常用的樣品與處理方法(常用的樣品預(yù)處理方法)
1.常用的樣品預(yù)處理方法有哪些
1.溶劑提取法，同一溶劑中，不同物質(zhì)具有不同的溶解度。
利用混合物中各物質(zhì)溶解度的不同將混合物組分完全或部分分離的過程稱為萃取，也稱提取，常用方法有以下幾種：2.浸提法：浸提法又稱浸泡法。用于從固體混合物或有機(jī)體中提取某種物質(zhì)，所采用的提取劑，應(yīng)既能大量溶解被提取的物質(zhì)，又要不破壞被提取物質(zhì)的性質(zhì)。
為了提高物質(zhì)在溶劑中的溶解度，往往在浸提時加熱。如用索氏抽提法提取脂肪。
提取劑是此類方法中重要因素，可以用單一溶劑，也可以用混合溶劑。3.溶劑萃取法：溶劑萃取法用于從溶液中提取某一組分，利用該組分在兩種互不相溶的試劑中分配系數(shù)的不同，使其從一種溶液中轉(zhuǎn)移至另一種溶劑中，從而與其他組分分離，達(dá)到分離和富集的目的。
通?？捎梅忠郝┒范啻翁崛∵_(dá)到目的。若被轉(zhuǎn)移的成分是有色化合物，可用有機(jī)相直接進(jìn)行比色測定，即萃取比色法。
萃取比色法具有較高的靈敏度和選擇性，如，雙硫腙法測定食品中的鉛含量。此法設(shè)備簡單、操作迅速、分離效果好，但是，成批試樣分析時工作量大。
同時，萃取溶劑常易揮發(fā)，易燒，且有毒性，操作時應(yīng)加以注意。4.鹽析法：向溶液中加入某種無機(jī)鹽，使溶質(zhì)在原溶劑中的溶解度大大降低，而從溶液中沉淀析出，這種方法叫做鹽析。
如在蛋白質(zhì)溶液中加入大量的鹽類（硫酸銨），特別是加入重金屬鹽，使蛋白質(zhì)從溶液中沉淀出來。在進(jìn)行鹽析工作時，應(yīng)注意溶液中所加入的物質(zhì)的選擇。
它應(yīng)是不會破壞溶液中所要析出的物質(zhì)，否則達(dá)不到鹽析提取的目的?；腔ê驮砘ǎ哼@是處理油脂或脂肪樣品時經(jīng)常使用的方法。
例如，殘留農(nóng)藥分析和脂溶性維生素測定中，油脂被濃硫酸磺化，或被堿皂化，由疏水性變成親水性，使油脂中需檢測的非極性物質(zhì)能較容易地被非極性或弱極性溶劑提取出來。5.沉淀分離法：沉淀分離法是利用沉淀反應(yīng)進(jìn)行分離的方法。
在試樣中加入適當(dāng)?shù)某恋韯?，使被測組分沉淀下來，或?qū)⒏蓴_組分沉淀除去，從而達(dá)到分離的目的。6.掩蔽法：利用掩蔽劑與樣液中的干擾成分作用，使干擾成分轉(zhuǎn)變?yōu)椴桓蓴_測定的狀態(tài)，即被掩蔽起來。
運(yùn)用這種方法，可以不經(jīng)過分離干擾成分的操作而消除其干擾作用，簡化分析步驟，因而在食品分析中應(yīng)用十分廣泛，常用于金屬元素的測定。7.色層分離法：色層分離法又稱色譜分離法，是一種在載體上進(jìn)行物質(zhì)分離的方法的總稱。
根據(jù)分離原理的不同，可分為吸附色譜分離、分配色譜分離和離子交換色譜分離等。此類方法分離效果好，近年來在食品分析中應(yīng)用得越來越廣泛。
色層分離不僅分離效果好，而且分離過程往往也就是鑒定的過程。本法常用于有機(jī)物質(zhì)的分析測定。
