做細胞實驗的方法(生物的實驗方法)

1.生物的實驗方法有哪些

(1)顯微觀察法，如觀察植物細胞有絲分裂、觀察葉綠體和細胞質(zhì)流動、觀察植物細胞質(zhì)壁分離和復原實驗等.

(2)觀色法，如觀察動物毛色和植物花色的遺傳等.

(3)原子示綜法，如噬菌體浸染細菌的實驗，用18O2和14CO2追蹤光合作用中氧原子和碳原子轉(zhuǎn)移途徑的實驗等.

(4)等組實驗法，如小麥淀粉酶催化淀粉水解的實驗，發(fā)現(xiàn)生長素的燕麥胚芽鞘實驗等.

(5)加法創(chuàng)意法，如用飼喂法研究甲狀腺激素，用注射法研究動物胰島素和生長激素，用移植法研究性激素等.

(6)減法創(chuàng)意法，如用閹割法、摘除法研究性激素、甲狀腺激素和生長激素的實驗，雌蕊受粉后除去正在發(fā)育著的種子等.

(7)雜交實驗法，如孟德爾發(fā)現(xiàn)遺傳定律的植物雜交、測交的實驗，小麥的雜交等.

(8)化學分析法，如番茄和水稻對Ca和Si選擇性吸收，葉綠體中色素的提取和分離實驗等.

(9)理論分析法，如大、小兩種草履蟲競爭的實驗，植物根向地生長、莖背地生長的實驗，植物向光性實驗等.

(10)模擬實驗法，如滲透作用的實驗裝置，分離定律的模擬實驗等

2.初中生物實驗方法有哪些

實驗方法是整個實驗設(shè)計的精髓，是做好實驗設(shè)計的關(guān)鍵所在.現(xiàn)將與中學實驗有關(guān)的一些最常見的經(jīng)典的實驗方法匯總?cè)缦拢?/p>

(1)化學物質(zhì)的檢測方法：

①淀粉——碘液

②還原糖——斐林試劑、班氏試劑

③CO2——Ca(OH)2溶液或酸堿指示劑

④乳酸——pH試紙

⑤O2——余燼復燃

⑥無O2——火焰熄滅

⑦蛋白質(zhì)——雙縮脲試劑

⑧染色體——龍膽紫、醋酸洋紅溶液

⑨DNA——二苯胺試劑

⑩脂肪——蘇丹Ⅲ或蘇丹Ⅳ染液

(2)實驗結(jié)果的顯示方法：

①光合速率——O2釋放量或CO2吸收量或淀粉產(chǎn)生量

②呼吸速率——O2吸收量或CO2釋放量或淀粉減少量

③原子途徑——放射性同位素示蹤法

④細胞液濃度大小——質(zhì)壁分離

⑤細胞是否死亡——質(zhì)壁分離

⑥甲狀腺激素作用——動物耗氧量，發(fā)育速度等

⑦生長激素作用——生長速度（體重變化，身高變化）

⑧胰島素作用——動物活動狀態(tài)

⑨菌量——菌落數(shù)或亞甲基藍溶液褪色程度

⑩大腸桿菌——伊紅—美藍瓊脂培養(yǎng)基

(3)實驗條件的控制方法：

①增加水中氧氣——泵入空氣或吹氣或放入綠色植物

②減少水中氧氣——容器密封或油膜覆蓋或用涼開水

③除去容器中CO2——NaOH溶液

④除去葉片中原有淀粉——置于黑暗環(huán)境

⑤除去葉片中葉綠素——酒精隔水加熱

⑥除去光合作用對呼吸作用的干擾——給植株遮光

⑦如何得到單色光——棱鏡色散或彩色薄膜濾光

⑧血液抗凝——加入檸檬酸鈉

⑨線粒體提取——細胞勻漿離心

⑩骨的脫鈣——鹽酸溶液

⑾滅菌方法——微生物培養(yǎng)的關(guān)鍵在于滅菌，對不同材料，滅菌方法不同：培養(yǎng)基用高壓蒸氣滅菌；接種環(huán)用火焰灼燒滅菌；雙手用肥皂洗凈，擦干后用75%酒精消毒；整個接種過程都在實驗室無菌區(qū)進行.

