細(xì)胞的顯微測(cè)量(用生物顯微鏡進(jìn)行測(cè)量時(shí),應(yīng)注意哪些)
1.用生物顯微鏡進(jìn)行測(cè)量時(shí),應(yīng)注意哪些
使用生物顯微鏡時(shí)應(yīng)注意的事項(xiàng)
⒈取放時(shí)動(dòng)作一定要輕，切忌震動(dòng)和暴力，否則會(huì)造成光軸偏斜而影響觀察，而且光學(xué)玻璃也容易損壞。
⒉由于物鏡的螺絲口容易損傷，安裝物鏡時(shí)要特別小心，即先向左方倒轉(zhuǎn)一小段，凹凸雙方吻合后再向右方旋轉(zhuǎn)，不要轉(zhuǎn)的太緊，輕輕捻到頭，再稍緊即可。
⒊鏡檢標(biāo)本應(yīng)嚴(yán)格按照操作程序進(jìn)行，觀察時(shí)要從低倍鏡開(kāi)始，看清標(biāo)本后再轉(zhuǎn)用高倍鏡、油鏡。
⒋使用油鏡時(shí)一定要在蓋玻片上滴油后才能使用。油鏡使用完后，應(yīng)立即將鏡頭、蓋玻片上的油擦干凈，否則干后不易擦去，以致?lián)p傷鏡頭和標(biāo)本。但應(yīng)注意二甲苯用量不可過(guò)多，否則，物鏡中的樹(shù)膠溶解，透鏡歪斜甚至脫落，蓋玻片移動(dòng)甚至連同標(biāo)本一起融掉。
⒌使用時(shí)不可用手摸光學(xué)玻璃部分，如需擦拭應(yīng)嚴(yán)格按照光學(xué)部件擦拭辦法。
⒍使用的蓋玻片和載玻片不能過(guò)厚或過(guò)薄。標(biāo)準(zhǔn)的蓋玻片為0.17±0.02毫米，載玻片為1.1±0.04毫米。過(guò)厚或過(guò)薄將會(huì)影響顯微鏡成像及觀察。
2.顯微鏡使用有什么注意事項(xiàng)?
1.低倍鏡的使用方法
(1)取鏡和放置：顯微鏡平時(shí)存放在柜或箱中，用時(shí)從柜中取出，右手緊握鏡臂，左一手托住鏡座，將顯微鏡放在自己左肩前方的實(shí)驗(yàn)臺(tái)上，鏡座后端距桌邊1-2寸為宜，便于坐著操作。
(2)對(duì)光：用拇指和中指移動(dòng)旋轉(zhuǎn)器（切忌手持物鏡移動(dòng)），使低倍鏡對(duì)準(zhǔn)鏡臺(tái)的通光孔（當(dāng)轉(zhuǎn)動(dòng)聽(tīng)到碰叩聲時(shí)，說(shuō)明物鏡光軸已對(duì)準(zhǔn)鏡筒中心）。打開(kāi)光圈，上升集光器，并將反光鏡轉(zhuǎn)向光源，以左眼在目鏡上觀察（右眼睜開(kāi)），同時(shí)調(diào)節(jié)反光鏡方向，直到視野內(nèi)的光線均勻明亮為止。
(3)放置玻片標(biāo)本：取一玻片標(biāo)本放在鏡臺(tái)上，一定使有蓋玻片的一面朝上，切不可放反，用推片器彈簧夾夾住，然后旋轉(zhuǎn)推片器螺旋，將所要觀察的部位調(diào)到通光孔的正中。
(4)調(diào)節(jié)焦距：以左手按逆時(shí)針?lè)较蜣D(zhuǎn)動(dòng)粗調(diào)節(jié)器，使鏡臺(tái)緩慢地上升至物鏡距標(biāo)本片約5毫米處，應(yīng)注意在上升鏡臺(tái)時(shí)，切勿在目鏡上觀察。一定要從右側(cè)看著鏡臺(tái)上升，以免上升過(guò)多，造成鏡頭或標(biāo)本片的損壞。然后，兩眼同時(shí)睜開(kāi)，用左眼在目鏡上觀察，左手順時(shí)針?lè)较蚓徛D(zhuǎn)動(dòng)粗調(diào)節(jié)器，使鏡臺(tái)緩慢下降，直到視野中出現(xiàn)清晰的物象為止。
