動(dòng)物細(xì)胞的方法特點(diǎn)是(培養(yǎng)條件下,動(dòng)物細(xì)胞生理特點(diǎn))
1.培養(yǎng)條件下,動(dòng)物細(xì)胞有哪些生理特點(diǎn)
物細(xì)胞培養(yǎng)的應(yīng)用
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細(xì)胞培養(yǎng)是指細(xì)胞在體外條件下的生長(zhǎng)，動(dòng)物細(xì)胞在單獨(dú)細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程中不再形成個(gè)體。
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概念
動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)（animalcellculture）就是從動(dòng)物機(jī)體中取出相關(guān)的組織，將它分散成單個(gè)細(xì)胞（使用胰蛋白酶或膠原蛋白酶）然后，放在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖。
簡(jiǎn)介
1.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液的成分：體外細(xì)胞培養(yǎng)所需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)與體內(nèi)基本相同，例如，需要糖、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、促生長(zhǎng)因子、微量元素等。將細(xì)胞所需的上述物質(zhì)按其種類(lèi)和所需數(shù)量嚴(yán)格配制而成的培養(yǎng)基，稱(chēng)為合成培養(yǎng)基。由于動(dòng)物細(xì)胞生活的內(nèi)環(huán)境還有一些成分尚未研究清楚，所以需要加入動(dòng)物血清以提供一個(gè)類(lèi)似生物體內(nèi)的環(huán)境，因此在使用合成培養(yǎng)基時(shí)，通常需加入血清、血漿等一些天然成分。[1]
2.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液的特點(diǎn)：液體培養(yǎng)基、通常含動(dòng)物血清。
3.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件：
①無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境：對(duì)培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進(jìn)行無(wú)菌處理，通常還要在培養(yǎng)液中加入一定量的的抗生素，以防被污染。此外應(yīng)定期更換培養(yǎng)液，以便清除代謝產(chǎn)物防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物累積對(duì)細(xì)胞自身產(chǎn)生危害。
②營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)：無(wú)機(jī)物（無(wú)機(jī)鹽、微量元素等），有機(jī)物（糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因等）
血清和血漿 但血清和血漿不是營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。
③溫度和pH(36.5±0.5℃，7.2~7.4)
④氣體環(huán)境（95%的空氣+5%CO 2的混合氣體）
其中5%CO2氣體是為保持培養(yǎng)液的pH穩(wěn)定
3.基本過(guò)程
取動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物器官、組織。將材料剪碎，并用胰蛋白酶（或用膠原蛋白酶）處理（消化），形成分散的單個(gè)細(xì)胞，將處理后的細(xì)胞移入培養(yǎng)基中配成一定濃度的細(xì)胞懸浮液。懸液中分散的細(xì)胞很快就貼附在瓶壁上，成為細(xì)胞貼壁。當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到互相接觸時(shí)，細(xì)胞就會(huì)停止分裂增殖，出現(xiàn)接觸抑制。此時(shí)需要將出現(xiàn)接觸抑制的細(xì)胞重新使用胰蛋白酶處理。再配成一定濃度的細(xì)胞懸浮液。另外，原代培養(yǎng)就是從機(jī)體取出后立即進(jìn)行的細(xì)胞、組織培養(yǎng)。當(dāng)細(xì)胞從動(dòng)植物中生長(zhǎng)遷移出來(lái)，形成生長(zhǎng)暈并增大以后，科學(xué)家接著進(jìn)行傳代培養(yǎng)，即將原代培養(yǎng)細(xì)胞分成若干份，接種到若干份培養(yǎng)基中，使其繼續(xù)生長(zhǎng)、增殖。通過(guò)一定的選擇或純化方法，從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得的具有特殊性質(zhì)的細(xì)胞稱(chēng)為細(xì)胞株。當(dāng)培養(yǎng)超過(guò)50代時(shí)，大多數(shù)的細(xì)胞已經(jīng)衰老死亡，但仍有部分細(xì)胞發(fā)生了遺傳物質(zhì)的改變出現(xiàn)了無(wú)限傳代的特性，即癌變。此時(shí)的細(xì)胞被稱(chēng)為細(xì)胞系。
2.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的特點(diǎn)
細(xì)胞培養(yǎng)方式大致可分為兩種：一種是群體培養(yǎng)（mass culture），將含有一定數(shù)量細(xì)胞的懸液置于培養(yǎng)瓶中，讓細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)，匯合（confluence）后形成均勻的單細(xì)胞層；另一種是克隆培養(yǎng)（clonal culture），將高度稀釋的游離細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，各個(gè)細(xì)胞貼壁后，彼此距離較遠(yuǎn)，經(jīng)過(guò)生長(zhǎng)增殖每一個(gè)細(xì)胞形成一個(gè)細(xì)胞集落，稱(chēng)為克隆（clone）。一個(gè)細(xì)胞克隆中的所有細(xì)胞均來(lái)源于同一個(gè)祖先細(xì)胞。此外，為了制取細(xì)胞產(chǎn)品而設(shè)計(jì)了轉(zhuǎn)鼓培養(yǎng)法，使用大容量的圓培養(yǎng)瓶，在培養(yǎng)過(guò)程中不斷地轉(zhuǎn)動(dòng)，使培養(yǎng)的細(xì)胞始終處于懸浮狀態(tài)之中而不貼壁。
細(xì)胞系名稱(chēng)
細(xì)胞類(lèi)型
來(lái)源
3T3
成纖維細(xì)胞
小鼠
HeLa
宮頸癌上皮細(xì)胞
人
BHK21
成纖維細(xì)胞
敘利亞倉(cāng)鼠
PtKl
上皮細(xì)胞
袋鼠
L6
成肌細(xì)胞
大鼠
PCI2
嗜鉻細(xì)胞
大鼠
SP2
漿細(xì)胞
小鼠
SP2/0
骨髓瘤漿細(xì)胞
小鼠
CHO
卵巢細(xì)胞
中國(guó)地鼠
