采用濾膜法進(jìn)行微生物檢測是一種國際公認(rèn)的微生物標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法,其得到AOAC、美國、歐洲和日本等國家的藥典、FDA和EPA等組織的承認(rèn),廣泛應(yīng)用于環(huán)境監(jiān)測、食品及飲料工業(yè)、化妝品、制藥工業(yè)品質(zhì)控制和電子工業(yè)等領(lǐng)域。
賽多利斯公司的濾膜法微生物檢測產(chǎn)品成功地應(yīng)用于濾膜法已有20多年的歷史,實(shí)用而且方便實(shí)用,它簡化了微生物檢測程序。 濾膜法微生物檢測: 將適當(dāng)孔徑的濾膜放入濾器,過濾樣品,由于濾膜的作用而將微生物保留在膜的表面上。
樣品中微生物生長抑制劑可在過濾后用無菌水沖洗濾器而除去。然后,將濾膜放在培養(yǎng)基上培養(yǎng),營養(yǎng)物和代謝物通過濾膜的微孔進(jìn)行交換,在濾膜表面上培養(yǎng)出的菌落可以計(jì)數(shù),并和樣品量相關(guān)。
濾膜法的優(yōu)點(diǎn): - 與直接法比較,可以檢測大量的樣品 - 濃縮效應(yīng)使微生物檢測的準(zhǔn)確度提高 - 帶有菌落的濾膜,可作為檢測的永久記錄存檔 - 可見的菌落和樣品量直接對(duì)應(yīng),得出定量結(jié)果 操作具體一點(diǎn)就是:薄膜過濾法檢測,一個(gè)樣過濾一份,就是200ml的純化水通過濾膜,將該濾膜浸泡在滅菌好的l生理鹽水中,再接種到平皿中,制成10級(jí)、100級(jí)、1000級(jí)稀釋倍數(shù)的細(xì)菌、霉菌和酵母菌稀釋培養(yǎng)皿,即可。
在實(shí)際工作中,環(huán)境監(jiān)測可分為兩類。
一是污染源監(jiān)測,即對(duì)污染物排放情況進(jìn)行監(jiān)測。一般是在污染物排出口,定期、定點(diǎn)采集樣品,分析、測定不同形態(tài)有害物質(zhì)的濃度、排放量以及時(shí)空分布規(guī)律。
二是環(huán)境監(jiān)測,也就是對(duì)環(huán)境中的污染物質(zhì)及其變化規(guī)律、環(huán)境影響進(jìn)行分析、監(jiān)視,明確其數(shù)值、范圍、污染程度,通過綜合分析描述環(huán)境質(zhì)量狀況和發(fā)展趨勢。 按照環(huán)境要素的不同,環(huán)境監(jiān)測分為大氣污染監(jiān)測、水體污染監(jiān)測、土壤污染監(jiān)測、生物污染監(jiān)測等;根據(jù)污染物的性質(zhì)又可分為化學(xué)毒物監(jiān)測、熱污染監(jiān)測、噪聲污染監(jiān)測、放射性污染監(jiān)測等。
大氣污染監(jiān)測常用的監(jiān)測項(xiàng)目主要包括氣象參數(shù)和總懸浮顆粒物(TSP)、降塵、一氧化碳(CO)、二氧化硫(SO2)、碳?xì)浠衔铮℉C)、氮氧化物(NOx)、臭氧(O3)等;地表水水質(zhì)監(jiān)測的項(xiàng)目一般包括水文、氣象參數(shù)以及溫度、酸堿度(pH)、懸浮固體(SS)、溶解氧(DO)、生物耗氧量(BOD)、化學(xué)耗氧量(COD)、某些毒物等。 環(huán)境監(jiān)測是一項(xiàng)技術(shù)含量很高的工作,必須由專業(yè)人員遵照國家和國際上規(guī)定的監(jiān)測方法和標(biāo)準(zhǔn)來進(jìn)行,監(jiān)測結(jié)果要編制成專業(yè)文件。
對(duì)監(jiān)測過程要進(jìn)行全面的質(zhì)量控制,保證數(shù)據(jù)的可靠性 環(huán)境標(biāo)準(zhǔn)是對(duì)某些環(huán)境要素所作。
生化需氧量()簡稱BOD。
是表示水中有機(jī)物等需氧污染物質(zhì)含量的一項(xiàng)綜合指標(biāo)。它說明水中有機(jī)物處于微生物的生化作用進(jìn)行氧化分解,使之無機(jī)化或氣體化時(shí)所消耗水中溶解氧的總數(shù)量,其單位以ppm(毫克/升)表示。
BOD一般指的是微生物可降解的有機(jī)物的量,即廢水中可降解有機(jī)物的量。BOD的測定方法包括:1.標(biāo)準(zhǔn)稀釋法這種方法是最經(jīng)典的也是最常用的方法。
簡單的說,就是測定在20±1℃溫度下培養(yǎng)五天前后溶液中的溶氧量的差值。求出來的BOD值稱為“五日生化需氧量(BOD5)”。
