做細(xì)胞實(shí)驗(yàn)的方法(生物的實(shí)驗(yàn)方法)

1.生物的實(shí)驗(yàn)方法有哪些

(1)顯微觀察法，如觀察植物細(xì)胞有絲分裂、觀察葉綠體和細(xì)胞質(zhì)流動(dòng)、觀察植物細(xì)胞質(zhì)壁分離和復(fù)原實(shí)驗(yàn)等.

(2)觀色法，如觀察動(dòng)物毛色和植物花色的遺傳等.

(3)原子示綜法，如噬菌體浸染細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)，用18O2和14CO2追蹤光合作用中氧原子和碳原子轉(zhuǎn)移途徑的實(shí)驗(yàn)等.

(4)等組實(shí)驗(yàn)法，如小麥淀粉酶催化淀粉水解的實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)生長素的燕麥胚芽鞘實(shí)驗(yàn)等.

(5)加法創(chuàng)意法，如用飼喂法研究甲狀腺激素，用注射法研究動(dòng)物胰島素和生長激素，用移植法研究性激素等.

(6)減法創(chuàng)意法，如用閹割法、摘除法研究性激素、甲狀腺激素和生長激素的實(shí)驗(yàn)，雌蕊受粉后除去正在發(fā)育著的種子等.

(7)雜交實(shí)驗(yàn)法，如孟德爾發(fā)現(xiàn)遺傳定律的植物雜交、測交的實(shí)驗(yàn)，小麥的雜交等.

(8)化學(xué)分析法，如番茄和水稻對(duì)Ca和Si選擇性吸收，葉綠體中色素的提取和分離實(shí)驗(yàn)等.

(9)理論分析法，如大、小兩種草履蟲競爭的實(shí)驗(yàn)，植物根向地生長、莖背地生長的實(shí)驗(yàn)，植物向光性實(shí)驗(yàn)等.

(10)模擬實(shí)驗(yàn)法，如滲透作用的實(shí)驗(yàn)裝置，分離定律的模擬實(shí)驗(yàn)等

2.初中生物實(shí)驗(yàn)方法有哪些

實(shí)驗(yàn)方法是整個(gè)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的精髓，是做好實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的關(guān)鍵所在.現(xiàn)將與中學(xué)實(shí)驗(yàn)有關(guān)的一些最常見的經(jīng)典的實(shí)驗(yàn)方法匯總?cè)缦拢?/p>

(1)化學(xué)物質(zhì)的檢測方法：

①淀粉——碘液

②還原糖——斐林試劑、班氏試劑

③CO2——Ca(OH)2溶液或酸堿指示劑

④乳酸——pH試紙

⑤O2——余燼復(fù)燃

⑥無O2——火焰熄滅

⑦蛋白質(zhì)——雙縮脲試劑

⑧染色體——龍膽紫、醋酸洋紅溶液

⑨DNA——二苯胺試劑

⑩脂肪——蘇丹Ⅲ或蘇丹Ⅳ染液

(2)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的顯示方法：

①光合速率——O2釋放量或CO2吸收量或淀粉產(chǎn)生量

②呼吸速率——O2吸收量或CO2釋放量或淀粉減少量

③原子途徑——放射性同位素示蹤法

④細(xì)胞液濃度大小——質(zhì)壁分離

⑤細(xì)胞是否死亡——質(zhì)壁分離

⑥甲狀腺激素作用——?jiǎng)游锖难趿浚l(fā)育速度等

⑦生長激素作用——生長速度（體重變化，身高變化）

⑧胰島素作用——?jiǎng)游锘顒?dòng)狀態(tài)

