聚凝胺交叉配血實(shí)驗(yàn)(交叉配血試驗(yàn)的注意事項(xiàng))
1.交叉配血試驗(yàn)的注意事項(xiàng)
待檢紅細(xì)胞懸液不宜過(guò)稀或過(guò)濃；
所用的試劑必須在有效期內(nèi)；
氣溫較高時(shí)，為防止標(biāo)本干涸所致的假陽(yáng)性，可將玻片放入有一濕棉球的平皿中。若室溫過(guò)低，可將玻片置于28℃右右的溫箱中；
注意區(qū)分紅細(xì)胞的疊連現(xiàn)象與凝集現(xiàn)象。前者滴加生理鹽水1~2滴混勻后，紅細(xì)胞即可分散成渾濁狀，而后者則不因此而改變；
利用已知A型和B型紅細(xì)胞與一系列稀釋的待檢血清作凝集反應(yīng)，根據(jù)凝集效價(jià)（以出現(xiàn)凝集的最高稀釋度）的高低可作為判斷體液免疫功能的一項(xiàng)指標(biāo)。多數(shù)免疫功能正常的半歲嬰兒，除AB型外，血清中相應(yīng)的抗A效價(jià)≥1:8，抗B效價(jià)≥1:4。一歲后，凝集效價(jià)也相應(yīng)提高。
2.聚凝胺交叉配血試驗(yàn)的注意事項(xiàng)是什么?
聚凝胺交叉配血試驗(yàn)的注意事項(xiàng)如下： ①可以用EDTA抗凝之血漿代替血清使用； ②若患者血清（血漿）含肝素，如血液透析患者，須多加4-6滴Polyrene溶液以中和肝素； ③若試劑使用前為低溫C存，請(qǐng)恢復(fù)室溫再行操作； ④加做輔助性抗球蛋白試驗(yàn)，目的是增 加檢測(cè)抗-K的敏感性，對(duì)檢測(cè)其他紅細(xì)胞抗體無(wú)幫助； ⑤在冬天室溫極低的情況下，操作交 叉配血試驗(yàn)，某些患者血清中可能含有冷凝集素，可導(dǎo)致假陽(yáng)性的結(jié)果出現(xiàn)。
若有此懷疑， 建議在最后滴入復(fù)懸液時(shí)，將試管立即置入37°C水浴中，輕輕搖動(dòng)試管混合，并在30秒內(nèi) 觀察結(jié)果； ⑥離心力所對(duì)應(yīng)轉(zhuǎn)速為3400rpm。
3.聚凝胺交叉配血試驗(yàn)的原理是什么?
交叉配血試驗(yàn)，是指受血者的血清加供血者的紅細(xì)胞懸液，供血者的血清加受血者的紅細(xì)胞懸液，同時(shí)進(jìn)行凝集試驗(yàn)。
交叉配血試驗(yàn)包括主試驗(yàn)和副試驗(yàn)兩種。前者用受血者的血清與供血者的紅細(xì)胞懸液做試驗(yàn)，以發(fā)現(xiàn)受血者的血清中是否含有與供血者紅細(xì)胞反應(yīng)的抗體，又稱直接配合或主側(cè)配合。
后者則用供血者的血清與受血者紅細(xì)胞做試驗(yàn)，以發(fā)現(xiàn)供血者血清中是否有不合抗體，又稱間接配合。其目的是驗(yàn)證供者與受者ABO血型鑒定是否正確，以防止溶血性輸血反應(yīng)。
此外，也可檢出ABO血型系統(tǒng)的不規(guī)則凝集素，以及發(fā)現(xiàn)ABO系統(tǒng)以外的其他血型抗體。交叉配血試驗(yàn)有多種方式，如鹽水法、膠體介質(zhì)配血法、抗球蛋白法、聚凝胺法等。
輸血時(shí)，不僅要鑒定ABO血型和Rh血型，即使輸入同型血，或受血者再次接受同一供血者的血液，都必須做交叉配血試驗(yàn)。
4.聚凝胺配血法操作流程
操作方法：
1、取出3支試管分別標(biāo)記主、次及對(duì)照管測(cè)試。
主測(cè)管：2113 病人血清2滴 + 獻(xiàn)血者3%~5%血球（洗滌不洗滌均可）52611滴，血球用生理鹽水稀釋
次測(cè)管： 獻(xiàn)血者血清2滴 + 病人3%~5%血球（洗滌不洗滌均可）1滴，血球用生理鹽水稀釋
對(duì)照管： 2滴陽(yáng)性對(duì)照血清 + 獻(xiàn)血者3%~5%血球（洗滌不洗滌均可）1滴，血球用生理鹽水稀釋
2、各加低離子介溶液0.65ml， 輕輕混合均勻，于室溫下，靜置1分鐘
3、滴加2滴凝聚胺溶液，輕輕混合均勻，于室溫下靜置15秒鐘
4、離心，3400轉(zhuǎn)/10秒鐘，然后把上清夜倒掉，不要倒干，使管底保留大4102約0.1ml的液體
5、測(cè)紅血球有無(wú)變成1653凝塊（即凝集反應(yīng)），如果沒(méi)有凝塊，則版必須重做。權(quán)重做后，仍然沒(méi)有凝集現(xiàn)象出現(xiàn)，可能試劑失效，請(qǐng)與代理商或原廠商聯(lián)系
6、加入2滴復(fù)懸液，并輕輕混合，觀察結(jié)果。若為凝聚胺引起的非免疫性凝集，應(yīng)該在1分鐘內(nèi)散開(kāi)；若異體抗體所引起的免疫性凝集，則不會(huì)散開(kāi)