8.吸附色譜分離：吸附色譜分離法利用聚酰胺、硅膠、硅藻土、氧化鋁等吸附劑，經(jīng)過活化處理后，具有適當(dāng)?shù)奈侥芰?，可對被測組分或干擾組分進(jìn)行選擇性的吸附而達(dá)到分離的目的。比如：食品中色素的測定，可將樣品溶液中的色素經(jīng)吸附劑吸附（其他雜質(zhì)不被吸附），經(jīng)過過濾、洗滌，再用適當(dāng)?shù)娜軇┙馕?，得到比較純凈的色素溶液。
吸附劑可以直接加入樣品中吸附色素，也可將吸附劑裝入玻璃管制成吸附柱或涂布成薄層板使用。9.分配色譜分離：分配色譜分離法根據(jù)兩種不同的物質(zhì)在兩相中的分配比不同進(jìn)行分離的，兩相中一相是流動的，稱為流動相；另一相是固定的，稱為固定相。
當(dāng)溶劑滲透于固定相中并向上滲透時，分配組分就在兩相中進(jìn)行反復(fù)分配，進(jìn)而分離，例如，多糖類樣品的紙上層析，樣品經(jīng)酸水解處理，中和后制成試液，在濾紙上進(jìn)行點(diǎn)樣，用苯酚-1%氨水飽和溶液展開，苯胺鄰苯二酸顯色劑顯色，于105℃加熱數(shù)分鐘，可見不同色斑：戊醛糖（紅棕色）、己醛糖（棕褐色）、己酮糖（淡棕色）、雙糖類（黃棕色）的色斑。10.離子交換色譜分離：離子交換色譜分離法是利用離子交換劑與溶液中的離子之間所發(fā)生的交換反應(yīng)來進(jìn)行分離的方法。
根據(jù)被交換離子的電荷分為陽離子交換和陰離子交換。該法可用于從樣品溶液中分離待測離子，也可從樣品溶液中分離干擾組分。
分離操作可將樣液與離子交換劑一起混合振蕩或?qū)右壕従復(fù)ㄟ^事先制備好的離子交換柱，則被測離子與交換劑上的H+或OH-發(fā)生交換，被測離子或干擾組分上柱，從而將其分離。例如，可以利用離子交換色譜分離法制備無氨水、無鉛水及分離比較復(fù)雜的樣品。
11.濃縮法：食品樣品經(jīng)提取、凈化后，有時凈化液的體積較大，被測組分的濃度太低，會影響最后結(jié)果的測定。此時需要對被測樣液進(jìn)行濃縮，以提高被測成分的濃度。
常用的方法有常壓濃縮和減壓濃縮兩種。12.常壓濃縮法：常壓濃縮法只能用于待測組分為非揮發(fā)性的樣品試液的濃縮，否則會造成待測組分的損失。
操作可采用蒸發(fā)皿直接揮發(fā)。如果溶劑需要回收，則可用一般蒸餾裝置或旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器。
該法操作簡便、快速，是常用的方法。13.減壓濃縮法：減壓濃縮法主要用于待測組分為熱不穩(wěn)定性或易揮發(fā)的樣品凈化液的濃縮，其樣品凈化液的濃縮需采用K-D濃縮器。
濃縮時，水浴加熱并抽氣減壓，以便濃縮在較低的溫度下進(jìn)行，且速度快，可減少被測組分的損失。食品中有機(jī)磷農(nóng)藥的測定（如，甲胺磷。
2.食品分析樣品處理方法有哪些
1、有機(jī)物破壞法
(1)干法灰化：有機(jī)物破壞徹底，適用于除汞、砷、鉛等以外的金屬元素的測定。
(2)濕法消化：加熱溫度較干法低，減少了金屬揮發(fā)逸散的損失，但易產(chǎn)生有毒氣體和泡沫。
(3)紫外光分解法：由高壓汞燈提高紫外光，在（85±5）℃的溫度下進(jìn)行光解。
(4)微波消解法：適用于處理大批量樣品及萃取極性與熱不穩(wěn)定的化合物
2、蒸餾法
(1)常壓蒸餾
(2)減壓蒸餾
(3)水蒸汽蒸餾
(4)分餾