⑨菌量——菌落數(shù)或亞甲基藍(lán)溶液褪色程度

⑩大腸桿菌——伊紅—美藍(lán)瓊脂培養(yǎng)基

(3)實(shí)驗(yàn)條件的控制方法：

①增加水中氧氣——泵入空氣或吹氣或放入綠色植物

②減少水中氧氣——容器密封或油膜覆蓋或用涼開水

③除去容器中CO2——NaOH溶液

④除去葉片中原有淀粉——置于黑暗環(huán)境

⑤除去葉片中葉綠素——酒精隔水加熱

⑥除去光合作用對(duì)呼吸作用的干擾——給植株遮光

⑦如何得到單色光——棱鏡色散或彩色薄膜濾光

⑧血液抗凝——加入檸檬酸鈉

⑨線粒體提取——細(xì)胞勻漿離心

⑩骨的脫鈣——鹽酸溶液

⑾滅菌方法——微生物培養(yǎng)的關(guān)鍵在于滅菌，對(duì)不同材料，滅菌方法不同：培養(yǎng)基用高壓蒸氣滅菌；接種環(huán)用火焰灼燒滅菌；雙手用肥皂洗凈，擦干后用75%酒精消毒；整個(gè)接種過程都在實(shí)驗(yàn)室無菌區(qū)進(jìn)行.

(4)實(shí)驗(yàn)中控制溫度的方法：

①還原糖鑒定：水浴煮沸加熱

②酶促反應(yīng)：水浴保溫

③用酒精溶解葉中的葉綠素：酒精要隔水加熱

④DNA的鑒定：水浴煮沸加熱

⑤細(xì)胞和組織培養(yǎng)以及微生物培養(yǎng)：恒溫培養(yǎng)

3.高中生物常用的實(shí)驗(yàn)方法有哪些

1.實(shí)驗(yàn)方法 實(shí)驗(yàn)方法是整個(gè)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的精髓，是做好實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的關(guān)鍵所在。

現(xiàn)將與中學(xué)實(shí)驗(yàn)有關(guān)的一些最常見的經(jīng)典的實(shí)驗(yàn)方法匯總?cè)缦拢?（1）化學(xué)物質(zhì)的檢測方法： ①淀粉——碘液 ②還原糖——斐林試劑、班氏試劑 ③CO2——Ca(OH)2溶液或酸堿指示劑 ④乳酸——pH試紙 ⑤O2——余燼復(fù)燃 ⑥無O2——火焰熄滅 ⑦蛋白質(zhì)——雙縮脲試劑 ⑧染色體——龍膽紫、醋酸洋紅溶液 ⑨DNA——二苯胺試劑 ⑩脂肪——蘇丹Ⅲ或蘇丹Ⅳ染液 （2）實(shí)驗(yàn)結(jié)果的顯示方法： ①光合速率——O2釋放量或CO2吸收量或淀粉產(chǎn)生量 ②呼吸速率——O2吸收量或CO2釋放量或淀粉減少量 ③原子途徑——放射性同位素示蹤法 ④細(xì)胞液濃度大小——質(zhì)壁分離 ⑤細(xì)胞是否死亡——質(zhì)壁分離 ⑥甲狀腺激素作用——?jiǎng)游锖难趿?，發(fā)育速度等 ⑦生長激素作用——生長速度（體重變化，身高變化） ⑧胰島素作用——?jiǎng)游锘顒?dòng)狀態(tài) ⑨菌量——菌落數(shù)或亞甲基藍(lán)溶液褪色程度 ⑩大腸桿菌——伊紅—美藍(lán)瓊脂培養(yǎng)基 （3）實(shí)驗(yàn)條件的控制方法： ①增加水中氧氣——泵入空氣或吹氣或放入綠色植物 ②減少水中氧氣——容器密封或油膜覆蓋或用涼開水 ③除去容器中CO2——NaOH溶液 ④除去葉片中原有淀粉——置于黑暗環(huán)境 ⑤除去葉片中葉綠素——酒精隔水加熱 ⑥除去光合作用對(duì)呼吸作用的干擾——給植株遮光 ⑦如何得到單色光——棱鏡色散或彩色薄膜濾光 ⑧血液抗凝——加入檸檬酸鈉 ⑨線粒體提取——細(xì)胞勻漿離心 ⑩骨的脫鈣——鹽酸溶液 ⑾滅菌方法——微生物培養(yǎng)的關(guān)鍵在于滅菌，對(duì)不同材料，滅菌方法不同：培養(yǎng)基用高壓蒸氣滅菌；接種環(huán)用火焰灼燒滅菌；雙手用肥皂洗凈，擦干后用75%酒精消毒；整個(gè)接種過程都在實(shí)驗(yàn)室無菌區(qū)進(jìn)行。 （4）實(shí)驗(yàn)中控制溫度的方法： ①還原糖鑒定：水浴煮沸加熱 ②酶促反應(yīng)：水浴保溫 ③用酒精溶解葉中的葉綠素：酒精要隔水加熱 ④DNA的鑒定：水浴煮沸加熱 ⑤細(xì)胞和組織培養(yǎng)以及微生物培養(yǎng)：恒溫培養(yǎng) 2.斐林試劑、班氏試劑與尿糖試紙 這三種物質(zhì)均可用來檢驗(yàn)含醛基的有機(jī)物的存在，在醫(yī)學(xué)上用來檢驗(yàn)糖尿病，其原理均是利用了Cu2+的氧化性把醛基氧化，但成分略有不同： 斐林試劑：即硫酸銅、氫氧化鈉和酒石酸鉀鈉組成的藍(lán)色混合溶液。