2.生物傳感器法其原理是以一定的流量使水樣及空氣進(jìn)入流通量池中與微生物傳感器接觸,水樣中溶解性可升華降解的有機(jī)物受菌膜的擴(kuò)散速度達(dá)到恒定時(shí),擴(kuò)散到氧電極表面上的氧質(zhì)量也達(dá)到恒定并且產(chǎn)生一恒定電流,由于該電流與水樣中可生化降解的有機(jī)物的差值與氧的減少量有定量關(guān)系,據(jù)此可算出水樣的生化需氧量。通常用BOD5標(biāo)準(zhǔn)樣品對(duì)比,以換算出水樣的BOD5的值。
3.活性污泥曝氣降解法控制溫度為30℃-35℃,利用活性污泥強(qiáng)制曝氣降解樣品2小時(shí),經(jīng)重鉻酸鉀消解生物降解后的樣品,測定生物降解前后的化學(xué)計(jì)量需氧量,其差值即為BOD。根據(jù)與標(biāo)準(zhǔn)方法的對(duì)比實(shí)驗(yàn)結(jié)果,可換算成為BOD5值。
4.測壓法在密閉的培養(yǎng)瓶中,水樣中溶解氧被微生物消耗,微生物因呼吸作用產(chǎn)生與耗氧量相當(dāng)?shù)腃O2,當(dāng)CO2被吸收后使密閉系統(tǒng)的壓力降低,根據(jù)壓力測得的壓降可求出水樣的BOD值。
藥動(dòng)學(xué)重要參數(shù)及意義:
1、消除半衰期:血藥濃度下降一半所需的時(shí)間。是決定給藥間隔時(shí)間的重要參數(shù)之一。
2、生物利用度:藥物吸收速度與程度的一種量度。可藥時(shí)曲線下面積AUC計(jì)算,F(xiàn)=口服AUC/注射AUC。
3、表觀分布容積Vd :是指血藥濃度與體內(nèi)藥物量間的一個(gè)比值,Vd=A/C=體內(nèi)藥量/血藥濃度。可反映藥物分布的廣泛程度或藥物與組織結(jié)合的程度。
4、藥-時(shí)曲線下面積AUC 代表一次用藥后的吸收總量,反映藥物的吸收程度。
1.方法:檢測細(xì)菌總數(shù)、大腸菌群、真菌和HBsAg 四項(xiàng)指
標(biāo)。
2. 細(xì)菌菌落總數(shù):用浸有生理鹽水的棉拭子在5 x 5cm2滅
菌規(guī)格板內(nèi)涂抹受檢物品表面10 次,將棉拭子放入10ml 滅菌
生理鹽水中。按部頒《消毒技術(shù)規(guī)范》(1991)方法檢驗(yàn)。
3.大腸桿菌:按上法采樣將棉拭子放入膽鹽乳糖管中。按
衛(wèi)生部《消毒技術(shù)規(guī)范》(1991)方法檢驗(yàn),記錄陽性、陰性數(shù)。
4 真菌:按(2)方法采樣,將樣品按1:10稀釋,用H-92
微型混合器震蕩30min,使真菌孢子充分散開,接種于馬鈴薯
葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基,28°C培養(yǎng)7d,記錄平皿陽性、陰性數(shù)。
5 HBsAg:用蘸有1%血清磷酸鹽緩沖液(0.01M,pH 7.2-7.4)棉拭子在5 x 5cm2規(guī)格板內(nèi)涂抹物體表面10次,浸入1ml
磷酸鹽緩沖液中。按部頒《消毒技術(shù)規(guī)范》(1991)方法檢驗(yàn).
注:王云峰,王有森,白竟玉,等.消毒技術(shù)規(guī)范〔M〕. 北京:衛(wèi)生部,1991:100-113
目前的話,一般是血液和唾液兩種采樣方式。我之前做過的盛景基因公司他們是通過唾液采樣,他們的流程如下:
【采集方法】
1.在采集唾液樣本前30分鐘,請用飲用水將口腔內(nèi)的雜物洗漱干凈。
2.用舌尖抵住上顎或下顎齒根以富集唾液,向采集漏斗中輕輕吐入唾液,直至液體唾液(非氣泡)達(dá)到刻度線高度。
3.手持唾液采集管,令其處于直立。并用另一只手協(xié)助將采集漏斗旋下。
4.從采集管底部取下采集管管蓋,并用管蓋將采集管擰緊。
5.上下顛倒采集管5次,使唾液與唾液保存液充分混勻。丟棄使用過的采集漏斗。
【注意事項(xiàng)】
1.采樣前30分鐘,請勿飲食、飲水、吸煙或嚼口香糖等。
2.多數(shù)人按照上述步驟采集唾液樣本需要2~5分鐘的時(shí)間。
3.開始采集唾液之前,請放松臉頰,并用手指輕輕按摩臉頰15~30秒以產(chǎn)生唾液。
4.確認(rèn)唾液樣本采集管的外包裝完好,檢查唾液保存管,確認(rèn)無漏液。
5.室溫儲(chǔ)存條件下,本產(chǎn)品收集的唾液樣本可穩(wěn)定保存12個(gè)月,保存期限內(nèi),可以分離高質(zhì)量的高分子量DNA片段。鑒于樣本存在個(gè)體差異,不同樣本的具體保存期限有所波動(dòng)。
6.本產(chǎn)品為一次性使用,禁止二次使用,禁止不同個(gè)體使用同一個(gè)唾液采集管。
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