平分別稱(chēng)取瓊脂9 g、蒸糖30 g，放入1 000 mL的搪瓷量杯中，再加入蒸餾水750 mL，用電爐加熱，邊加熱邊用玻璃棒攪拌，直到液體呈半透明狀。然后再將配好的混合培養液加入到煮沸的瓊脂中，最后加蒸餾水定容至1 000 mL，攪拌均勻。
需要注意的是，在加熱瓊脂、制備培養基的過(guò)程中，操作者千萬(wàn)不能離開(kāi)，否則沸騰的瓊脂外溢，就需要重新稱(chēng)量、制備。此外，如果沒(méi)有搪瓷量杯，可用大燒杯代替。
但要注意大燒杯底的外表面不能沾水，否則加熱時(shí)燒杯容易炸裂，使溶液外溢，造成燙傷。 調pH 用滴管吸取物質(zhì)的量濃度為1 mol/L的NaOH溶液，逐滴滴入溶化的培養基中，邊滴邊攪拌，并隨時(shí)用精密的pH試紙（54~70）測培養基的pH，一直到培養基的pH為58為止（培養基的pH必須嚴格控制在58）。
培養基的分裝 溶化的培養基應該趁熱分裝。分裝時(shí)，先將培養基倒入燒杯中，然后將燒杯中的培養基倒入錐形瓶（50 mL或100 mL）中。
注意不要讓培養基沾到瓶口和瓶壁上。錐形瓶中培養基的量約為錐形瓶容量的1/5~1/4。
每1 000 mL培養基，可分裝25~30瓶。 培養基分裝完畢后，應及時(shí)封蓋瓶口。
用2塊硫酸紙（每塊大小約為9 cm*9 cm）中間夾1層薄牛皮紙封蓋瓶口，并用線(xiàn)繩捆扎。最后在錐形瓶外壁貼上標簽。
高壓滅菌 培養基的高壓滅菌包括以下幾個(gè)步驟。 第一，碼放錐形瓶。
將裝有培養基的錐形瓶直立于金屬小筐中，再放入高壓蒸氣滅菌鍋內。如果沒(méi)有金屬小筐，可以在兩層錐形瓶之間放一塊玻璃板隔開(kāi)。
第二，放置其他需要滅菌的物品。將其他需要滅菌的物品也放入高壓蒸氣滅菌鍋內，如裝有蒸餾水的錐形瓶、帶螺口蓋的玻璃瓶、燒杯、廣口瓶（以上物品都要用牛皮紙封口），用牛皮紙包裹的培養皿、剪刀、解剖刀、鑷子、濾紙、鉛筆等。
第三，滅菌。待需要滅菌的物品碼放完畢，蓋上鍋蓋。
在98 kPa、121.3 ℃下，滅菌20 min。 滅菌后取出錐形瓶，讓其中的培養基自然冷卻凝固。
最好放置1 d后再使用。
8.MS的配制過(guò)程及要點(diǎn)
MS培養基的配制
植物組織培養中常用的一種培養基是MS培養基。MS培養基的配制包括以下步驟。
培養基母液的配制和保存 MS培養基含有近30種營(yíng)養成分，為了避免每次配制培養基都要對這幾十種成分進(jìn)行稱(chēng)量，可將培養基中的各種成分，按原量的20倍或200倍分別稱(chēng)量，配成濃縮液，這種濃縮液叫做培養基母液。這樣每次使用時(shí)，取其總量的1/20(50 mL)或1/200(5 mL)，加水稀釋?zhuān)瞥膳囵B液。現將制備培養基母液所需的各類(lèi)物質(zhì)的量列出，供配制時(shí)使用。
大量元素（母液Ⅰ） mg/L
NH4NO3 33 000
KNO3 38 000
CaCl2·2H2O 8 800
MgSO4·7H2O 7 400
KH2PO4 3 400
微量元素（母液Ⅱ）
KI 166
H3BO3 1 240
MnSO4·4H2O 4 460
ZnSO4·7H2O 1 720
Na2MoO4·2H2O 50
CuSO4·5H2O 5
CoCl2·6H2O 5
鐵鹽（母液Ⅲ）
FeSO4·7H2O 5 560
Na2-EDTA·2H2O 7 460
有機成分（母液Ⅳ）
ⅣA
肌醇 20 000
ⅣB
煙酸 100
鹽酸吡哆醇（維生素B6） 100
鹽酸硫胺素（維生素B1） 100
甘氨酸 400
以上各種營(yíng)養成分的用量，除了母液Ⅰ為20倍濃縮液外，其余的均為200倍濃縮液。
培養基母液的配制和保存 MS培養基含有近30種營(yíng)養成分，為了避免每次配制培養基都要對這幾十種成分進(jìn)行稱(chēng)量，可將培養基中的各種成分，按原量的20倍或200倍分別稱(chēng)量，配成濃縮液，這種濃縮液叫做培養基母液。這樣每次使用時(shí)，取其總量的1/20(50 mL)或1/200(5 mL)，加水稀釋?zhuān)瞥膳囵B液。現將制備培養基母液所需的各類(lèi)物質(zhì)的量列出，供配制時(shí)使用。
大量元素（母液Ⅰ） mg/L
NH4NO3 33 000
KNO3 38 000
CaCl2·2H2O 8 800
MgSO4·7H2O 7 400
KH2PO4 3 400
微量元素（母液Ⅱ）
KI 166
H3BO3 1 240
MnSO4·4H2O 4 460
ZnSO4·7H2O 1 720
Na2MoO4·2H2O 50
CuSO4·5H2O 5
CoCl2·6H2O 5
鐵鹽（母液Ⅲ）
FeSO4·7H2O 5 560
Na2-EDTA·2H2O 7 460
有機成分（母液Ⅳ）
ⅣA
肌醇 20 000
ⅣB
煙酸 100
鹽酸吡哆醇（維生素B6） 100
鹽酸硫胺素（維生素B1） 100
甘氨酸 400
以上各種營(yíng)養成分的用量，除了母液Ⅰ為20倍濃縮液外，其余的均為200倍濃縮液。
上述幾種母液都要單獨配成1 L的貯備液。其中，母液Ⅰ、母液Ⅱ及母液Ⅳ的配制方法是：每種母液中的幾種成分稱(chēng)量完畢后，分別用少量的蒸餾水徹底溶解，然后再將它們混溶，最后定容到1 L。
母液Ⅲ的配制方法是：將稱(chēng)好的FeSO4·7H2O和Na2-EDTA·2H2O分別放到450 mL蒸餾水中，邊加熱邊不斷攪拌使它們溶解，然后將兩種溶液混合，并將pH調至5