分為斐林試劑A和斐林試劑B,A為CuSO4溶液，B為氫氧化鈉和酒石酸鉀鈉的混合溶液，使用時(shí)將A、B等體積混合即成斐林試劑。 班氏試劑：即硫酸銅、碳酸鈉和檸檬酸鈉組成的混合液，又叫本尼迪克特（Benedict）試劑，它與醛反應(yīng)的結(jié)果是與斐林試劑一致的，只是比斐林試劑更穩(wěn)定，所以在臨床化驗(yàn)中更常使用。

尿糖試紙：又叫硫酸銅試紙，呈白色，帶藍(lán)色斑點(diǎn)，用于糖尿病患者的尿糖測試。每片含硫酸銅20毫克，枸櫞酸300毫克，碳酸鈉80毫克，氫氧化鈉235毫克。

尿糖試紙法快速、方便，試紙的正確使用方法為：將試紙條放在尿液中浸濕，一秒鐘后取出，在一分鐘內(nèi)觀察試紙的顏色，并與標(biāo)準(zhǔn)色板對(duì)照，根據(jù)不同的顏色來確定尿糖陽性的程度。 3.斐林試劑和雙縮脲試劑的比較 相同點(diǎn)：①都由NaOH溶液和CuSO4溶液構(gòu)成； ②斐林試劑甲液和雙縮脲試劑A都為0.1g/mLNaOH溶液。

不同點(diǎn)：①CuSO4溶液濃度不一樣：斐林試劑乙液為0.05g/mLCuSO4溶液， 雙縮脲試劑B為0.01g/mLCuSO4溶液。 ②配制比例不一樣。

③使用方法不一樣：斐林試劑是甲、乙液一起混合后再使用， 雙縮脲試劑則是先向待鑒定材料加入A試劑搖勻后，再加入試劑B。 ④鑒定的對(duì)象不一樣：斐林試劑鑒定的是還原糖，雙縮脲試劑鑒定的是蛋白質(zhì)。

⑤反應(yīng)本質(zhì)及顏色反應(yīng)不一樣。 4.蘇丹Ⅲ染液與蘇丹Ⅳ染液的比較 都是用來鑒定脂肪。

蘇丹Ⅳ染液更易溶于脂肪，所以染色更深，同時(shí)要求染色時(shí)間更短。 生物學(xué)中常用的試劑： 1、斐林試劑： 成分：0.1g/ml NaOH（甲液）和0.05g/ml CuSO4（乙液）。

用法：將斐林試劑甲液和乙液等體積混合，再將混合后的斐林試劑倒入待測液，水浴加熱或直接加熱，如待測液中存在還原糖，則呈磚紅色。 2、班氏糖定性試劑：為藍(lán)色溶液。

和葡萄糖混合后沸水浴會(huì)出現(xiàn)磚紅色沉淀。用于尿糖的測定。

3、雙縮脲試劑：成分：0.1g/ml NaOH（甲液）和0.01g/ml CuSO4（乙液）。用法：向待測液中先加入2ml甲液，搖勻，再向其中加入3~4滴乙液，搖勻。

