1.首先在進行溶解前,先對樣品進行研磨,研磨的充分程度,可以直接影響到脂肪的提取速度,研磨充分可以使脂肪更好的溶解在石油醚、乙醚等有機溶劑中。
2.當樣品被研磨后,將樣品裝入濾紙筒,此時濾紙筒一定要緊密,而且濾紙筒的高度不能超過回流彎管,否則溶劑不易穿透樣品。
3.提取時是用乙醚作為脂肪的溶劑,乙醚的沸點為40℃左右,因此溫度不要太過,一般的70-85℃左右即可。
4.實驗中使用的試劑必須是無水試劑,例如:如果實驗中用到的是乙醚,那么乙醚必須使無水乙醚,因為如果含有其他的物質(zhì),如水,就可能將樣品中的糖分或者無機物抽出,影響脂肪的測定結(jié)果。因此,也要保證實驗中用到的溶劑杯以及其他物品都是干燥的。
5. 冷凝管上端最好連接一個氯化鈣干燥管,這樣不僅可以防止空氣中水分進入, 而且還可以避免乙醚揮發(fā)在空氣中,這樣可防止實驗室微小環(huán)境空氣的污染。 如無此裝置,塞一團干脫脂棉球亦可。一般全自動或者半自動的機器在冷凝管頂部會有蓋子,這樣也能很好的起到保護實驗,避免溶劑揮發(fā)的效果。
6.用脂肪抽提儀對脂肪進行充分抽提后,就可以對樣品及醚提出物進行烘干或者對溶劑杯進行烘干。烘干時間不宜過長,因為一些不飽和脂肪酸,容易在加熱過程中被氧化而影響脂肪測定的最終結(jié)果。在沒有真空干燥箱的條件下,可以在100-105℃下干燥1.5-3小時。
一般是用正己烷直接用索氏提取器,或直接回流提起,然后濃縮回收溶劑即可得到粗脂肪。
索氏提取器是由提取瓶、提取管、冷凝器三部分組成的,提取管兩側(cè)分別有虹吸管和連接管。各部分連接處要嚴密不能漏氣。提取時,將待測樣品包在脫脂濾紙包內(nèi),放入提取管內(nèi)。提取瓶內(nèi)加入石油醚,加熱提取瓶,石油醚氣化,由連接管上升進入冷凝器,凝成液體滴入提取管內(nèi),浸提樣品中的脂類物質(zhì)。待提取管內(nèi)石油醚液面達到一定高度,溶有粗脂肪的石油醚經(jīng)虹吸管流入提取瓶。流入提取瓶內(nèi)的石油醚繼續(xù)被加熱氣化、上升、冷凝,滴入提取管內(nèi),如此循環(huán)往復,直到抽提完全為止。
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