通過哪些方法可以觀察到細(xì)菌的細(xì)胞壁(細(xì)菌鑒定辦法,常見細(xì)菌的鑒定辦法就可以)
1.細(xì)菌鑒定辦法有哪些,常見細(xì)菌的鑒定辦法就可以
細(xì)菌的鑒定通過分離培養(yǎng)獲得的病原菌，必須達(dá)到不含有其他微生物的純培養(yǎng)程度，才能進(jìn)行系統(tǒng)鑒定。
系統(tǒng)鑒定就是通過病原菌的形態(tài)結(jié)構(gòu)、生長(zhǎng)特性、抗原性和病原性等檢測(cè)，并用已知標(biāo)準(zhǔn)免疫血清確定分離細(xì)菌的屬、種和型。微生物鑒定的程序通常是根據(jù)其形態(tài)，生長(zhǎng)、生化特性等定種，最后根據(jù)抗原的免疫血清學(xué)檢查定型。
（一）形態(tài)學(xué)檢查 各種細(xì)菌的形態(tài)，在適宜的環(huán)境下是相對(duì)穩(wěn)定的。但環(huán)境的改變，如培養(yǎng)基條件的改變，抗生素和化學(xué)藥品的作用等，均可使細(xì)菌產(chǎn)生不規(guī)則的形態(tài)，并可出現(xiàn)細(xì)胞壁的缺陷和多樣性。
為此，在作細(xì)菌形態(tài)鑒定時(shí)，必須按被檢菌的生長(zhǎng)要求，選擇適宜的培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件，以及適宜的培養(yǎng)時(shí)間和檢查方法，才能作出正確的形態(tài)學(xué)鑒定。形態(tài)學(xué)檢查一般包括二方面：肉眼觀察和顯微鏡檢查。
1.肉眼觀察 肉眼觀察主要觀察細(xì)菌在固體、液體、半固體，鑒別培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)情況。在固體培養(yǎng)基上要觀察菌落形態(tài)、大小、顏色是否均勻一致，表面是光滑濕潤(rùn)，還是干燥無(wú)光或呈皺紋狀，邊緣是整齊還是不規(guī)則，菌落是隆起、扁平，還是乳頭樣，是透明、半透明或不透明。
在液體培養(yǎng)基中，要觀察培養(yǎng)基是否呈均勻渾濁，管底有無(wú)沉淀，液面有無(wú)菌膜，是否產(chǎn)氣等。在半固體培養(yǎng)基上應(yīng)觀察細(xì)菌是否沿著接種線生長(zhǎng)，是呈毛刷樣生長(zhǎng)還是均勻生長(zhǎng)，上下生長(zhǎng)是否一致。
在鑒別培養(yǎng)基上，應(yīng)觀察其生長(zhǎng)情況是否與預(yù)期的相一致，在血瓊脂培養(yǎng)基上還要觀察是否溶血及溶血圈的特點(diǎn)，在某些培養(yǎng)基上還要注意是否有臭味等。2.顯微鏡觀察 在作細(xì)菌個(gè)體形態(tài)學(xué)檢查時(shí)，要根據(jù)被檢菌的種類和檢查項(xiàng)目，選用相應(yīng)的染色方法，同時(shí)要注意選擇適合的培養(yǎng)基以及細(xì)菌培養(yǎng)的時(shí)間，才能達(dá)到預(yù)期的目的。
一般以18-24小時(shí)（生長(zhǎng)時(shí)間長(zhǎng)的細(xì)菌除外）的幼嫩培養(yǎng)菌為宜。例如，作革蘭氏染色檢查時(shí)，培養(yǎng)時(shí)間長(zhǎng)的陳舊細(xì)菌，可能由陽(yáng)性變?yōu)殛幮浴?/p>