如果物象不在視野中心，可調(diào)節(jié)推片器將其調(diào)到中心（注意移動(dòng)玻片的方向與視野物象移動(dòng)的方向是相反的）。如果視野內(nèi)的亮度不合適，可通過(guò)升降集光器的位置或開(kāi)閉光圈的大小來(lái)調(diào)節(jié)，如果在調(diào)節(jié)焦距時(shí)，鏡臺(tái)下降已超過(guò)工作距離（>5.40mm）而未見(jiàn)到物象，說(shuō)明此次操作失敗，則應(yīng)重新操作，切不可心急而盲目地上升鏡臺(tái)。
2.高倍鏡的使用方法
(1)選好目標(biāo)：一定要先在低倍鏡下把需進(jìn)一步觀察的部位調(diào)到中心，同時(shí)把物象調(diào)節(jié)到最清晰的程度，才能進(jìn)行高倍鏡的觀察。
(2)轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器，調(diào)換上高倍鏡頭，轉(zhuǎn)換高倍鏡時(shí)轉(zhuǎn)動(dòng)速度要慢，并從側(cè)面進(jìn)行觀察（防止高倍鏡頭碰撞玻片），如高倍鏡頭碰到玻片，說(shuō)明低倍鏡的焦距沒(méi)有調(diào)好，應(yīng)重新操作。
(3)調(diào)節(jié)焦距：轉(zhuǎn)換好高倍鏡后，用左眼在目鏡上觀察，此時(shí)一般能見(jiàn)到一個(gè)不太清楚的物象，可將細(xì)調(diào)節(jié)器的螺旋逆時(shí)針移動(dòng)約0.5-1圈，即可獲得清晰的物象（切勿用粗調(diào)節(jié)器?。?/p>
如果視野的亮度不合適，可用集光器和光圈加以調(diào)節(jié)，如果需要更換玻片標(biāo)本時(shí)，必須順時(shí)針（切勿轉(zhuǎn)錯(cuò)方向）轉(zhuǎn)動(dòng)粗調(diào)節(jié)器使鏡臺(tái)下降，方可取下玻片標(biāo)本。
3.生物顯微鏡油鏡的使用方法
(1)在使用油鏡之前，必須先經(jīng)低、高倍鏡觀察，然后將需進(jìn)一步放大的部分移到視野的中心。
(2)將集光器上升到最高位置，光圈開(kāi)到最大。
(3)轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器，使高倍鏡頭離開(kāi)通光孔，在需觀察部位的玻片上滴加一滴香柏油，然后慢慢轉(zhuǎn)動(dòng)油鏡，在轉(zhuǎn)換油鏡時(shí)，從側(cè)面水平注視鏡頭與玻片的距離，使鏡頭浸入油中而又不以壓破載玻片為宜。
(4)用左眼觀察目鏡，并慢慢轉(zhuǎn)動(dòng)細(xì)調(diào)節(jié)器至物象清晰為止。
如果不出現(xiàn)物象或者目標(biāo)不理想要重找，在加油區(qū)之外重找時(shí)應(yīng)按：低倍→高倍→油鏡程序。在加油區(qū)內(nèi)重找應(yīng)按：低倍→油鏡程序，不得經(jīng)高倍鏡，以免油沾污鏡頭。
(5)油鏡使用完畢，先用擦鏡紙沾少許二甲苯將鏡頭上和標(biāo)本上的香柏油擦去，然后再用干擦鏡紙擦干凈。
3.使用顯微鏡時(shí)應(yīng)注意哪些事項(xiàng)
（一） 顯微鏡的構(gòu)造及各部名稱 關(guān)于顯微鏡的結(jié)構(gòu)與使用方法已于生物學(xué)和組織胚胎學(xué)課程中學(xué)過(guò)，在寄生蟲(chóng)學(xué)的學(xué)習(xí)中，要求進(jìn)一步熟練使用。
顯微鏡的構(gòu)造及各部名稱見(jiàn)圖1。 （二） 顯微鏡的使用 利用自然光源鏡檢時(shí)，最好用朝北的光源，不宜3采用直射陽(yáng)光；利用人工光源時(shí)，宜用日光燈的光源。
