流動(dòng)相的配制(液相色譜所用流動(dòng)相使用時(shí)應(yīng)注意哪些問題)
1.液相色譜所用流動(dòng)相使用時(shí)應(yīng)注意哪些問題
1、流動(dòng)相恢復(fù)到室溫后使用。流動(dòng)相溫度與室溫相差時(shí)，流動(dòng)相在恢復(fù)到室溫前，基線水平很難穩(wěn)定，特別是發(fā)生漂移，也容易產(chǎn)生氣泡等現(xiàn)象。水與有機(jī)溶劑混合時(shí)，混合液變化大，往往會(huì)與室溫相差很大，務(wù)必注意。
2、做HPLC流動(dòng)相的試劑應(yīng)用HPLC級(jí)的、水應(yīng)用二次蒸餾水，水相流動(dòng)相需經(jīng)常更換，防止長菌變質(zhì)。使用去離子水、針劑水、純凈水（炊用）并不合適、尤其是做梯度洗脫時(shí)，水中的不純物會(huì)成為鬼峰，從而干擾分析結(jié)果。
3、流動(dòng)相的pH值過高或過低，流動(dòng)相使用純水，使用高濃度磷酸鹽緩沖溶液，使用離子對(duì)試劑等，均可能造成色譜柱填料被化學(xué)破壞，這種對(duì)色譜柱固定相及鍵合相的破壞通常是不可修復(fù)的。
4、用緩沖鹽做流動(dòng)相時(shí)，在使用前和使用后都要用水清洗流路，絕對(duì)禁止將緩沖溶液留在流路中靜置或更長時(shí)間。
5、在更換兩種互不相容的流動(dòng)相時(shí)，中間要用異丙醇溶液清洗過渡。例如：先用甲醇水做流動(dòng)相，然后再用正己烷做流動(dòng)相時(shí)，一定要先用異丙醇溶液沖洗甲醇水，然后用正己烷沖洗異丙醇，反之也是一樣。在更換流動(dòng)相時(shí)還要考慮色譜柱是否更換。
參考資料來源：百度百科-流動(dòng)相
2.液相色譜所用流動(dòng)相使用時(shí)應(yīng)注意哪些問題
1、流動(dòng)相恢復(fù)到室溫后使用。
流動(dòng)相溫度與室溫相差時(shí)，流動(dòng)相在恢復(fù)到室溫前，基線水平很難穩(wěn)定，特別是發(fā)生漂移，也容易產(chǎn)生氣泡等現(xiàn)象。水與有機(jī)溶劑混合時(shí)，混合液變化大，往往會(huì)與室溫相差很大，務(wù)必注意。
2、做HPLC流動(dòng)相的試劑應(yīng)用HPLC級(jí)的、水應(yīng)用二次蒸餾水，水相流動(dòng)相需經(jīng)常更換，防止長菌變質(zhì)。使用去離子水、針劑水、純凈水（炊用）并不合適、尤其是做梯度洗脫時(shí)，水中的不純物會(huì)成為鬼峰，從而干擾分析結(jié)果。
3、流動(dòng)相的pH值過高或過低，流動(dòng)相使用純水，使用高濃度磷酸鹽緩沖溶液，使用離子對(duì)試劑等，均可能造成色譜柱填料被化學(xué)破壞，這種對(duì)色譜柱固定相及鍵合相的破壞通常是不可修復(fù)的。4、用緩沖鹽做流動(dòng)相時(shí)，在使用前和使用后都要用水清洗流路，絕對(duì)禁止將緩沖溶液留在流路中靜置或更長時(shí)間。
5、在更換兩種互不相容的流動(dòng)相時(shí)，中間要用異丙醇溶液清洗過渡。例如：先用甲醇水做流動(dòng)相，然后再用正己烷做流動(dòng)相時(shí)，一定要先用異丙醇溶液沖洗甲醇水，然后用正己烷沖洗異丙醇，反之也是一樣。
在更換流動(dòng)相時(shí)還要考慮色譜柱是否更換。參考資料來源：百度百科-流動(dòng)相。
3.使用液相色譜進(jìn)行物質(zhì)的定性定量分析時(shí),使用流動(dòng)相有哪些注意事項(xiàng)
(1)溶劑對(duì)于待測(cè)樣品。必須具有合適的極性和良好的選擇性。
(2)溶劑要與檢測(cè)器匹配。對(duì)于紫外吸收檢測(cè)器，應(yīng)注意選用檢測(cè)器波長比溶劑的紫外截止波長要長。所謂溶劑的紫外截止波長指當(dāng)小于截止波長的輻射通過溶劑時(shí)，溶劑對(duì)此輻射產(chǎn)生強(qiáng)烈吸收，此時(shí)溶劑被看作是光學(xué)不透明的，它嚴(yán)重干擾組分的吸收測(cè)量。對(duì)于折光率檢測(cè)器，要求選擇與組分折光率有較大差別的溶劑作流動(dòng)相，以達(dá)最高靈敏度。
(3)高純度。由于高效液相靈敏度高，對(duì)流動(dòng)相溶劑的純度也要求高。不純的溶劑會(huì)引起基線不穩(wěn)，或產(chǎn)生“偽峰”。痕量雜質(zhì)的存在，將使截止波長值增加50~IOOnm。
(4)化學(xué)穩(wěn)定性好。不能選與樣品發(fā)生反應(yīng)或聚合的溶劑。
(5)低粘度。若使用高粘度溶劑，勢(shì)必增高壓力，不利于分離。常用的低粘度溶劑有丙酮、乙醇、乙晴等。但粘度過于低的溶劑也不宜采用，例戊烷、乙醚等，它們易在色譜柱或檢測(cè)器內(nèi)形成氣泡，影響分離.