3、溶劑提取法
(1)浸提法
(2)萃取法
(3)超臨界流體萃取
(4)微波萃取
4、色層分離法
(1)吸附色譜分離
(2)分配色譜分離
(3)離子交換色譜分離
5、化學(xué)分離法
(1)磺化法和皂化法：除去油脂的方法，常用于農(nóng)藥分析中樣品的凈化。
(2)沉淀分離法：
(3)掩蔽法：
6、濃縮法
(1)常壓濃縮法
(2)減壓濃縮法
3.原子光譜中的樣品處理方法有哪些
原子光譜中的樣品處理方法有哪些
樣品處理是整個分析測試過程中的一個重要環(huán)節(jié)，其目的是利用各種化學(xué)方法將待測元素從固（液）態(tài)試樣中定量地以離子形式轉(zhuǎn)入測試溶液.選擇合理的樣品分解方法，可使分析手續(xù)大大簡化，使分析方法的適應(yīng)性、準(zhǔn)確性大大提高.
設(shè)計最佳樣品處理的原則是：
① 保證樣品中的被測元素全部定量地轉(zhuǎn)入試液，即樣品分解要完全；
② 避免樣品處理過程中引入干擾元素，同時要有利于除去干擾元素；
③ 分解方法要盡量簡便，易操作，經(jīng)濟(jì)、迅速、安全，盡量減少對環(huán)境的污染；
④ 便于成批處理試樣.
要設(shè)計出符合這些條件的樣品處理方法，必須深入了
a）被測元素及其化合物的物理化學(xué)性質(zhì)；
b）被測元素在樣品中的含量范圍、賦存形態(tài)；
c）樣品基體組成和性質(zhì)；
d）采用的最終的測試方法和技術(shù).
以國內(nèi)外測定As、Se和Hg所用樣品各種處理方法為例
國內(nèi)外測定各種樣品中As、Se和Hg，所采用的樣品處理方法大致分為三類：
1）濕法酸/堿分解；
2）密閉體系燃燒法（氧彈燃燒法）；
3）燒結(jié)（半熔）法.
4.幾種常用樣品前處理方法在食品重金屬檢驗(yàn)中的應(yīng)用
食品是人類生存的基本要素，由于工業(yè)化的發(fā)展，導(dǎo)致食品中可能含有或者被污染有危害人體健康的物質(zhì)。隨著人們生活水平的提高，食品安全性問題日益受到重視，國家加大了對食品的監(jiān)管工作。與此同時也使食品檢驗(yàn)工作者的檢驗(yàn)工作量增多，這就要求食品檢驗(yàn)工作者在保證檢驗(yàn)質(zhì)量的同時還應(yīng)該提高工作效率。在食品的重金屬檢驗(yàn)中，樣品前處理最為食品檢驗(yàn)的關(guān)鍵步驟，直接影響分析結(jié)果的精密度和準(zhǔn)確度，選擇合適的前處理方法，縮短樣品的前處理時間，是在保證檢驗(yàn)質(zhì)量的同時提高檢驗(yàn)效率的一個重要方法。筆者依據(jù)目前常用的四種樣品前處理方法結(jié)合食品中金屬元素的檢驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)，分析了四種方法在食品金屬檢驗(yàn)中的應(yīng)用和注意事項(xiàng)，為食品檢驗(yàn)工作者選取合適的樣品前處理方法提供一定的參考。
濕消化法濕消化法是在適量的食品樣品中，加入氧化性強(qiáng)酸，加熱破壞有機(jī)物，使待測的無機(jī)成分釋放出來，形成不揮發(fā)的無機(jī)化合物，以便進(jìn)行分析測定。