(4)實驗中控制溫度的方法：

①還原糖鑒定：水浴煮沸加熱

②酶促反應：水浴保溫

③用酒精溶解葉中的葉綠素：酒精要隔水加熱

④DNA的鑒定：水浴煮沸加熱

⑤細胞和組織培養(yǎng)以及微生物培養(yǎng)：恒溫培養(yǎng)

3.高中生物常用的實驗方法有哪些

1.實驗方法 實驗方法是整個實驗設(shè)計的精髓，是做好實驗設(shè)計的關(guān)鍵所在。

現(xiàn)將與中學實驗有關(guān)的一些最常見的經(jīng)典的實驗方法匯總?cè)缦拢?（1）化學物質(zhì)的檢測方法： ①淀粉——碘液 ②還原糖——斐林試劑、班氏試劑 ③CO2——Ca(OH)2溶液或酸堿指示劑 ④乳酸——pH試紙 ⑤O2——余燼復燃 ⑥無O2——火焰熄滅 ⑦蛋白質(zhì)——雙縮脲試劑 ⑧染色體——龍膽紫、醋酸洋紅溶液 ⑨DNA——二苯胺試劑 ⑩脂肪——蘇丹Ⅲ或蘇丹Ⅳ染液 （2）實驗結(jié)果的顯示方法： ①光合速率——O2釋放量或CO2吸收量或淀粉產(chǎn)生量 ②呼吸速率——O2吸收量或CO2釋放量或淀粉減少量 ③原子途徑——放射性同位素示蹤法 ④細胞液濃度大小——質(zhì)壁分離 ⑤細胞是否死亡——質(zhì)壁分離 ⑥甲狀腺激素作用——動物耗氧量，發(fā)育速度等 ⑦生長激素作用——生長速度（體重變化，身高變化） ⑧胰島素作用——動物活動狀態(tài) ⑨菌量——菌落數(shù)或亞甲基藍溶液褪色程度 ⑩大腸桿菌——伊紅—美藍瓊脂培養(yǎng)基 （3）實驗條件的控制方法： ①增加水中氧氣——泵入空氣或吹氣或放入綠色植物 ②減少水中氧氣——容器密封或油膜覆蓋或用涼開水 ③除去容器中CO2——NaOH溶液 ④除去葉片中原有淀粉——置于黑暗環(huán)境 ⑤除去葉片中葉綠素——酒精隔水加熱 ⑥除去光合作用對呼吸作用的干擾——給植株遮光 ⑦如何得到單色光——棱鏡色散或彩色薄膜濾光 ⑧血液抗凝——加入檸檬酸鈉 ⑨線粒體提取——細胞勻漿離心 ⑩骨的脫鈣——鹽酸溶液 ⑾滅菌方法——微生物培養(yǎng)的關(guān)鍵在于滅菌，對不同材料，滅菌方法不同：培養(yǎng)基用高壓蒸氣滅菌；接種環(huán)用火焰灼燒滅菌；雙手用肥皂洗凈，擦干后用75%酒精消毒；整個接種過程都在實驗室無菌區(qū)進行。 （4）實驗中控制溫度的方法： ①還原糖鑒定：水浴煮沸加熱 ②酶促反應：水浴保溫 ③用酒精溶解葉中的葉綠素：酒精要隔水加熱 ④DNA的鑒定：水浴煮沸加熱 ⑤細胞和組織培養(yǎng)以及微生物培養(yǎng)：恒溫培養(yǎng) 2.斐林試劑、班氏試劑與尿糖試紙 這三種物質(zhì)均可用來檢驗含醛基的有機物的存在，在醫(yī)學上用來檢驗糖尿病，其原理均是利用了Cu2+的氧化性把醛基氧化，但成分略有不同： 斐林試劑：即硫酸銅、氫氧化鈉和酒石酸鉀鈉組成的藍色混合溶液。

分為斐林試劑A和斐林試劑B,A為CuSO4溶液，B為氫氧化鈉和酒石酸鉀鈉的混合溶液，使用時將A、B等體積混合即成斐林試劑。 班氏試劑：即硫酸銅、碳酸鈉和檸檬酸鈉組成的混合液，又叫本尼迪克特（Benedict）試劑，它與醛反應的結(jié)果是與斐林試劑一致的，只是比斐林試劑更穩(wěn)定，所以在臨床化驗中更常使用。