鏡檢時(shí)身體要正對(duì)實(shí)習(xí)臺(tái)，采取端正的姿態(tài)，兩眼自然張開(kāi)，左眼觀察標(biāo)本，右眼觀察記錄及繪圖，同時(shí)左手調(diào)節(jié)焦距，使物象清晰并移動(dòng)標(biāo)本視野。右手記錄、繪圖。
鏡檢時(shí)載物臺(tái)不可傾斜，因?yàn)楫?dāng)在五套載物臺(tái)傾斜時(shí)，液體或油易流出，既損壞了標(biāo)本，又污染載物臺(tái)，也影響檢查結(jié)果。 圖1 顯微鏡 鏡檢時(shí)應(yīng)將標(biāo)本按一定方向移動(dòng)視野，直至整個(gè)標(biāo)本觀察完畢，以便不漏檢，不重復(fù)。
顯微鏡的重光為對(duì)光，接物鏡的轉(zhuǎn)換及光線的調(diào)節(jié)。觀察寄生蟲(chóng)標(biāo)本時(shí)，光線調(diào)節(jié)甚為重要。
因?yàn)樗^察的標(biāo)本如蟲(chóng)卵、包囊等，均為自然光狀態(tài)的物體，有大有小，色澤有深有淺，有的無(wú)色透明，而低倍、高倍接物鏡轉(zhuǎn)換較多，故須隨著鏡檢時(shí)對(duì)不同標(biāo)本和要求，需要隨時(shí)調(diào)節(jié)焦距和光線，這樣才能使觀察的物象清晰。在一般情況下，染色標(biāo)本光線宜強(qiáng)，無(wú)色或未染色標(biāo)本光線宜弱；低倍鏡觀察光線宜弱，高倍鏡觀察光線宜強(qiáng)。
1. 對(duì)光： （1）將低倍鏡轉(zhuǎn)至鏡筒下方與鏡筒成一直線。 （2）撥動(dòng)反光鏡，調(diào)節(jié)至視野最亮無(wú)陰影。
反光鏡有平、凹兩面，光源強(qiáng)時(shí)用平面，較暗時(shí)用凹面，需要強(qiáng)光時(shí)，將聚光器提高，光圈放大；需要弱光時(shí)，將聚光器降低，或光圈適當(dāng)縮小。 （3）將待觀察的標(biāo)本置載物臺(tái)上，轉(zhuǎn)動(dòng)粗調(diào)節(jié)器使鏡筒下降至接物鏡接近標(biāo)本。
于轉(zhuǎn)動(dòng)粗調(diào)節(jié)器的同時(shí)，須俯身在鏡旁仔細(xì)觀察接物鏡與標(biāo)本之間的距離。 （4）左眼于接目鏡觀察，同時(shí)左手轉(zhuǎn)動(dòng)粗調(diào)節(jié)，使鏡筒徐徐上升以調(diào)節(jié)焦距，使視野內(nèi)的物象看到上時(shí)即停，再調(diào)微調(diào)節(jié)器，至標(biāo)本清晰為止。
2. 接物鏡的使用及光線的調(diào)節(jié)： 顯微鏡一般具有三個(gè)接物鏡，即低倍、高倍及油鏡，固定于接物鏡轉(zhuǎn)換盤(pán)孔中。觀察標(biāo)本時(shí)，先使用低倍接物鏡，此時(shí)，視野較大，標(biāo)本較易查出，但放大倍數(shù)較小（一般放大100倍），較小的物體不易觀察其結(jié)構(gòu)。
高倍接物鏡放大的倍數(shù)較大（一般放大400倍），能觀察微小的物體或結(jié)構(gòu)。 寄生蟲(chóng)的蠕蟲(chóng)卵，微絲蚴，原蟲(chóng)的滋養(yǎng)體及包囊，昆蟲(chóng)的幼蟲(chóng)，均使用低、高倍鏡。
組織細(xì)胞內(nèi)的原蟲(chóng)，則使用油鏡。使用低、高倍鏡觀察，如在低倍鏡下不能準(zhǔn)確鑒定所見(jiàn)的物體或其內(nèi)部構(gòu)造時(shí)，則轉(zhuǎn)高倍鏡觀察。