濕法消化是目前應(yīng)用比較廣泛的一種食品樣品前處理方法，該方法實(shí)用性強(qiáng)，幾乎所有的食品都可以用該方法消化。
下面介紹下濕法消解的優(yōu)勢：首先、前處理所用的試劑即酸都可以找到高純度的，同時基體成分都比較簡單（偶爾也會產(chǎn)生部分硫酸鹽）；其次、在實(shí)驗(yàn)過程中，只要控制好消化溫度，大部分元素一般很少或幾乎沒有損失。例如，在測定醬油中的砷含量時采用濕法消化加入了硝酸高氯酸混合酸和硫酸，加標(biāo)回收率為95%以上。即便像汞等極易揮發(fā)的元素，只要正確掌握消化溫度，也不會有損失。
但是濕消化法也有一定的缺陷：
首先，由于該反應(yīng)是氧化反應(yīng)，樣品氧化時間較長，需要一個小時左右的時間（隨樣品的成分而定），且實(shí)驗(yàn)過程中一次不能消化超過10個樣品，因此方法的勞動強(qiáng)度比較大。
其次，樣品消化時常使用的試劑硝酸、高氯酸、過氧化氫，硫酸都是具有腐蝕性且比較危險的。在用硝酸和高氯酸時產(chǎn)生的酸霧和煙，對通風(fēng)櫥的腐蝕性也很大。特別需要注意的是用高氯酸消解樣品時，應(yīng)嚴(yán)格遵守操作規(guī)程，燒杯中液體不能燒干，并且要保證溫度達(dá)到200攝氏度時只有少量的有機(jī)成分存在，否則高氯酸的氧化電位在此溫度下會迅速升高，會導(dǎo)致劇烈的爆炸！因此建議，在使用高氯酸時，最好先用硝酸氧化部分的有機(jī)物，或者是先加入硝酸與高氯酸的混合液浸泡一夜，同時實(shí)驗(yàn)要在通風(fēng)櫥內(nèi)進(jìn)行。消化液不能蒸干，以防部分元素如硒、鉛的損失。
還有，由于氧化反應(yīng)過程中加入了濃酸，這些酸可能會對儀器產(chǎn)生損害進(jìn)而影響試驗(yàn)結(jié)果，因此消解結(jié)束后需要排酸，例如，用原子熒光測定總砷，測定時硝酸的存在會妨礙的產(chǎn)生，對測定有干擾，消解完全后應(yīng)盡可能的加熱驅(qū)除硝酸。國標(biāo)實(shí)驗(yàn)中采用硝酸-硫酸消解樣品，由于硫酸的沸點(diǎn)比硝酸要高，所以最后消化液里基本上沒有硝酸。但是需要注意的是，采用硝酸-硫酸消解樣品時因避免發(fā)生碳化，消解過程發(fā)生碳化時會使砷嚴(yán)重?fù)p失，所以在消解過程中注意若消化液色澤變深應(yīng)適當(dāng)補(bǔ)加硝酸，值得注意的是在標(biāo)準(zhǔn)曲線也要保證和樣品消解液中相同的酸濃度即要基體匹配。
某些特殊食品濕消解時注意事項(xiàng)：
含油脂成分較高的食品，如植物油、桃酥等，在加入混合酸后，由于樣品浮在混酸表面上，容易形成完整的膜，加熱時液面上有劇烈的反應(yīng)，容易造成爆沸或飛濺，因此建議樣品稱樣量不高于1g（植物油最好為0.1-0.2g），同時要在消解過程中隨時補(bǔ)加硝酸，一般來講硝酸高氯酸混合液加入15ml，放置過夜讓其緩慢氧化，次日消化中途還需要補(bǔ)加混合酸10ml左右。
酒類樣品如葡萄酒、果酒，因其含有大量的乙醇，在加混合酸消化之前一定要加熱蒸發(fā)掉乙醇（注意不能干涸），待乙醇揮發(fā)完畢后，再加入酸消化。我曾經(jīng)在消化葡萄酒樣品時，未排乙醇直接加入了混合酸，結(jié)果過了幾分鐘后，反應(yīng)非常劇烈，產(chǎn)生大量氣泡同時樣品外溢，導(dǎo)致試驗(yàn)失敗。