作細(xì)菌運(yùn)動(dòng)性檢查時(shí)，液體培養(yǎng)基的幼嫩培養(yǎng)物（幾小時(shí)到十幾小時(shí)）最為適宜。作炭疽莢膜染色時(shí)，因炭疽桿菌在一般培養(yǎng)基上不形成莢膜，而在動(dòng)物體內(nèi)形成明顯的莢膜，因此，應(yīng)先接種小鼠，取死亡動(dòng)物的病料作涂片標(biāo)本鏡檢。
作鞭毛染色時(shí)，以液體培養(yǎng)基為宜。芽胞的形成，因細(xì)菌種類不同，往往對(duì)培養(yǎng)條件如培養(yǎng)基、空氣和培養(yǎng)時(shí)間等而異，但一般均要求較長(zhǎng)時(shí)間。
鏡檢時(shí)除注意其基本形態(tài)結(jié)構(gòu)和大?。ㄒ脺y(cè)微計(jì)測(cè)量）外，還應(yīng)注意其排列狀態(tài)、菌端形狀、有無(wú)兩極染色、有無(wú)形成芽胞和莢胞等。必要時(shí)可用電鏡觀察其微細(xì)結(jié)構(gòu)。
3.常用的幾種染色方法 涂片用的載玻片需用清潔液洗凈、擦干、不留油質(zhì)，否則培養(yǎng)物不能均勻地推開。被檢材料如果是肉湯培養(yǎng)物，用鉑金耳環(huán)取一滴，均勻涂抹于載玻片上，涂抹的范圍約有手指甲大即可。
隨后，在酒精燈火焰上加熱使之固定（即火焰固定）；被檢材料如果是固體培養(yǎng)物，先滴一滴水（常用生理鹽水）于載玻片上，用鉑金耳環(huán)取少許培養(yǎng)物，在水滴中混勻，培養(yǎng)物不宜太多，菌體看不清楚。膿汁、淋巴液、乳汁也按同樣方法制備抹片。
血液和病變組織，直接涂抹在載玻片上，組織抹片也不能太厚，否則看不見細(xì)菌，細(xì)菌培養(yǎng)物抹片用火焰固定，組織抹片常用甲醇或甲醛固定。
2.哪些細(xì)菌含有細(xì)胞壁
雖說細(xì)胞壁是細(xì)菌細(xì)胞的一般構(gòu)造，但在特殊情況下也可發(fā)現(xiàn)有幾種細(xì)胞壁缺損的或無(wú)細(xì)胞壁的細(xì)菌存在：①原生質(zhì)體（protoplast）：指在人工條件下用溶菌酶除盡原有細(xì)胞壁或用青霉素抑制細(xì)胞壁的合成后，所留下的僅由細(xì)胞膜包裹著的脆弱細(xì)胞，一般由革蘭氏陽(yáng)性菌形成；②球狀體或原生質(zhì)球（sphaeroplast）：指還殘留部分細(xì)胞壁的原生質(zhì)體，一般由革蘭氏陰性細(xì)菌所形成；③L型細(xì)菌：1935年時(shí)，在英國(guó)李斯德預(yù)防醫(yī)學(xué)研究所中發(fā)現(xiàn)一種由自發(fā)突變而形成的細(xì)胞壁缺損的細(xì)菌——（念珠狀鏈桿菌），它的細(xì)胞膨大，對(duì)滲透壓十分敏感，在固體培養(yǎng)基表面形成“油煎蛋”似的小菌落。
由于李斯德（Lister）研究所的第一字母是“L”，故稱L型細(xì)菌。許多革蘭氏陽(yáng)性和陰性細(xì)菌都可形成L型。
目前L型細(xì)菌的概念有時(shí)用得較雜，甚至還把原生質(zhì)體或球狀體也包括在內(nèi)。狹義地說，L型細(xì)菌應(yīng)專指那些在實(shí)驗(yàn)室中通過自發(fā)突變而形成的遺傳性穩(wěn)定的細(xì)胞壁缺陷菌株。
3.用顯微鏡觀察細(xì)菌的步驟
一、用臟手上的細(xì)菌制裝片：
1、收集手上細(xì)菌，用少量無(wú)菌水（可用冷開水代替）沖洗臟手，讓洗手的水流到培養(yǎng)皿中。這些臟水就是細(xì)菌培養(yǎng)液。