尿糖試紙：又叫硫酸銅試紙，呈白色，帶藍色斑點，用于糖尿病患者的尿糖測試。每片含硫酸銅20毫克，枸櫞酸300毫克，碳酸鈉80毫克，氫氧化鈉235毫克。

尿糖試紙法快速、方便，試紙的正確使用方法為：將試紙條放在尿液中浸濕，一秒鐘后取出，在一分鐘內(nèi)觀察試紙的顏色，并與標準色板對照，根據(jù)不同的顏色來確定尿糖陽性的程度。 3.斐林試劑和雙縮脲試劑的比較 相同點：①都由NaOH溶液和CuSO4溶液構(gòu)成； ②斐林試劑甲液和雙縮脲試劑A都為0.1g/mLNaOH溶液。

不同點：①CuSO4溶液濃度不一樣：斐林試劑乙液為0.05g/mLCuSO4溶液， 雙縮脲試劑B為0.01g/mLCuSO4溶液。 ②配制比例不一樣。

③使用方法不一樣：斐林試劑是甲、乙液一起混合后再使用， 雙縮脲試劑則是先向待鑒定材料加入A試劑搖勻后，再加入試劑B。 ④鑒定的對象不一樣：斐林試劑鑒定的是還原糖，雙縮脲試劑鑒定的是蛋白質(zhì)。

⑤反應本質(zhì)及顏色反應不一樣。 4.蘇丹Ⅲ染液與蘇丹Ⅳ染液的比較 都是用來鑒定脂肪。

蘇丹Ⅳ染液更易溶于脂肪，所以染色更深，同時要求染色時間更短。 生物學中常用的試劑： 1、斐林試劑： 成分：0.1g/ml NaOH（甲液）和0.05g/ml CuSO4（乙液）。

用法：將斐林試劑甲液和乙液等體積混合，再將混合后的斐林試劑倒入待測液，水浴加熱或直接加熱，如待測液中存在還原糖，則呈磚紅色。 2、班氏糖定性試劑：為藍色溶液。

和葡萄糖混合后沸水浴會出現(xiàn)磚紅色沉淀。用于尿糖的測定。

3、雙縮脲試劑：成分：0.1g/ml NaOH（甲液）和0.01g/ml CuSO4（乙液）。用法：向待測液中先加入2ml甲液，搖勻，再向其中加入3~4滴乙液，搖勻。

如待測中存在蛋白質(zhì)，則呈現(xiàn)紫色。 4、蘇丹Ⅲ：用法：取蘇丹Ⅲ顆粒溶于95%的酒精中，搖勻。

用于檢測脂肪?？蓪⒅救境砷冱S色（被蘇丹Ⅳ染成紅色）。

5、二苯胺：用于鑒定DNA。DNA遇二苯胺（沸水?。蝗境伤{色。

6、甲基綠：用于鑒定DNA。DNA遇甲基綠（常溫）會被染成藍綠色。

（甲基綠使DNA呈現(xiàn)綠色，吡羅紅使RNA呈現(xiàn)紅色。） 7、50%的酒精溶液：在脂肪鑒定中，用蘇丹Ⅲ染液染色，再用50%的酒精溶液洗去浮色。

8、75%的酒精溶液：用于殺菌消毒，75%的酒精能滲入細胞內(nèi)，使蛋白質(zhì)凝固變性。低于這個濃度，酒精的滲透脫水作用減弱，殺菌力不強；而高于這個濃度，則會使細菌表面蛋白質(zhì)迅速脫水，凝固成膜，妨礙酒精透入，削弱殺菌能力。

75%的酒精溶液常用于手術(shù)前、打針、換藥、針灸前皮膚脫碘消毒以及機。

4.生物實驗有多少種實驗方法

1.顯微觀察法：如“觀察細胞有絲分裂”“觀察葉綠體和細胞質(zhì)流動”“用顯微鏡觀察多種多樣的細胞”等.

2.觀色法：如“生物組織中還原糖、脂肪和蛋白質(zhì)的鑒定”“觀察動物毛色和植物花色的遺傳”“DNA和RNA的分布”等.

3.同位素標記法（元素示蹤法）：如“噬菌體浸染細菌的實驗”“恩格爾曼實驗”等.

4.補充法：如用飼喂法研究甲狀腺激素，用注射法研究動物胰島素和生長激素，用移植法研究性激素等.