5.如何根據(jù)樣品的特性來選擇樣品的處理方法
樣品處理是整個分析測試過程中的一個重要環(huán)節(jié)，其目的是利用各種化學(xué)方法將待測元素從固（液）態(tài)試樣中定量地以離子形式轉(zhuǎn)入測試溶液。
選擇合理的樣品分解方法，可使分析手續(xù)大大簡化，使分析方法的適應(yīng)性、準(zhǔn)確性大大提高。 設(shè)計最佳樣品處理的原則是： ① 保證樣品中的被測元素全部定量地轉(zhuǎn)入試液，即樣品分解要完全； ② 避免樣品處理過程中引入干擾元素，同時要有利于除去干擾元素； ③ 分解方法要盡量簡便，易操作，經(jīng)濟(jì)、迅速、安全，盡量減少對環(huán)境的污染； ④ 便于成批處理試樣。
要設(shè)計出符合這些條件的樣品處理方法，必須深入了解： a）被測元素及其化合物的物理化學(xué)性質(zhì)； b）被測元素在樣品中的含量范圍、賦存形態(tài)； c）樣品基體組成和性質(zhì)； d）采用的最終的測試方法和技術(shù)。 以國內(nèi)外測定As、Se和Hg所用樣品各種處理方法為例 國內(nèi)外測定各種樣品中As、Se和Hg，所采用的樣品處理方法大致分為三類： 1）濕法酸/堿分解； 2）密閉體系燃燒法（氧彈燃燒法）； 3）燒結(jié)（半熔）法。
在對煤中的微量元素進(jìn)行定性定量檢測的過程中，樣品的前處理往往比檢測技術(shù)本身還重要。尤其是對于各種原子光譜技術(shù)，一般必需制成液體樣品進(jìn)樣或液體進(jìn)樣時才能達(dá)到較高的準(zhǔn)確度。
為保證檢測的準(zhǔn)確性，在使組成復(fù)雜的煤樣品充分溶解的同時，又要避免待檢測元素易揮發(fā)的單質(zhì)或化合物形式的損失。目前國內(nèi)外還有以下幾種方法： （1）封溶坩堝直接消解。
該方法系采用密閉容器，用混酸直接分解樣品，同時使用微波爐等加熱消解。具有稱樣量少、溶解效率高、操作簡單、安全，便于控制、避免揮發(fā)的優(yōu)點(diǎn)；但直接分解法不可避免地有分解不完全的缺點(diǎn)。
檢測燃燒后的煤灰或煤抽提液樣品中的微量元素時常用這種方法。 （2）低溫灰化法。
采用等離子體技術(shù)在150℃左右使樣品灰化，再在聚四氟乙烯容器中用混酸分解。該方法是目前公認(rèn)的較好的預(yù)處理技術(shù)，但也有設(shè)備運(yùn)行成本高、耗時長等缺點(diǎn)。
濕法酸分解 測定地質(zhì)樣品，常采用HNO3-HF-HClO4體系進(jìn)行酸溶，用該法分解樣品時，若加熱強(qiáng)度稍大，蒸發(fā)過干，則樣品中的部分Se會揮發(fā)損失。原因可能是樣品被酸分解生成的Se(ClO4)2可分解為HCl和SeO2，這兩種化合物可以反應(yīng)生成在較低溫度下可升華的SeCl2。
據(jù)資料介紹，當(dāng)處理樣品時，蒸發(fā)至干，樣品中Se可損失40%左右。因此，用該法分解試樣，必須小心掌握加熱溫度和時間，蒸到1~2mL透明溶液時，即應(yīng)停止加熱。
還有采用 HNO3-H2SO4體系酸溶以及HNO3-HClO4體系分解。濕法分解操作手續(xù)比較繁雜，且伴隨酸霧揮發(fā)到大氣，對環(huán)境保護(hù)不利。