7、倒在玻片上用肉眼或顯微鏡觀察有無(wú)凝集，如有凝集反應(yīng)，表示不合，此獻(xiàn)血者的血液不宜給病人使用；如無(wú)凝集反應(yīng)，表示獻(xiàn)血者的血液適合給病人輸注。
實(shí)驗(yàn)完畢后將聚凝胺試劑放回冰箱內(nèi)。
5.影響聚凝胺交叉配血的因素有哪些
⑴可以用含EDTA之血漿代替血清使用。
⑵若病人血清（血漿）含肝素，如洗腎患者，須多加4—6滴Polyrene溶液以中和肝素。⑶若試劑使用前為低溫貯存，請(qǐng)恢復(fù)室溫再行操作。
⑷加做輔助性抗球蛋白試驗(yàn)，目的是增加檢測(cè)抗-K的敏感性，對(duì)檢測(cè)其他紅細(xì)胞抗體無(wú)幫助。 ⑸在冬天室溫極低的情況下，操作交叉配血試驗(yàn)，某些病人血清中可能含有寒冷凝集素等因素，可導(dǎo)致假陽(yáng)性的結(jié)果出現(xiàn)。
若有此懷疑，建議在最后滴入Resuspending時(shí)，將試管立即置入37℃水浴中，輕輕搖動(dòng)試管混合，并在30秒內(nèi)觀察結(jié)果。 ⑹離心力所對(duì)應(yīng)轉(zhuǎn)速為3400rpm.。
6.交叉配血時(shí)受血者血標(biāo)本采集時(shí)注意事項(xiàng)有哪些
輸血前1、輸血前當(dāng)晚要有充足的睡眠，精神狀態(tài)良好； 2、輸血前一天和當(dāng)天2113早晨，不要吃油膩食物； 3、不要空腹輸血，應(yīng)當(dāng)吃些清淡的食物，如稀飯、饅頭、面包等。
4，思想上有放松，不要對(duì)輸血覺(jué)得有5261負(fù)擔(dān)。獻(xiàn)血后：1、拔針后前臂伸直后稍上抬，用三個(gè)手指用力按壓針眼10分鐘以上，不要揉搓針，24小時(shí)內(nèi)勿清洗針眼；2、輸血后1-2天應(yīng)適當(dāng)4102休息，勿熬夜或進(jìn)行劇烈運(yùn)動(dòng)，如踢足球、打籃球、跑步或駕車及高空作業(yè)等；3、少部分人抽1653血后有可能出現(xiàn)疲倦感、嗜睡，這大多是第一次丑血出現(xiàn)的生理反應(yīng)現(xiàn)象，不必?fù)?dān)心，適當(dāng)休息可自行恢復(fù)； 4、輸血后一兩天內(nèi)勿暴食暴飲，勿喝酒。
內(nèi)在平常飲食的基礎(chǔ)上可適當(dāng)補(bǔ)充些蛋白質(zhì)和水果。5、若針眼處有青紫現(xiàn)象，這是由于當(dāng)時(shí)止血不好或是血管少量滲血所致，幾天內(nèi)會(huì)自行吸收，不會(huì)留下痕跡；若青紫面較大，可在獻(xiàn)血二十四小時(shí)后熱敷容即可消除。
6、輸血后注意不要著涼，避免感冒。
7.交叉配血的試驗(yàn)是怎樣的
材料和試劑 診斷用人血型抗A血清、診斷用人血型抗B血清（常在血清中加入不同顏色的染料以示區(qū)別，如A型紅色，B型藍(lán)色）、生理鹽水、供血者血清、受血者血清、供血者的2%紅細(xì)胞懸液、受血者的2%紅細(xì)胞懸液。
器具 凹玻片或載玻片、小試管、尖嘴滴管、無(wú)菌刺血針、牙簽、酒精棉球、無(wú)菌干棉球、試管架、顯微鏡、記號(hào)筆等。 操作過(guò)程交叉配血1、首先準(zhǔn)備好受血者和獻(xiàn)血者的血樣。
2、分別用生理鹽水配好用受血者2·5%的紅細(xì)胞鹽水懸液、獻(xiàn)血者2·5%紅細(xì)胞鹽水懸液。 3、主側(cè)加受血者血清0。
5ml，獻(xiàn)血者紅細(xì)胞鹽水懸液0。5ml。
4、次側(cè)加獻(xiàn)血者血清0。5ml，受血者紅細(xì)胞鹽水懸液0。
5ml。 5、混勻后，根據(jù)所用交叉配血方式，如酶技術(shù)配血法，可在37度水浴箱孵育1小時(shí)后，直接觀察有無(wú)凝集或溶血；若選用鹽水介質(zhì)等方法，則需1000rpm離心1min；或選用一定的速度離心相應(yīng)的時(shí)間，如聚凝胺試劑提供的轉(zhuǎn)速和時(shí)間。
結(jié)果觀察 先觀察上清液的顏色，然后再輕搖試管觀察有無(wú)紅細(xì)胞凝集現(xiàn)象發(fā)生； 結(jié)果判定：如試管內(nèi)紅細(xì)胞呈均勻混濁無(wú)顆粒出現(xiàn)即無(wú)凝集，上清液呈正常血清狀顏色為交叉配血試驗(yàn)相合。如上清液呈紅色即有溶血現(xiàn)象，紅細(xì)胞成塊即為凝集現(xiàn)象，為交叉配血試驗(yàn)不相合。