如待測中存在蛋白質(zhì)，則呈現(xiàn)紫色。 4、蘇丹Ⅲ：用法：取蘇丹Ⅲ顆粒溶于95%的酒精中，搖勻。

用于檢測脂肪?？蓪⒅救境砷冱S色（被蘇丹Ⅳ染成紅色）。

5、二苯胺：用于鑒定DNA。DNA遇二苯胺（沸水?。?huì)被染成藍(lán)色。

6、甲基綠：用于鑒定DNA。DNA遇甲基綠（常溫）會(huì)被染成藍(lán)綠色。

（甲基綠使DNA呈現(xiàn)綠色，吡羅紅使RNA呈現(xiàn)紅色。） 7、50%的酒精溶液：在脂肪鑒定中，用蘇丹Ⅲ染液染色，再用50%的酒精溶液洗去浮色。

8、75%的酒精溶液：用于殺菌消毒，75%的酒精能滲入細(xì)胞內(nèi)，使蛋白質(zhì)凝固變性。低于這個(gè)濃度，酒精的滲透脫水作用減弱，殺菌力不強(qiáng)；而高于這個(gè)濃度，則會(huì)使細(xì)菌表面蛋白質(zhì)迅速脫水，凝固成膜，妨礙酒精透入，削弱殺菌能力。

75%的酒精溶液常用于手術(shù)前、打針、換藥、針灸前皮膚脫碘消毒以及機(jī)。

4.生物實(shí)驗(yàn)有多少種實(shí)驗(yàn)方法

1.顯微觀察法：如“觀察細(xì)胞有絲分裂”“觀察葉綠體和細(xì)胞質(zhì)流動(dòng)”“用顯微鏡觀察多種多樣的細(xì)胞”等.

2.觀色法：如“生物組織中還原糖、脂肪和蛋白質(zhì)的鑒定”“觀察動(dòng)物毛色和植物花色的遺傳”“DNA和RNA的分布”等.

3.同位素標(biāo)記法（元素示蹤法）：如“噬菌體浸染細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)”“恩格爾曼實(shí)驗(yàn)”等.

4.補(bǔ)充法：如用飼喂法研究甲狀腺激素，用注射法研究動(dòng)物胰島素和生長激素，用移植法研究性激素等.

5.摘除法：如用“閹割法、摘除法研究性激素、甲狀腺激素或生長激素的作用”“雌蕊受粉后除去正在發(fā)育著的種子”等.

6.雜交法：如植物的雜交、測交實(shí)驗(yàn)等.

7.化學(xué)分析法：如“番茄對(duì)Ca和Si的選擇吸收”“葉綠體中色素的提取和分離”等.

8.理論分析法：如“大、小兩種草履蟲的競爭實(shí)驗(yàn)”“植物向性動(dòng)物的研究”等.

9.模擬實(shí)驗(yàn)法：如“滲透作用的實(shí)驗(yàn)裝置”“分離定律的模擬實(shí)驗(yàn)”等.

10.引流法：臨時(shí)裝片中液體的更換，用吸水紙?jiān)谝粋?cè)吸引，于另一側(cè)滴加換進(jìn)的液體.

5.細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中常用來固定細(xì)胞或細(xì)胞器的方法有哪些

細(xì)胞固定化方法有：Adsorption（吸附）；covalent bonding（共價(jià)結(jié)合）；Cross linking（交聯(lián)）；Entrapment（包埋）、Encapsulation（微膠囊） 。下面對(duì)這幾種做具體介紹。

一、吸附法

1，原理

利用載體和細(xì)胞表面所帶電荷的靜電引力（van der Walls forces），使細(xì)胞吸附于載體上。吸附法可分為物理吸附和離子吸附兩種。該法操作簡單，固定化過程對(duì)細(xì)胞活性影響小。

2，載體的材料

采用吸附法固定細(xì)胞，所用的載體主要有：硅藻土、木屑、多孔玻璃、活性炭、

多孔陶瓷、離子交換樹脂和等。塑料

3，影響吸附固定化的因素

(1)Z-電位

(2)細(xì)胞的性質(zhì)和細(xì)胞壁的組成

(3)載體的性質(zhì)