另外，對煤而言，由于煤中含有的大量有機(jī)物質(zhì)，給酸分解帶來不便。 氧彈燃燒法 該法是將煤樣置于充滿高壓氧的不銹鋼彈筒內(nèi)，通電點(diǎn)燃煤樣，煤中有機(jī)質(zhì)充分燃燒，無機(jī)礦物質(zhì)也發(fā)生氧化、分解等反應(yīng)；煤中Se元素轉(zhuǎn)化為氧化物，再以氣態(tài)形式被溶解到彈筒內(nèi)的吸收液（水或稀堿）中。
國外有的實(shí)驗(yàn)室采用此法測煤中Se。其優(yōu)點(diǎn)是樣品處理除氧外，不引入其它試劑，減少了引入干擾元素的機(jī)會。
缺點(diǎn)是對高灰煤可能分解不完全（不能完全燃燒），可導(dǎo)致分析結(jié)果偏低；操作較麻煩，處理樣品效率較低；不利于成批分解樣品。 燒結(jié)（半熔）法 該法利用艾氏劑與試樣混合均勻，加熱灼燒，使煤中As、Se被氧化為氧化物，繼而與Na2CO3、MgO反應(yīng)形成砷酸鹽和硒酸鹽。
然后用HCl 溶解灼燒物， As、Se以離子形式轉(zhuǎn)入溶液。以煤中為例，反應(yīng)方程式為： 該法優(yōu)點(diǎn)是操作方便易行，便于成批處理分解樣品，只要正確控制灼燒條件，被測元素可定量轉(zhuǎn)化。
考慮到目前煤中其它元素分析標(biāo)準(zhǔn)中，有多種采用艾氏劑半熔分解煤樣的方法，分析人員易于接受，工作效率較高；國家標(biāo)準(zhǔn)及美國標(biāo)準(zhǔn)也采用艾氏劑半熔法處理樣品。通過對多種處理方法的比較，本試驗(yàn)采用半熔法處理樣品。
為使被測元素從灼燒后的試樣中轉(zhuǎn)入溶液，須用合適的酸將灼燒物溶解。為此，還要就酸的種類及加酸方式進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
酸的種類 使用不同的酸來處理樣品對結(jié)果有影響，因此試驗(yàn)考察了HCl、H2SO4和HNO3在處理灼燒物的溶解情況以及對測定的影響。 H2SO4：試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)用H2SO4溶解灼燒物會導(dǎo)致CaSO4沉淀，另外H2SO4中含As、Se較高，導(dǎo)致空白過高，若預(yù)先除去，又增加了實(shí)驗(yàn)工作量，因此，不宜選擇H2SO4作為溶解用酸。
HNO3：試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)HNO3溶樣時，原子吸收信號比HCl介質(zhì)低，其原因可能是HNO3作為氧化劑與樣品中還原物質(zhì)反應(yīng)，形成亞硝酸，NO2-對Se的氫化物形成有抑制作用。國外有的實(shí)驗(yàn)室采用HNO3作介質(zhì)進(jìn)行Se的氫化物發(fā)生原子吸收測定，以降低靈敏度為代價，換取較好的穩(wěn)定性。
HCl：使用HCl溶解灼燒物是國內(nèi)外普遍采用的方法。氯化物大都為易溶鹽，HCl有還原性，是將Se6+還原為Se4+的還原劑，HCl中的 As、Se含量很少，試劑空白低，對測定有利，本法采用HCl溶解灼燒物。
6.樣品前處理的方法