使用油鏡觀察，一般加一滴油后直接將油鏡頭浸入油滴中進(jìn)行鏡檢觀察。 3. 低倍、高倍、油鏡頭的識(shí)別： （1）標(biāo)明放大倍數(shù)10*,40*,100*，或10/0.25,40/0.65,100/1.30。
(2)低倍鏡最短，高倍鏡較長(zhǎng)，油鏡最長(zhǎng)。 （3）鏡頭前面的鏡孔低倍鏡最大，高倍鏡較大，油鏡最小。
（4）油鏡頭上?？逃泻谏h(huán)圈，或“油”字。 4. 低倍鏡換高倍鏡的使用方法： （1）光線對(duì)好后，移動(dòng)推進(jìn)器尋找需要觀察的標(biāo)本。
（2）如標(biāo)本的體積較大，不能清楚查見(jiàn)其構(gòu)造因而不能確認(rèn)時(shí)，則將標(biāo)本移至視野中央，再旋轉(zhuǎn)高倍接物鏡于鏡筒下方。 （3）旋轉(zhuǎn)微調(diào)節(jié)器至物象清晰為止。
（4）調(diào)節(jié)聚光器及光圈，使視野內(nèi)的物象達(dá)到最清晰的程度。 5. 油鏡的使用方法： （1）原理：使用油鏡觀察時(shí)，需加香柏油，因?yàn)橛顽R需要進(jìn)入鏡頭的光線多，但油鏡的透氣孔最小，這樣進(jìn)入的光線就少，物體不易看清楚。
同時(shí)又因自玻片透過(guò)的光線，由于介質(zhì)（玻片-空氣-接物鏡）密度（玻片：n=1.52，空氣：n=1.0）不同而發(fā)生了折射散光，因此射入鏡頭的光線就更少，物體更看不清楚。于是采用一種和玻片折光率相接近的介質(zhì)如香柏油，加于標(biāo)本與玻片之間，使光線不通過(guò)空氣，這樣射入鏡頭的光線就較多，物象就看得清楚（圖2）。
(2)油鏡的使用： a.將光線調(diào)至最強(qiáng)程度（聚光器提高，光圈全部開(kāi)放）。 b.轉(zhuǎn)動(dòng)粗調(diào)節(jié)器使鏡筒上升，滴香柏油1小滴（不要過(guò)多，不要涂開(kāi)）于接物鏡正下方標(biāo)本上。
c.轉(zhuǎn)動(dòng)接物鏡轉(zhuǎn)換盤(pán)，使油鏡頭于鏡筒下方。 d.俯身鏡旁側(cè)面在肉眼的觀察下，轉(zhuǎn)動(dòng)粗調(diào)節(jié)器使油鏡頭徐徐下降浸入香柏油內(nèi)，輕輕接觸玻片為止。
e.慢慢轉(zhuǎn)動(dòng)粗調(diào)節(jié)器，使油鏡頭徐徐上升至見(jiàn)到標(biāo)本的物象為止。 f.轉(zhuǎn)動(dòng)微調(diào)節(jié)器，使視野物象達(dá)到最清晰的程度。
g.左手徐徐移動(dòng)推進(jìn)器，并轉(zhuǎn)動(dòng)微調(diào)節(jié)器以觀察標(biāo)本。 h.標(biāo)本觀察完畢后，轉(zhuǎn)動(dòng)粗調(diào)節(jié)器將鏡筒升起，取下標(biāo)本玻片。
立即用擦鏡紙將鏡頭上的香柏油擦凈。 6. 注意事項(xiàng)： （1）使用顯微鏡之前，應(yīng)熟悉顯微鏡的各部名稱及使用方法，特別應(yīng)掌握識(shí)別三種接物鏡之特征。
（2）寄生蟲(chóng)學(xué)實(shí)習(xí)中所觀察的標(biāo)本，大多數(shù)為無(wú)色和顏色較淺，因此必須注意光線的調(diào)節(jié)。 （3）新鮮標(biāo)本觀察時(shí)，須加蓋玻片，以免標(biāo)本因蒸發(fā)而干燥變形或污染侵蝕接物鏡，同時(shí)可使標(biāo)本表面勻平，光線得以集中，有利于觀察。