(4)pH

二、共價(jià)結(jié)合法

利用細(xì)胞表面的反應(yīng)基團(tuán)（如氨基、羧基、羥基、巰基、咪唑基）與活化的無機(jī)或有機(jī)載體反應(yīng)，形成共價(jià)鍵將細(xì)胞固定。用該法制備的固定化細(xì)胞一般為死細(xì)胞。

三、交聯(lián)法

利用雙功能或多功能試劑與細(xì)胞表面的反應(yīng)基團(tuán)（如氨基、羧基、羥基、巰基、咪唑基）反應(yīng)，從而使細(xì)胞固定。常用的交聯(lián)劑包括：戊二醛、甲苯二異氰酸酯、雙重氮聯(lián)苯胺。

由于交聯(lián)試劑的毒性，這一方法具有一定的局限性。

四、包埋法

包埋法是細(xì)胞固定化最常用的方法。包埋法可以分為：

1，微膠囊法：利用半透性聚合物薄膜將細(xì)胞包裹起來，形成微型膠囊；

2，凝膠包埋法：是在無菌條件下，將生物細(xì)胞和膠溶液混合在一起，然后再經(jīng)過相應(yīng)的造粒處理，形成直徑為1-4mm的膠粒。

常用的包埋劑為：聚丙烯酰胺、瓊脂、海藻酸、卡拉膠、二醋酸纖維、三醋酸纖維、明膠等。

五、固定化方法的比較

吸附法：條件溫和、方法簡便、載體可再生。但操作穩(wěn)定性差。

共價(jià)法：操作穩(wěn)定性高。但由于試劑的毒性，易引起細(xì)胞的破壞。

交聯(lián)法：可得到高細(xì)胞濃度，但機(jī)械強(qiáng)度低，無法再生，不適于實(shí)際應(yīng)用。

包埋法：細(xì)胞和載體間沒有束縛，固定化后，細(xì)胞仍保持較高活力。但這類方法只適用于小分子底物。

6.研究細(xì)胞有什么方法

細(xì)胞生物學(xué)的研究方法： 1. 顯微成像包括直接成像和間接成像。

顯微技術(shù)是細(xì)胞生物學(xué)最基本的研究技術(shù)， 包括光學(xué)顯微技術(shù)和電子顯微技術(shù)。在光學(xué)顯微技術(shù)中要掌握幾種常用顯微鏡成像的基本原理，包括普通雙筒顯微鏡、熒光顯微鏡、相差顯微鏡、暗視野顯微鏡、倒置顯微鏡。

2. 細(xì)胞化學(xué)技術(shù)：酶細(xì)胞化學(xué)技術(shù)、免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)、細(xì)胞分選技術(shù)， 其中流式細(xì)胞分選技術(shù)是細(xì)胞生物學(xué)和現(xiàn)代生物技術(shù)中的重要技術(shù)。 3. 細(xì)胞工程技術(shù)是細(xì)胞生物學(xué)與遺傳學(xué)的交叉領(lǐng)域，主要利用細(xì)胞生物學(xué)的原理和方法，結(jié)合工程學(xué)的技術(shù)手段，按照人們預(yù)先的設(shè)計(jì)，有計(jì)劃地改變或創(chuàng)造細(xì)胞遺傳性的技術(shù)。

包括體外大量培養(yǎng)和繁殖細(xì)胞，或獲得細(xì)胞產(chǎn)品、或利用細(xì)胞體本身。主要內(nèi)容包括：細(xì)胞融合、細(xì)胞生物反應(yīng)器、染色體轉(zhuǎn)移、細(xì)胞器移植、基因轉(zhuǎn)移、細(xì)胞及組織培養(yǎng)。

