色譜分析的方法(色譜分析有幾種定量方法)

1.色譜分析有幾種定量方法

色譜分析常用的定量方法：歸一化法、內標法和內加（增量）內標法、外標法。

1、面積歸一化法優(yōu)點是簡便、準確，當操作條件變化時對結果影響較小，宜于分析多組分試樣中各組分的含量。但是試樣中所有組分必須全部出峰，因此，此法在使用中受到一定限制。

2、外標法是用純物質配成一系列不同濃度的標準溶液（或直接購買不同濃度標準溶液）分別取一定體積，注入色譜儀，根據峰面積和濃度做標準曲線。在分析未知樣時按與標準曲線相同的操作條件和方法，由標準曲線查出所需組分的濃度（現(xiàn)在在工作站上直接就能求出濃度）。

此法要求進樣準確，操作條件穩(wěn)定，分析樣品和標準曲線條件必須一致。 3、內標法是試樣中所有組分不能全部出峰或只要求測定試樣中某個或某幾個組分時，可采用此法。

內標法是在準確稱取一定量的試樣中，加入一定的標準物質（內標物），根據內標物和試樣的質量以及色譜圖上的相應峰面積，計算待測組分的含量。內標法的關鍵是選擇合適的內標物，內標物應是試樣中不存在的純物質，物質與被測物質相近，能溶于樣品中，但不能于樣品發(fā)生反應。

此法比較費事，一般不使用于快速分析。

2.常用的層析分析方法有哪些

在分離分析特別是蛋白質分離分析中，層析是相當重要、且相當常見的一種技術，其原理較為復雜，對人員的要求相對較高，這里只能做一個相對簡單的介紹。

一、吸附層析 1、吸附柱層析 吸附柱層析是以固體吸附劑為固定相，以有機溶劑或緩沖液為流動相構成柱的一種層析方法。 2、薄層層析 薄層層析是以涂布于玻板或滌綸片等載體上的基質為固定相，以液體為流動相的一種層析方法。

這種層析方法是把吸附劑等物質涂布于載體上形成薄層，然后按紙層析操作進行展層。 3、聚酰胺薄膜層析 聚酰胺對極性物質的吸附作用是由于它能和被分離物之間形成氫鍵。

這種氫鍵的強弱就決定了被分離物與聚酰胺薄膜之間吸附能力的大小。層析時，展層劑與被分離物在聚酰胺膜表面競爭形成氫鍵。

因此選擇適當?shù)恼箤觿┦狗蛛x在聚酰胺膜表面發(fā)生吸附、解吸附、再吸附、再解吸附的連續(xù)過程，就能導致分離物質達到分離目的。 常用的層析分析方法，登錄生物幫看看。

/zt/focus/ 生物熱點研究，生物學熱點問題。

3.色譜法有哪四種常見的方法

高效液相色譜法處理，以指示的 ①的高壓力：更大的阻力，流動的液體通過高壓迅速通過該柱通過柱的流動相，液體載體。

②高效：分離效率高。選擇一個固定相和流動相，以便達到最佳的分離效果，并且是工業(yè)精餾塔和氣相色譜分離性能高出許多倍。

③高靈敏度：紫外檢測器可達0.01ng，μL級的注射量。的 ④由高性能液相色譜法分析，特別是高沸點的分離和分析，大分子，強極性，熱穩(wěn)定性差的化合物，可用于廣泛的應用范圍：70%以上的有機化合物的，示出的優(yōu)點。

⑤分析速度快，載液的流速快：速度更快，更經典的液相色譜通常在15至30分鐘的樣品分析，部分樣品甚至在五分鐘內完成，一般不超過1小時。 此外，高效液相層析柱可？？反復使用，和樣品不被破壞，易回收等優(yōu)點，但也有缺點，與氣相色譜法相比，有自己的長處和優(yōu)勢互補。

的缺點的高性能液相色譜法“列效果。從噴射器到檢測器上，在除了比支柱死空間（噴射器，柱接頭，連接管和檢測器單元等）的任何其他的類型，如果流動相流量的變化在任何要被分離和滯留的物質的擴散會導致擴大的峰，柱效降低顯著高性能液相色譜檢測器的靈敏度是小于在氣相色譜儀中。

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4.氣相色譜定量分析方法有哪些

氣相色譜定量檢測一般就兩種，一個是外標法，一個是內標法，對于沒有標準物質的，就只能靠面積歸一法粗略定量。

外標和內標百度上有很多介紹，這里跟你講一下對于沒有標準物質的中間體該怎么通過氣相色譜定量。

1.首先，要通過重結晶、過柱子、吸附等等方法先獲得盡可能純的產物；

2.然后烘干至恒重，注意要把結晶水也烘掉；

3.烘干以后，根據產物合成、純化過程投加的各種物料，用氣相色譜測殘留溶劑，盡可能測全、測準；

4.測煅燒殘渣：800℃在馬弗爐里燒半個小時以上，測一下煅燒殘渣，這些可能是夾雜在產物中的無機鹽；

5.測水分，用溶劑把產物溶解掉，用微量水分測定方法測定產物中的水分，注意要扣除溶劑的空白值；

6.氣相色譜檢測產物：先通過調節(jié)分流比、汽化溫度、柱溫等，確認產物峰上沒有毛刺或者坎肩峰；調檢測條件，選一個峰形最好的條件，面積歸一法定量；

7.計算：先扣除前面檢測出來的殘留溶劑、煅燒殘渣和水分的含量，再乘以面積歸一法的面積百分含量。

這樣相對來說是比較準的定量方法了，面積百分含量越高的且其他殘留越低的，定量越準。