藥物中特殊雜質檢查方法(如何選擇設計藥物中特殊雜質檢查方法)

1.如何選擇設計藥物中特殊雜質檢查方法

特殊雜質是指在該藥物的生產(chǎn)和貯存過程中，根據(jù)藥物的性質、生產(chǎn)方式和工藝條件，有可能引入的雜質。這類雜質隨藥物的不同而異。由于特殊雜質多種多樣，檢查方法各異，故一般將其分成四大類：

一、物理法：利用藥物與雜質在嗅、味、揮發(fā)性、顏色、溶解及旋光性等上的差異，檢查所含雜質是否符合限量規(guī)定。

二、化學反應法：

（一）容量分析方法：利用藥物與雜質在酸堿性及氧化還原性等方面的差異，用標準溶液滴定來測定雜質含量。

（二）重量分析方法：在一定實驗條件下測定遺留物重量。

（三）比色法和比濁法：利用雜質特有的呈色反應（比色法）和沉淀反應（比濁法）與標準對照。

三、色譜法：

（一）紙色譜法（Paper

Chromatography,P.C）：取一定量供試品溶液雜質限量對照品溶液，于同一色譜濾紙上點樣，展開，檢出后，比較雜質斑點的個數(shù)、顏色深淺或熒光強度等。通常用于極性較大的藥物或放射性藥物的檢查。醫(yī)學教育|網(wǎng)搜集整理該法展開時間長、斑點較為擴散、不能用強酸等腐蝕性顯色劑。

（二）薄層色譜法（Thin Layer

Chromatography,TLC）：類似紙色譜法，但較簡便、快速、靈敏、不需特殊設備，適用于有機雜質的檢查。另外，一般將與主藥有密切相關的原料、中間體、副產(chǎn)物或分解產(chǎn)物等特殊雜質稱為有關物質，將甾體類藥物中的特殊雜質稱為其它甾體。TLC法按操作方法又可歸納為如下幾種情況：1、在一定供試品及檢查條件下，不允許有雜質斑點存在。

2、選用實際存在的待檢雜質作為雜質對照品。

3、選用可能存在的某種雜質作為雜質對照品。

4、將供試品稀釋到適當濃度作為雜質對照溶液。

5、選用質量符合規(guī)定的與供試品相同的藥物作為雜質對照品。

（三）高效液相色譜法（High Performance Liquid

Chromatography,HPLC）：本法分離效能高、專屬性強和檢測靈敏，適用于有機雜質，但更多地用于含量測定。

（四）氣相色譜法（Gas

Chromatography,GC）：主要用于揮發(fā)性有機雜質和有機溶劑殘留量的檢查。

1、揮發(fā)性有機雜質測定方法：（1）面積歸一化法：計算各雜質峰面積及其總和，并求出占總峰面積的百分率，但溶劑峰不計算在內。

(2)主成分自身對照法：先按供試品規(guī)定的雜質限度，將供試品稀釋成一定濃度的溶液，作為對照溶液，進樣，調節(jié)檢測器的靈敏度或進樣量，使對照溶液中的主成分色譜面積滿足準確測量要求。然后取供試品溶液，進樣，記錄時間，一般應為主成分保留時間的倍數(shù)。根據(jù)測得的供試品溶液的各雜質峰面積及其總和并與對照溶液主成分的峰面積比較，計算雜質限度。

(3)內標法測定雜質總量限度：供試品按各品種項下規(guī)定的方法配制不含內標物質的供試品溶液，注入儀器，記錄色譜圖I；再配制含有內標物質的供試品溶液，同法記錄色譜圖II.如果圖I中沒有與圖II上內標峰保留時間相同的雜質峰，則圖II中各雜質面積之和應小于內標物質峰面積（溶劑峰不計在內）。

(4)內標法加校正因子測定供試品中某個雜質（或主成分）含量。

(5)外標法測定供試品中某個雜質（或主成分）含量。

2.生物堿類藥物主要特殊雜質是什么

特殊雜質檢查：

利用藥物和雜質在物理性質上的差異。

硫酸奎寧中“氯仿-乙醇中不溶物”的檢查鹽酸嗎啡中“其它生物堿”的檢查旋光性的差異：用于硫酸阿托品中“莨菪堿”的檢查對光選擇性吸收的差異：利血平生產(chǎn)或儲存過程中，光照和有氧存在下均易氧化變質，氧化產(chǎn)物發(fā)出熒光。因此規(guī)定：供試品置紫外光燈（365nm）下檢視，不得顯明顯熒光。