4. 分離技術(shù)是一大類技術(shù)的總稱，包括細(xì)胞組分的分離和生物大分子的分離， 。 5.分子生物學(xué)方法。

7.探究植物細(xì)胞的吸水和失水實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)方法有哪些

一、實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備

（一）材料：長得較粗壯的幼苗，蘿卜條或馬鈴薯?xiàng)l。

（二）用品：燒杯，試管，清水，鹽水。

二、方法步驟

（一）取兩塊蘿卜條或馬鈴薯?xiàng)l，分別放人盛有清水和鹽水的燒杯中浸泡，過一段時(shí)間取出，可見清水中的蘿卜條硬挺，而鹽水中的蘿卜條則軟縮。這表明植物細(xì)胞可以吸水，也可以失水，并且吸水和失水與環(huán)境中溶液的濃度有關(guān)系。應(yīng)注意此實(shí)驗(yàn)最好是在課前做好，或在上一節(jié)課時(shí)布置給學(xué)生。實(shí)驗(yàn)過程需要約20min。

（二）此實(shí)驗(yàn)也可用兩株植物幼苗，分別將它們的根部插在盛有清水和鹽水（或糖水）的兩個(gè)試管內(nèi)，大約20min左右，從試管里取出兩棵幼苗進(jìn)行比較，可見清水中的幼苗硬挺，而鹽水（或糖水）中的幼苗則萎蔫了。這同樣可以證明植物細(xì)胞可以吸水，也可以失水。此實(shí)驗(yàn)同時(shí)還說明了土壤溶液濃度過大或施肥過量影響根吸收水分的道理。

三、教學(xué)建議

植物細(xì)胞吸水實(shí)驗(yàn)既是教材中《根對(duì)水分的吸收》一節(jié)的演示實(shí)驗(yàn)，又是這一節(jié)課的引言。本實(shí)驗(yàn)大約需要20min左右的時(shí)間。因此，可以發(fā)動(dòng)學(xué)生在課前自己用生活中常用的器皿開展實(shí)驗(yàn)，然后拿到課堂上演示。在演示時(shí)，應(yīng)在實(shí)驗(yàn)材料的后面加一張白紙作為背景，以便使學(xué)生能觀察清楚。

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8.細(xì)胞活力測定的方法有哪些

根據(jù)每個(gè)細(xì)胞有一定的重量而設(shè)計(jì)的。

它可以用于單細(xì)胞、多細(xì)胞以及絲狀體微生物生長的測定。將一定體積的樣品通過離心或過濾將菌體分離出來，經(jīng)洗滌，再離心后直接稱重，求出濕重，如果是絲狀體微生物，過濾后用濾紙吸去菌絲之間的自由水，再稱重求出濕重。

不論是細(xì)菌樣品還是絲狀菌樣品，可以將它們放在已知重量的平皿或燒杯內(nèi)，于105℃烘干至恒重，取出放入干燥器內(nèi)冷卻，再稱量，求出微生物干重。如果要測定固體培養(yǎng)基上生長的放線菌或絲狀真菌，可先加熱至50℃，使瓊脂熔化，過濾得菌絲體，再用50℃的生理鹽水洗滌菌絲，然后按上述方法求出菌絲體的濕重或干重。

除了干重、濕重反映細(xì)胞物質(zhì)重量外，還可以通過測定細(xì)胞中蛋白質(zhì)或DNA的含量反映細(xì)胞物質(zhì)的量。蛋白質(zhì)是細(xì)胞的主要成分，含量也比較穩(wěn)定，其中氮是蛋白質(zhì)的重要組成元素。

從一定體積的樣品中分離出細(xì)胞，洗滌后，按凱氏定氮法測出總氮量。蛋白質(zhì)含氮量為16%，細(xì)菌中蛋白質(zhì)含量占細(xì)菌固形物的50%一80%，一般以65%為代表，有些細(xì)菌則只占13%一14%，這種變化是由菌齡和培養(yǎng)條件不同所產(chǎn)生的。

因此總含氮量與蛋白質(zhì)總量之間的關(guān)系可按下列公式計(jì)算：蛋白質(zhì)總量=含氮量*6.25核酸DNA是微生物的重要遺傳物質(zhì)，每個(gè)細(xì)菌的DNA含量相當(dāng)恒定，平均為8.4*`10^(-5)`NG。因此從一定體積的細(xì)菌懸液中所含的細(xì)菌中提取DNA，求得DNA含量，再計(jì)算出這一定體積的細(xì)菌懸液所含的細(xì)菌總數(shù)。