第一法 薄層色譜法 1 原理 樣品酸化后，用乙醚提取山梨酸、苯甲酸。
將樣品提取液濃縮，點(diǎn)于聚酰胺薄層板上， 展開。顯色后，根據(jù)薄層板上山梨酸、苯甲酸的比移值，與標(biāo)準(zhǔn)比較定性，并可進(jìn)行概略 定量。
2 試劑 2.1 異丙醇。 2.2 正丁醇。
2.3 石油醚：沸程：30~60℃。 2.4 乙醚： 不含過氧化物。
2.5 氨水。 2.6 6N鹽酸： 取100mL鹽酸，加水稀釋至200mL。
2.7 無水乙醇。 2.8 聚酰胺粉：200目。
2.9 山梨酸標(biāo)準(zhǔn)溶液：精密稱取0.2000g山梨酸，用少量乙醇溶解后移入100ml容量瓶中 并稀釋至刻度，此溶液每毫升相當(dāng)于2mg山梨酸。 2.10 苯甲酸標(biāo)準(zhǔn)溶液：精密稱取0.2000g苯甲酸，用少量乙醇溶解后移入100ml容量瓶中， 并稀釋至刻度，此溶液每毫升相當(dāng)于2mg苯甲酸。
2.11 展開劑 2.11.1 正丁醇-氨水-無水乙醇（7:1:2）。 2.11.2 異丙醇-氨水-無水乙醇（7:1:2）。
2.12 顯色劑：0.04%溴甲酚紫的50%乙醇溶液，用0.1N氫氧化鈉溶液調(diào)至pH=8。 2.13 4%氯化鈉酸性溶液：于4%氯化鈉溶液中加少量6N鹽酸酸化。
3 儀器 3.1 吹風(fēng)機(jī)。 3.2 層析缸。
3.3 玻璃板：10*18cm。 3.4 微量注射器：10μL,100μL。
3.5 噴霧器。 4 操作方法 4.1 樣品提?。? 稱取2.5g事先混合均勻的樣品，置于25ml帶塞量筒中，加0.5ml 6N鹽酸酸化，用15、10ml乙醚提取兩次，每次振搖1min，將上層醚提取液吸入另一個25ml帶塞量筒中，合并乙 醚提取液。
用3ml4%氯化鈉酸性溶液洗滌兩次，靜止15min，用滴管將乙醚層通過無水硫 酸鈉濾入25ml容量瓶中。加乙醚至刻度，混勻。
吸取10.0ml乙醚提取液分兩次置于10ml帶 塞離心管中，在約40℃的水浴上揮干， 加入0.10ml乙醇溶解殘渣，備用。 4.2 測定 4.2.1 聚酰胺粉板的制備：稱取1.6g聚酰胺粉，加0.4g可溶性淀粉，加約15ml水，研磨 3~5min，立即倒入涂布器內(nèi)制成10*18cm、厚度0.3mm的薄層板兩塊，于室溫干燥后，于 80℃干燥1h，取出，置于干燥器中保存。
4.2.2 點(diǎn)樣：在薄層板下端2cm的基線上，用微量注射器點(diǎn)1μL、2μl樣品液，同時各點(diǎn) 1μl、2μl山梨酸、苯甲酸標(biāo)準(zhǔn)溶液。 4.2.3 展開與顯色：將點(diǎn)樣后的薄層板放入預(yù)先盛有展開劑（2.11.1或2.11.2）的展開槽 內(nèi)，展開槽周圍貼有濾紙，待溶劑前沿上展至10cm，取出揮干，噴顯色劑，斑點(diǎn)成黃色， 背景為藍(lán)色。
樣品中所含山梨酸、苯甲酸的量與標(biāo)準(zhǔn)斑點(diǎn)比較定量（山梨酸、苯甲酸的比 移值依次為0.82,0.73）。 4.2.4 計算： A1 * 1000 X1 = ─────────────。