吸附性質的差異：硫酸奎寧制備過程中可能存在“其它金雞納堿”。利用吸附性質的差異，采用硅膠G薄層進行檢查。規(guī)定限度為0.5%.利用藥物和雜質和化學性質上的差異。

與一定試劑反應產(chǎn)生沉淀硫酸阿托品制備過程中可能帶入（如莨菪堿、顛茄堿）雜質，因此需要檢查“其它生物堿”。利用其它生物堿堿性弱于阿托品的性質，取供試品的鹽酸水溶液，加入氨試液，立即游離，發(fā)生渾濁。規(guī)定0.25g藥物中不得發(fā)生渾濁。

3.藥物雜質的檢查方法一般分為幾種

一、對照法：又叫限量檢查法，系指取限度量的待檢雜質的對照物質配成對照液，另取一定量供試品配成供試品溶液，在相同條件下處理，比較反應結果（比色或比濁）。

由于雜質不可能完全除盡，所以在不影響療效和不發(fā)生毒性的原則下，既保證藥物質量，又便于制造、貯藏和制劑生產(chǎn)，對于藥物中可能存在的雜質，允許有一定限量，通常不要求測定其準確含量。 《藥典》中規(guī)定的雜質檢查均為限量（或限度）檢查（Limit test）。

雜質限量是指藥物中所含雜質的最大容許量。通常用百分之幾或百萬分之幾（ppm,parts per million）來表示。

對危害人體健康、影響藥物穩(wěn)定性的雜質，必須嚴格控制其限量。 檢查時可用雜質的純品或對照品在相同條件下來比較。

雜質限量 = 雜質最大允許量/供試品量*100% = 標準溶液體積*標準溶液濃度/供試品量*100% 或 L = V*C/S*100% 也有不用標準液對比，只在一定條件下觀察有無正反應出現(xiàn)。 對于一些保持藥物穩(wěn)定性的保存劑或穩(wěn)定劑，不認為是雜質，但需檢查是否在允許范圍內。

在藥典檢查項下除雜質檢查外，還包括有效性、安全性兩個方面。有效性試驗是指針對某些藥物的藥效需進行的特定的項目檢查，如藥物的制酸力、吸著力、疏松度、凝凍度、粒度、結晶度等。

安全試驗是指某些藥物需進行異常毒性、熱原、降壓物質和無菌等項目的檢查。 二、靈敏度法：系指在供試品溶液中加入試劑，在一定反應條件下，不得有正反應出現(xiàn)，從而判斷供試品中所含雜質是否符合限量規(guī)定。

三、比較法：系指取供試品一定量依法檢查，測得待檢雜質的吸收度等與規(guī)定的限量比較，不得更大。

4.藥典采用的色譜法中 最常用于特殊雜質限量檢查的方法是

藥物中雜志限量的控制方法有兩種：一種為限量檢查法，另一種是對雜質進行含量測定。

限量檢查法不需要進行準確定量，只需檢查雜質是否超過限量。

進行限量檢查，多采用對照法，靈敏度法，比較法。

1 對照法：取一定量的被檢雜質標準溶液和一定量供試品溶液，在相同條件下處理，比較反應結果，已確定雜質含量是否超過限量。

2靈敏度法：在供試品溶液中加入一定量的試劑，在一定反應條件下，不得有正反應出現(xiàn)。該法不需要雜質對照品溶液。如乳酸中枸櫞酸，草酸，磷酸或酒石酸的檢查。

3比較法：取供試品一定量依法檢查，測定特定待檢雜質的參數(shù)（如吸光度）與規(guī)定的限量進行比較，不得更大。

關于殘留溶劑，常使用GC。

定量測定主要使用色譜法，包括TLC（鹽酸環(huán)丙沙星中氟喹啉酸檢查）

HPLC（紅霉素中紅霉素BC檢查）