5.摘除法：如用“閹割法、摘除法研究性激素、甲狀腺激素或生長激素的作用”“雌蕊受粉后除去正在發(fā)育著的種子”等.

6.雜交法：如植物的雜交、測交實驗等.

7.化學分析法：如“番茄對Ca和Si的選擇吸收”“葉綠體中色素的提取和分離”等.

8.理論分析法：如“大、小兩種草履蟲的競爭實驗”“植物向性動物的研究”等.

9.模擬實驗法：如“滲透作用的實驗裝置”“分離定律的模擬實驗”等.

10.引流法：臨時裝片中液體的更換，用吸水紙在一側(cè)吸引，于另一側(cè)滴加換進的液體.

5.細胞生物學實驗中常用來固定細胞或細胞器的方法有哪些

細胞固定化方法有：Adsorption（吸附）；covalent bonding（共價結(jié)合）；Cross linking（交聯(lián)）；Entrapment（包埋）、Encapsulation（微膠囊） 。下面對這幾種做具體介紹。

一、吸附法

1，原理

利用載體和細胞表面所帶電荷的靜電引力（van der Walls forces），使細胞吸附于載體上。吸附法可分為物理吸附和離子吸附兩種。該法操作簡單，固定化過程對細胞活性影響小。

2，載體的材料

采用吸附法固定細胞，所用的載體主要有：硅藻土、木屑、多孔玻璃、活性炭、

多孔陶瓷、離子交換樹脂和等。塑料

3，影響吸附固定化的因素

(1)Z-電位

(2)細胞的性質(zhì)和細胞壁的組成

(3)載體的性質(zhì)

(4)pH

二、共價結(jié)合法

利用細胞表面的反應基團（如氨基、羧基、羥基、巰基、咪唑基）與活化的無機或有機載體反應，形成共價鍵將細胞固定。用該法制備的固定化細胞一般為死細胞。

三、交聯(lián)法

利用雙功能或多功能試劑與細胞表面的反應基團（如氨基、羧基、羥基、巰基、咪唑基）反應，從而使細胞固定。常用的交聯(lián)劑包括：戊二醛、甲苯二異氰酸酯、雙重氮聯(lián)苯胺。

由于交聯(lián)試劑的毒性，這一方法具有一定的局限性。

四、包埋法

包埋法是細胞固定化最常用的方法。包埋法可以分為：

1，微膠囊法：利用半透性聚合物薄膜將細胞包裹起來，形成微型膠囊；

2，凝膠包埋法：是在無菌條件下，將生物細胞和膠溶液混合在一起，然后再經(jīng)過相應的造粒處理，形成直徑為1-4mm的膠粒。

常用的包埋劑為：聚丙烯酰胺、瓊脂、海藻酸、卡拉膠、二醋酸纖維、三醋酸纖維、明膠等。

五、固定化方法的比較

吸附法：條件溫和、方法簡便、載體可再生。但操作穩(wěn)定性差。

共價法：操作穩(wěn)定性高。但由于試劑的毒性，易引起細胞的破壞。

交聯(lián)法：可得到高細胞濃度，但機械強度低，無法再生，不適于實際應用。

包埋法：細胞和載體間沒有束縛，固定化后，細胞仍保持較高活力。但這類方法只適用于小分子底物。

6.研究細胞有什么方法

細胞生物學的研究方法： 1. 顯微成像包括直接成像和間接成像。

顯微技術(shù)是細胞生物學最基本的研究技術(shù)， 包括光學顯微技術(shù)和電子顯微技術(shù)。在光學顯微技術(shù)中要掌握幾種常用顯微鏡成像的基本原理，包括普通雙筒顯微鏡、熒光顯微鏡、相差顯微鏡、暗視野顯微鏡、倒置顯微鏡。

2. 細胞化學技術(shù)：酶細胞化學技術(shù)、免疫細胞化學技術(shù)、細胞分選技術(shù)， 其中流式細胞分選技術(shù)是細胞生物學和現(xiàn)代生物技術(shù)中的重要技術(shù)。 3. 細胞工程技術(shù)是細胞生物學與遺傳學的交叉領(lǐng)域，主要利用細胞生物學的原理和方法，結(jié)合工程學的技術(shù)手段，按照人們預先的設(shè)計，有計劃地改變或創(chuàng)造細胞遺傳性的技術(shù)。