（三） 顯微鏡的保養(yǎng) 圖3 加用蓋玻片后，標(biāo)本表面勻平，光線得以集中，便于檢查示意圖1.顯微鏡在從木箱中取出或裝箱時(shí)，右手緊握鏡臂，左手穩(wěn)托鏡座，輕輕取出。不要只用一只手提取，以防顯微鏡墜落，然后輕輕放在實(shí)習(xí)臺(tái)上或裝 入木箱內(nèi)。
2.顯微鏡放到實(shí)習(xí)臺(tái)上時(shí)，先放鏡座。
4.觀察植物細(xì)胞時(shí)顯微鏡使用注意事項(xiàng)
應(yīng)注意事項(xiàng)： ①保護(hù)好顯微鏡的鏡頭； ②旋轉(zhuǎn)粗準(zhǔn)焦螺旋不要用力過(guò)猛； ③載物臺(tái)要保持清潔； ④使用低倍鏡觀察； ⑤物鏡不要碰到載玻片以免打碎載玻片； ⑥如何移動(dòng)玻片來(lái)選擇較好的觀察部位； ⑦如何區(qū)分蓋玻片上的臟東西以及氣泡。
詳細(xì)步驟： 關(guān)鍵是對(duì)光和觀察 轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器使低倍物鏡對(duì)準(zhǔn)通光孔； 轉(zhuǎn)動(dòng)遮光器使最大的光圈對(duì)準(zhǔn)通光孔， 再注視目鏡 手調(diào)節(jié)反光嘗矗佰匪脂睹拌色飽姬鏡 使視野呈雪白色 把標(biāo)本放上去 轉(zhuǎn)動(dòng)粗準(zhǔn)焦螺旋使鏡筒下降 然后就邊注視顯微鏡視野內(nèi) 邊調(diào)粗準(zhǔn)焦螺旋 直到視野出現(xiàn)物象 再微調(diào)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋 使物象更清晰！。
5.顯微鏡的使用要注意哪些事項(xiàng)
1、條件許可情況下，建議試驗(yàn)室應(yīng)具備三防條件：防震、防潮、防塵；電源：220V±10%,50HZ；溫度：0°C—40°C。
2、亮度調(diào)整切忌忽大忽小，也不要過(guò)亮，影響燈泡的使用壽命，同時(shí)也有損視力。
3、所有（功能）切換，動(dòng)作要輕，要到位。
4、關(guān)機(jī)時(shí)要將亮度調(diào)到最小。
5、調(diào)焦時(shí)注意不要使物鏡碰到試樣，以免劃傷物鏡。
6、當(dāng)載物臺(tái)墊片圓孔中心的位置遠(yuǎn)離物鏡中心位置時(shí)不要切換物鏡，以免劃傷物鏡。
7、非專業(yè)人員不要調(diào)整照明系統(tǒng)（燈絲位置燈），以免影響成像質(zhì)量。
8、更換鹵素?zé)魰r(shí)要注意高溫，以免灼傷；注意不要用手直接接觸鹵素?zé)舻牟Ａw。
9、關(guān)機(jī)不使用時(shí)，將物鏡通過(guò)調(diào)焦機(jī)構(gòu)調(diào)整到最低狀態(tài)。
10、關(guān)機(jī)不使用時(shí)，不要立即該蓋防塵罩，待冷卻后再蓋，注意防火。
6.顯微鏡的注意事項(xiàng)
顯微鏡使用時(shí)的注意事項(xiàng)
1.取送方法要正確。因?yàn)榉垂忡R是通過(guò)鏡柄插放在鏡臂下面的，目鏡是插放在鏡筒上端的，所以，它們很容易滑落而損壞。取送顯微鏡時(shí)一定要右手握住鏡臂，左手托住鏡座，在任何情況下都不準(zhǔn)用一只手提著顯微鏡。另外，也不準(zhǔn)許學(xué)生取下反光鏡和目鏡亂照亂摸。
