鑒別dna和rna實(shí)驗(yàn)方法(分離DNA和RNA的方法)

1.分離DNA和RNA的方法有哪些

鹽析法 DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同 利用這一特點(diǎn) 選擇適當(dāng)?shù)柠}濃度就能使DNA充分溶解 而使雜質(zhì)沉淀 或者相反 以達(dá)到分離目的 DNA在NaCl溶液中的溶解度先增大后減小 在DNA溶解度最低時(shí) DNA從溶液中析出 而其他雜質(zhì)還留在溶液中 達(dá)到粗提取的目的

酶水解法 采用RNase（可以買）水解雜質(zhì)RNA如果混入DNase酶可以采用100度加熱15min使其失活 RNase不會失活 反之采用DNase可以提取RNA 混了RNase、時(shí)加入蛋白酶K或加碘乙酸鈉

2.分離DNA和RNA主要方法有哪些

[思路分析]：①取雞血細(xì)胞液（其紅細(xì)胞橢圓具核，除駱駝外，豬、羊、狗等哺乳動物紅細(xì)胞無核），或取新鮮豬肝、菜花、洋蔥等材料.雖然在細(xì)菌的轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)中提取的是無核細(xì)胞中的DNA，但一般而言，均是從具核的生物材料中提取DNA.當(dāng)然，在提取出的DNA中也含有一定量的胞質(zhì)DNA，即線粒體DNA和葉綠體DNA.值得推介的材料是洋蔥，取材容易，操作簡便，效果明顯.將家用加鹽洗潔精與洋蔥碎屑混合研磨并過濾后，再加酒精，微搖后即出現(xiàn)白色的毛絮狀DNA混合物.②使紅細(xì)胞溶血破膜以及化學(xué)藥劑十二烷基磺酸鈉 SDS（洗潔精的主要成分）或三氯乙酸溶膜.在低滲溶液中，如加蒸餾水使血細(xì)胞過度滲透吸水直至破裂，同時(shí)用玻棒加速血細(xì)胞及核破裂，經(jīng)一級過濾后濾出液為DNA核蛋白和RNA核蛋白.對于菜花、洋蔥等植物材料，在研磨破壞其細(xì)胞壁的同時(shí)，可考慮適量加入乙二胺四乙酸EDTA以防止DNA酶解.③利用DNA和RNA溶解度的不同析出DNA.在濃氯化鈉溶液（2 mol/L）中，DNA核蛋白的溶解度很大，而RNA核蛋白的溶解度很小.在稀氯化鈉溶液（0.14mol/L）中DNA的溶解度最低，蛋白質(zhì)的溶解度很高而出現(xiàn)鹽溶現(xiàn)象，經(jīng)二級過濾后濾出液主要為DNA粗制品.④DNA不溶于酒精，經(jīng)三級過濾后，再利用乙醇沉淀法使其他物質(zhì)溶于酒精而進(jìn)一步純化DNA.⑤二苯胺或甲基綠鑒定法即DNA遇二苯胺（沸水浴）被染成藍(lán)色，遇甲基綠被染成藍(lán)綠色，且顏色的深淺與DNA純化程度有關(guān).在此過程中設(shè)計(jì)對照實(shí)驗(yàn)，以增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)中二苯胺對DNA專一性顯色結(jié)果的可信度.分離DNA和RNA主要方法有哪些。

3.【如何設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)區(qū)別RNA和DNA】

首先要清楚DNA和RNA的區(qū)別，然后依此來設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)RNA與DNA最重要的區(qū)別一是RNA只有一條鏈，二是它的堿基組成與DNA的不同，RNA沒有堿基T（胸腺嘧啶），而有堿基U（尿嘧啶）.所以導(dǎo)致他們有以下性質(zhì)上的不同.1.兩性解離：DNA無，只有酸解離，堿基被屏蔽（在分子內(nèi)部形成了H鍵）.RNA有，有PI.2.粘度大：DNA;RNA，粘度由分子長度/直徑?jīng)Q定，DNA為線狀分子，RNA為線團(tuán).3.堿的作用：DNA耐堿RNA易被堿水解.4.顯色反應(yīng)：鑒別DNA和RNA+濃HCl RNA ------→ 綠色化合物DNA ------→ 藍(lán)紫色化合物苔黑酚二苯胺啡啶溴紅（熒光染料）和溴嘧啶都可對DNA染色，原理是卡在分子中，DNA的離心和電泳顯色可用它們.DNA和RNA的鑒別染色利用吖啶橙的變色特性可鑒別DNA和RNA.吖啶橙作為一種熒光染料已被用于染色固定，非固定細(xì)胞核酸，或作溶酶體的一種標(biāo)記.觀察死亡細(xì)胞熒光變色性變化以及區(qū)別分裂細(xì)胞和靜止細(xì)胞群體.雖然測定DNA和RNA含量時(shí)較難獲得好的重復(fù)性結(jié)果，但該方法已被許多實(shí)驗(yàn)室廣泛采用.5.溶解性：都溶于水而不溶于乙醇，因此，常用乙醇來沉淀溶液中的DNA和RNA.DNA溶于苯酚而RNA不溶，故可用苯酚來沉淀RNA.6.紫外吸收：核酸的λm=260nm，堿基展開程度越大，紫外吸收就越厲害.當(dāng)A=1時(shí)，DNA:50ug/ml,RNA和單鏈DNA:40ug/ml，寡核苷酸：20ug/ml.用A260/A280還可來表示核酸的純度.7.沉降速度：對于拓?fù)洚悩?gòu)體（核苷酸數(shù)目相同的核酸），其沉降速度從達(dá)到小依次為：RNA ； 超螺旋DNA > 解鏈環(huán)狀DNA ； 松弛環(huán)狀DNA ； 線形DNA也就是在離心管中最上層是線形DNA，最下面是RNA.8.電泳：核苷酸、核酸均可以進(jìn)行電泳，泳動速度主要由分子大小來決定，因此，電泳是測定核酸分子量的好方法.9.DNA分子量測定最直接的方法：用適當(dāng)濃度的EB（溴嘧啶）染色DNA，可以將其他形式的DNA變成線形DNA，用電鏡測出其長度，按B-DNA模型算出bp數(shù)，根據(jù)核苷酸的平均分子量就可計(jì)算出DNA的分子量.。