2、制取細(xì)菌裝片，取甲、乙兩塊潔凈的載玻片，分別在兩玻片的中央各滴一小滴細(xì)菌培養(yǎng)液；然后在甲片上蓋好蓋玻片后直接用600倍的顯微鏡觀察。
（用稍偏暗的視野，調(diào)節(jié)到位可以看到多種細(xì)菌和其它微生物。很容易看到活動(dòng)的微生物，這樣對(duì)兒童更有吸引力和教育意義。）如果你想進(jìn)一步放大并會(huì)操作，選定觀察的物象后，可把此物象移到視野正中央，再轉(zhuǎn)換更高倍數(shù)的鏡頭觀察即可。
3、在乙片的細(xì)菌培養(yǎng)液滴上滴一小滴龍膽紫染色液，用牙簽將細(xì)菌培養(yǎng)液和龍膽紫液攪勻、并將液滴推開，再用酒精燈加熱液滴（約5秒鐘）后讓它自然晾干（約5分鐘）。
再用600倍的顯微鏡直接觀察，既可以看到染成深藍(lán)色的多種細(xì)菌和其它微生物。不過此時(shí)看到的微生物都已死亡、并被固定，因此看不到它們的活動(dòng)狀態(tài)。
二、制取洗手后的對(duì)照裝片。
1、洗手-----將手用香皂洗干凈，用潔凈的干毛巾揩干手；
2、收集細(xì)菌培養(yǎng)液-------用少量無(wú)菌水沖洗雙手，讓洗手液流入潔凈的培養(yǎng)皿中；
3、制細(xì)菌裝片-----制片過程與以上裝片過程相同，參照制片即可。
擴(kuò)展資料：
細(xì)菌的基本形態(tài)與大小
(1)球菌：
球菌是外形呈圓球形或橢圓形的細(xì)菌，直徑0.5~1微米，有以下幾種類型：
①單球菌：?jiǎn)为?dú)存在，如尿素小球菌；②雙球菌：如肺炎雙球菌；
③鏈球菌：如乳酸鏈球菌；④四聯(lián)球菌：形成的4個(gè)細(xì)胞排列在一起，成田字，如四聯(lián)球菌；
⑤八疊球菌：如尿素生孢八疊球菌；⑥葡萄球菌：如金黃色葡萄球菌（Staphylococcusaureus）。
(2)桿菌：
外形為桿狀的細(xì)菌稱桿菌，常有長(zhǎng)寬接近的短桿或球桿狀菌，如甲烷短桿菌屬（Methano—brevibacter）;
長(zhǎng)寬相差較大的棒桿狀或長(zhǎng)桿狀菌，如枯草芽孢桿菌（Bacillussubtilis）、梭狀桿菌（Bacteriumfusiformis）;
分枝狀或叉狀菌，如雙歧桿菌屬（Bifidobacterium）；竹節(jié)狀（兩端平截），如炭疽芽孢桿菌（Bacillusanthracis）等。
按桿菌細(xì)胞的排列方式不同則有成對(duì)的雙桿菌、呈鏈狀的鏈桿菌，另外，常有柵狀、“八”字狀以及由鞘衣包裹在一起的絲狀等多種。典型的桿菌有大腸桿菌、枯草桿菌、鏈桿菌、變形桿菌[2]。
(3)螺旋狀：
螺旋狀的細(xì)菌稱螺旋菌，一般長(zhǎng)5~50微米，寬0.5~5微米，根據(jù)菌體的彎曲可分為：
①弧菌（Vibrio）：螺旋不足一環(huán)者呈香蕉狀或逗點(diǎn)狀，如霍亂弧菌（Vibriocholerae）；②螺菌（Spirillum）：滿2~6環(huán)的小型、堅(jiān)硬的螺旋狀細(xì)菌，如小螺菌（Spirillumminor）;
③螺旋體（Spirochaeta）：旋轉(zhuǎn)周數(shù)多（通常超過6環(huán)）、體長(zhǎng)而柔軟的螺旋狀細(xì)菌，如梅毒螺旋體（TreponemaPallidum）。
參考資料來源：百度百科-細(xì)菌