4.使用液相色譜進(jìn)行物質(zhì)的定性定量分析時(shí),使用流動(dòng)相時(shí)有哪些注意事
流動(dòng)相溶劑使用的注意事項(xiàng) 1.
流動(dòng)相溶劑應(yīng)選擇HPLC的溶劑或依此為標(biāo)準(zhǔn)的溶劑。流動(dòng)相使用前用0.45μm濾膜過濾、脫氣，清除微粒和灰塵。 在送液泵內(nèi)，為了防止雜物（固體）進(jìn)入流路，裝有吸濾器，但網(wǎng)孔徑為10μm，比此更小的顆粒仍然可通過，這會(huì)導(dǎo)致流路和柱子堵塞和污染。為此，建議常用0.45μm濾膜過濾。流動(dòng)相溶劑須經(jīng)脫氣，如不脫氣，在溶劑混合時(shí)，或壓力溫度變化時(shí)容易產(chǎn)生大量氣泡，會(huì)導(dǎo)致泵誤動(dòng)作和輸液不暢，檢測(cè)器產(chǎn)生噪聲信號(hào)等。 2.
流動(dòng)相恢復(fù)到室溫后使用。流動(dòng)相溫度與室溫相差時(shí)，流動(dòng)相在恢復(fù)到室溫前，基線水平很難穩(wěn)定，特別是發(fā)生漂移，也容易產(chǎn)生氣泡等現(xiàn)象。水與有機(jī)溶劑混合時(shí)，混合液變化大，往往會(huì)與室溫相差很大，務(wù)必注意。 3.
做HPLC流動(dòng)相的試劑應(yīng)用HPLC級(jí)的、水應(yīng)用二次蒸餾水，水相流動(dòng)相需經(jīng)常更換，防止長菌變質(zhì)。使用去離子水、針劑水、純凈水（炊用）并不合適、尤其是做梯度洗脫時(shí)，水中的不純物會(huì)成為鬼峰，從而干擾分析結(jié)果。 4.
流動(dòng)相的pH值過高或過低，流動(dòng)相使用純水，使用高濃度磷酸鹽緩沖溶液，使用離子對(duì)試劑等，均可能造成色譜柱填料被化學(xué)破壞，這種對(duì)色譜柱固定相及鍵合相的破壞通常是不可修復(fù)的 5。
流動(dòng)相溶劑使用的注意事項(xiàng) 1.
流動(dòng)相溶劑應(yīng)選擇HPLC的溶劑或依此為標(biāo)準(zhǔn)的溶劑。流動(dòng)相使用前用0.45μm濾膜過濾、脫氣，清除微粒和灰塵。 在送液泵內(nèi)，為了防止雜物（固體）進(jìn)入流路，裝有吸濾器，但網(wǎng)孔徑為10μm，比此更小的顆粒仍然可通過，這會(huì)導(dǎo)致流路和柱子堵塞和污染。為此，建議常用0.45μm濾膜過濾。流動(dòng)相溶劑須經(jīng)脫氣，如不脫氣，在溶劑混合時(shí)，或壓力溫度變化時(shí)容易產(chǎn)生大量氣泡，會(huì)導(dǎo)致泵誤動(dòng)作和輸液不暢，檢測(cè)器產(chǎn)生噪聲信號(hào)等。 2.
流動(dòng)相恢復(fù)到室溫后使用。流動(dòng)相溫度與室溫相差時(shí)，流動(dòng)相在恢復(fù)到室溫前，基線水平很難穩(wěn)定，特別是發(fā)生漂移，也容易產(chǎn)生氣泡等現(xiàn)象。水與有機(jī)溶劑混合時(shí)，混合液變化大，往往會(huì)與室溫相差很大，務(wù)必注意。 3.
做HPLC流動(dòng)相的試劑應(yīng)用HPLC級(jí)的、水應(yīng)用二次蒸餾水，水相流動(dòng)相需經(jīng)常更換，防止長菌變質(zhì)。使用去離子水、針劑水、純凈水（炊用）并不合適、尤其是做梯度洗脫時(shí)，水中的不純物會(huì)成為鬼峰，從而干擾分析結(jié)果。 4.
流動(dòng)相的pH值過高或過低，流動(dòng)相使用純水，使用高濃度磷酸鹽緩沖溶液，使用離子對(duì)試劑等，均可能造成色譜柱填料被化學(xué)破壞，這種對(duì)色譜柱固定相及鍵合相的破壞通常是不可修復(fù)的 5.
用緩沖鹽做流動(dòng)相時(shí)，在使用前和使用后都要用水清洗流路，絕對(duì)禁止將緩沖溶液留在流路中靜置過夜或更長時(shí)間。 6.
若需要使用含鹽的流動(dòng)相，使用前請(qǐng)務(wù)必過濾。并且使用該含鹽流動(dòng)相前，色譜柱需先用低比例有機(jī)相（有機(jī)相含量應(yīng)不低于10%）的溶液沖洗，以免緩沖鹽析出。流動(dòng)相若為蒸餾水或含鹽的緩沖液，建議現(xiàn)用現(xiàn)配，以免流動(dòng)相因滋生微生物而造成柱填料的污染。