2.鏡頭的保護(hù)。目鏡和物鏡平時(shí)放在顯微鏡箱內(nèi)的專用的盒內(nèi)。上實(shí)驗(yàn)課期間，為了防止落上灰塵，要制作專用的塑料袋或布袋，課間時(shí)要隨時(shí)罩好。鏡頭臟了，只能用專用的擦鏡紙擦拭，擦?xí)r要順著一個(gè)方向擦。如果擦拭不凈，最好蘸一點(diǎn)二甲苯繼續(xù)擦。注意，決不能把鏡頭放到二甲苯中浸泡，這樣會(huì)使鏡頭開(kāi)膠，鏡片脫落。
3.粗、細(xì)準(zhǔn)焦螺旋的使用和防止鏡筒下滑。一般地說(shuō)，粗、細(xì)準(zhǔn)焦螺旋各轉(zhuǎn)動(dòng)一周，可以使鏡筒分別移動(dòng)10 mm和0.1 mm。要使鏡筒下降時(shí)，一定要用眼睛直接看著物鏡，使鏡筒緩緩下降。否則，很容易砸壞物鏡和玻片標(biāo)本。
顯微鏡使用時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，鏡筒容易出現(xiàn)下滑現(xiàn)象。如果情況不太嚴(yán)重，教師可以進(jìn)行如下簡(jiǎn)易維修：老式顯微鏡鏡臂的上端有兩個(gè)控制鏡筒松緊的螺絲，只要順時(shí)針擰動(dòng)螺絲，鏡筒就擰緊了；對(duì)于國(guó)產(chǎn)的新式顯微鏡，鏡筒的松緊是通過(guò)兩個(gè)粗準(zhǔn)焦螺旋來(lái)調(diào)節(jié)的。左手握緊左側(cè)粗準(zhǔn)焦螺旋，右手順時(shí)針?lè)较驍Q緊粗準(zhǔn)焦螺旋，鏡筒就擰緊了。如果情況嚴(yán)重，要及時(shí)送到修理部門(mén)維修。
4.轉(zhuǎn)換器的使用。轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器時(shí)，不要用手指扳著物鏡。這樣時(shí)間長(zhǎng)了，容易使物鏡鏡頭松動(dòng)，改變焦距，影響觀察的清晰度。正確的方法是手指握準(zhǔn)轉(zhuǎn)換器的邊緣進(jìn)行轉(zhuǎn)動(dòng)。
5.制作目鏡上的指示針。在演示或考察學(xué)生觀察效果時(shí)，最好用帶有指示針的目鏡。簡(jiǎn)易的做法是：輕輕拆開(kāi)目鏡，將一根短頭發(fā)的一端用膠水粘在目鏡內(nèi)里的邊緣，另一端指向目鏡圓心的附近。觀察時(shí)，輕輕地轉(zhuǎn)動(dòng)目鏡，指示針就能夠指出視野內(nèi)的不同部位。
7.觀察植物細(xì)胞時(shí)顯微鏡使用注意事項(xiàng)
應(yīng)注意事項(xiàng)：①保護(hù)好顯微鏡的鏡頭；②旋轉(zhuǎn)粗準(zhǔn)焦螺旋不要用力過(guò)猛；③載物臺(tái)要保持清潔；④使用低倍鏡觀察；⑤物鏡不要碰到載玻片以免打碎載玻片；⑥如何移動(dòng)玻片來(lái)選擇較好的觀察部位；⑦如何區(qū)分蓋玻片上的臟東西以及氣泡。
詳細(xì)步驟：關(guān)鍵是對(duì)光和觀察轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器使低倍物鏡對(duì)準(zhǔn)通光孔；轉(zhuǎn)動(dòng)遮光器使最大的光圈對(duì)準(zhǔn)通光孔，再注視目鏡 手調(diào)節(jié)反光鏡 使視野呈雪白色把標(biāo)本放上去 轉(zhuǎn)動(dòng)粗準(zhǔn)焦螺旋使鏡筒下降然后就邊注視顯微鏡視野內(nèi) 邊調(diào)粗準(zhǔn)焦螺旋直到視野出現(xiàn)物象 再微調(diào)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋 使物象更清晰！。