.（1） m1 * 10/25 *V2/V1*1000 式中：X1—─樣品中山梨酸（苯甲酸）的含量，g/kg; A1—─測定用樣品液中山梨酸（苯甲酸）的含量，mg; m1——樣品質(zhì)量，g; V1——加入乙醇的體積，mL; V2──測定時點(diǎn)樣的體積，mL; 10——測定時吸取乙醚提取液的體積，mL; 25——樣品乙醚提取液總體積，mL。 注：本方法還可以同時測定果醬、果汁中的糖精。
第二法 氣相色譜法 5 原理 樣品酸化后，山梨酸、苯甲酸用乙醚提取濃縮后，用附氫火焰離子化檢測器的氣相色 譜儀進(jìn)行分離測定，與標(biāo)準(zhǔn)系列比較定量。 6 試劑 6.1 乙醚。
6.2 石油醚：沸程30~60℃。 6.3 鹽酸。
6.4 無水硫酸鈉。 6.5 山梨酸、苯甲酸標(biāo)準(zhǔn)溶液： 精密稱取山梨酸、苯甲酸各0.2000g，置于100ml容量瓶 中，用石油醚-乙醚（3:1）混合溶劑溶解后并稀釋至刻度。
此溶液每毫升相當(dāng)于2mg山梨 酸或苯甲酸。 6.6 山梨酸、苯甲酸標(biāo)準(zhǔn)使用液：吸取適量的山梨酸、苯甲酸標(biāo)準(zhǔn)溶液，以石油醚-乙醚 （3:1）混合溶劑稀釋至每毫升相當(dāng)于50、100、150、200、25Oμg山梨酸或苯甲酸。
7 儀器 氣相色譜儀：具氫火焰離子化檢測器。 8 操作方法 8.1 樣品提取 按4.1自“稱取2.5g”至“加乙醚至刻度”依法操作。
準(zhǔn)確吸取5mL乙醚提取液于5mL 帶塞刻度試管中，置40℃水浴上揮干，加入2ml石油醚-乙醚（3:1）混合溶劑溶解殘渣，備 用。 8.2 色譜條件 8.2.1 色譜柱：玻璃柱，內(nèi)徑3mm，長2m，內(nèi)裝涂以5%DEGS+1%H3PO4固定液的60~80目 Chromosorb W AW。
8.2.2 氣流速度： 載氣，氮?dú)猓?0ml/min（氮?dú)夂涂諝?、氫氣之比按各儀器型號不同選擇 各自的最佳比例條件。） 8.2.3 溫度：進(jìn)樣口 230℃；檢測器230℃；柱溫170℃。
8.3 測定 進(jìn)樣2μL標(biāo)準(zhǔn)系列中各濃度標(biāo)準(zhǔn)使用液于氣相色譜儀中，可測得不同濃度山梨酸，苯 甲酸的峰高，以濃度為橫坐標(biāo)，相應(yīng)的峰高值為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。同時進(jìn)樣2μL樣 品溶液，測得峰高與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較定量。
8.4 計算 A3 * 1000 X2 = ─────────────。
（2） m2*5/25*V4/V3*1000 式中：X2──樣品中山梨酸或苯甲酸的含量，g/kg; A3——測定用樣品液中山梨酸或苯甲酸的含量，μg; V3——加入石油醚—乙醚（3:1）混合溶劑的體積，mL; V4─—測定時進(jìn)樣的體積，μL; m2──樣品的質(zhì)量，g; 5─—測定時吸取乙醚提取液的體積，mL; 25──樣品乙醚提取液的總體積，mL。 由測得苯甲酸的量乘以1.18，即為樣品中苯甲酸鈉的含量。
/biaozhun/84.htm 2.山梨酸、苯甲酸的氣相色譜測定原理： 樣品經(jīng)酸化后，用乙醚提取山梨酸和苯甲酸，再用帶氫火焰離子化檢測。