包括體外大量培養(yǎng)和繁殖細胞，或獲得細胞產(chǎn)品、或利用細胞體本身。主要內(nèi)容包括：細胞融合、細胞生物反應器、染色體轉(zhuǎn)移、細胞器移植、基因轉(zhuǎn)移、細胞及組織培養(yǎng)。

4. 分離技術(shù)是一大類技術(shù)的總稱，包括細胞組分的分離和生物大分子的分離， 。 5.分子生物學方法。

7.探究植物細胞的吸水和失水實驗的實驗方法有哪些

一、實驗準備

（一）材料：長得較粗壯的幼苗，蘿卜條或馬鈴薯條。

（二）用品：燒杯，試管，清水，鹽水。

二、方法步驟

（一）取兩塊蘿卜條或馬鈴薯條，分別放人盛有清水和鹽水的燒杯中浸泡，過一段時間取出，可見清水中的蘿卜條硬挺，而鹽水中的蘿卜條則軟縮。這表明植物細胞可以吸水，也可以失水，并且吸水和失水與環(huán)境中溶液的濃度有關(guān)系。應注意此實驗最好是在課前做好，或在上一節(jié)課時布置給學生。實驗過程需要約20min。

（二）此實驗也可用兩株植物幼苗，分別將它們的根部插在盛有清水和鹽水（或糖水）的兩個試管內(nèi)，大約20min左右，從試管里取出兩棵幼苗進行比較，可見清水中的幼苗硬挺，而鹽水（或糖水）中的幼苗則萎蔫了。這同樣可以證明植物細胞可以吸水，也可以失水。此實驗同時還說明了土壤溶液濃度過大或施肥過量影響根吸收水分的道理。

三、教學建議

植物細胞吸水實驗既是教材中《根對水分的吸收》一節(jié)的演示實驗，又是這一節(jié)課的引言。本實驗大約需要20min左右的時間。因此，可以發(fā)動學生在課前自己用生活中常用的器皿開展實驗，然后拿到課堂上演示。在演示時，應在實驗材料的后面加一張白紙作為背景，以便使學生能觀察清楚。

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8.細胞活力測定的方法有哪些

根據(jù)每個細胞有一定的重量而設(shè)計的。

它可以用于單細胞、多細胞以及絲狀體微生物生長的測定。將一定體積的樣品通過離心或過濾將菌體分離出來，經(jīng)洗滌，再離心后直接稱重，求出濕重，如果是絲狀體微生物，過濾后用濾紙吸去菌絲之間的自由水，再稱重求出濕重。

不論是細菌樣品還是絲狀菌樣品，可以將它們放在已知重量的平皿或燒杯內(nèi)，于105℃烘干至恒重，取出放入干燥器內(nèi)冷卻，再稱量，求出微生物干重。如果要測定固體培養(yǎng)基上生長的放線菌或絲狀真菌，可先加熱至50℃，使瓊脂熔化，過濾得菌絲體，再用50℃的生理鹽水洗滌菌絲，然后按上述方法求出菌絲體的濕重或干重。

除了干重、濕重反映細胞物質(zhì)重量外，還可以通過測定細胞中蛋白質(zhì)或DNA的含量反映細胞物質(zhì)的量。蛋白質(zhì)是細胞的主要成分，含量也比較穩(wěn)定，其中氮是蛋白質(zhì)的重要組成元素。

從一定體積的樣品中分離出細胞，洗滌后，按凱氏定氮法測出總氮量。蛋白質(zhì)含氮量為16%，細菌中蛋白質(zhì)含量占細菌固形物的50%一80%，一般以65%為代表，有些細菌則只占13%一14%，這種變化是由菌齡和培養(yǎng)條件不同所產(chǎn)生的。

因此總含氮量與蛋白質(zhì)總量之間的關(guān)系可按下列公式計算：蛋白質(zhì)總量=含氮量*6.25核酸DNA是微生物的重要遺傳物質(zhì)，每個細菌的DNA含量相當恒定，平均為8.4*`10^(-5)`NG。因此從一定體積的細菌懸液中所含的細菌中提取DNA，求得DNA含量，再計算出這一定體積的細菌懸液所含的細菌總數(shù)。