種子貯藏 seed preservation 種子收獲后至播種前的保存過(guò)程。
要求防止發(fā)熱霉變和蟲(chóng)蛀,保持種子生活力、純度和凈度,為農(nóng)業(yè)生產(chǎn)提供合格的播種材料。種子生活力的主要標(biāo)志是其萌發(fā)性能,一批種子的壽命指群體發(fā)芽率從收獲后降到50%所經(jīng)歷的時(shí)間,也稱(chēng)“半活期”,即群體平均壽命。
發(fā)芽性能和壽命主要決定于遺傳特性、種子形態(tài)結(jié)構(gòu)和生理活性、種子質(zhì)量和貯藏條件。以種子含水量和貯藏的溫度、濕度等的影響顯著。
種子含水量在貯藏期間應(yīng)控制在安全含水量以下,稻、麥、玉米等糧食作物種子安全含 水量為12%~13%;棉花、豆類(lèi)、花生等高油量種子為5%~9%;蔬菜種子為7%~9%。溫度和濕度顯著影響種子生活力,應(yīng)避免高溫(>30℃)和高濕(相對(duì)濕度>75%或種子含水量>15%)的貯藏條件(可參考哈林頓通則)。
氣體影響種子呼吸,應(yīng)保持10~20℃低溫、干燥種子在密閉條件(減少含氧量)下貯藏。貯藏方法因種子用途而異。
作物品系、育種材料種子,用麻袋、多孔紙袋、玻璃瓶等包裝;大田種子采用散裝、圍囤或袋裝。種子入庫(kù)前先行種子清選干燥和庫(kù)房消毒;入庫(kù)后注意通風(fēng)換氣和防潮、防蟲(chóng)、防鼠并定期檢查和測(cè)定發(fā)芽率。
根據(jù)種子的勝利特點(diǎn)及貯藏的目的分為三大類(lèi),即干藏法、濕藏法和流水藏法。 此外,超干貯藏法也是比較前沿、科技含量更高的貯藏方法。
菌種保藏是食用菌產(chǎn)業(yè)的一項(xiàng)基礎(chǔ)工作,是確保野生種質(zhì)資源基因留存和現(xiàn)有生產(chǎn)用種遺傳性能相對(duì)穩(wěn)定的必要手段。
菌種保藏的方法多種多樣,有的雖然保藏效果好,但投資高或操作繁雜。在生產(chǎn)實(shí)踐中,更需要設(shè)備投入少,能保障菌種不死亡、不污染、最大限度地保持優(yōu)良種性的簡(jiǎn)便方法,如斜面低溫短期保藏和自然基質(zhì)較長(zhǎng)期保藏相結(jié)合的方法。
一般而言,對(duì)母種進(jìn)行長(zhǎng)期保存,對(duì)原種進(jìn)行短期保存。須保證優(yōu)良菌種的性狀和活力不發(fā)生變異,不死亡,不被污染,確保其純度。
因此,保存方法應(yīng)具備取材容易、操作方便、菌種不易退化、長(zhǎng)期保存不污染雜菌等優(yōu)點(diǎn)。常用的菌種保存方法如下:(一)斜面低溫保藏 該法的優(yōu)點(diǎn)是保藏方便且所占空間較小。
具體做法是:菌絲長(zhǎng)滿(mǎn)斜面后,放在0~5℃保存。以后每隔一定時(shí)間(2~3個(gè)月)轉(zhuǎn)管一次。
轉(zhuǎn)管保存不能長(zhǎng)期用PDA培養(yǎng)基,否則種性易退化,灰樹(shù)花降解木質(zhì)纖維素的能力減弱。因此隔一定時(shí)間(1年左右)須把菌種轉(zhuǎn)接到木屑培養(yǎng)基上復(fù)壯,之后挑選健壯無(wú)污染的菌絲再轉(zhuǎn)回PDA培養(yǎng)基保存。
在長(zhǎng)期保存過(guò)程中,要防棉塞受潮滋生雜菌。菌種試管口最好用蠟燙封,以防培養(yǎng)基內(nèi)水分過(guò)快蒸發(fā)。
增加瓊脂用量(2.5%~3%)可減緩水分蒸發(fā)。還要防止菌種管上的標(biāo)簽脫落而造成種系混雜。
斜面低溫保藏方法簡(jiǎn)便易行,能隨時(shí)觀察保藏菌株的活力和純度,一旦染雜,肉眼能及時(shí)發(fā)現(xiàn)。(二)自然基質(zhì)保藏 此法是根據(jù)灰樹(shù)花的特性,利用自然基質(zhì)保藏其菌種的方法。
灰樹(shù)花是木腐菌,可以采用以木屑為主料的培養(yǎng)基。自然基質(zhì)營(yíng)養(yǎng)全面,且大部為緩釋養(yǎng)分,不易產(chǎn)生營(yíng)養(yǎng)過(guò)?;蝠囸I;其次,培養(yǎng)基理化性狀好,可吸收或緩沖菌絲代謝出的有害物質(zhì),水分與通氣協(xié)調(diào)平衡,部分菌絲扎入基質(zhì)內(nèi)生長(zhǎng),不裸露于空氣中,菌絲呼吸強(qiáng)度低,生命力強(qiáng)。
1.原料與配方 粗、細(xì)木屑比例適當(dāng),采用板栗樹(shù)木屑最佳,粗木屑粒徑為2毫米左右,細(xì)木屑為一般圓盤(pán)鋸屑,粗、細(xì)的比例為1∶2,添加干木屑重量20%的麩皮和1%的糖,含水率為60%左右。這樣的基質(zhì)通氣性好,營(yíng)養(yǎng)豐富且供菌絲分解利用的時(shí)間長(zhǎng),長(zhǎng)到基質(zhì)內(nèi)部的菌絲比包裹在基質(zhì)外部暴露于空氣中的菌絲耐受性強(qiáng)。
不同粒徑的基質(zhì)比例適當(dāng),還能協(xié)調(diào)氣與水的矛盾。粗粒過(guò)多,架空菌絲多;細(xì)粒過(guò)多,透氣性差,菌絲生長(zhǎng)慢。
應(yīng)用配方如下:栗木屑78%,麩皮20%,石膏1%,蔗糖1%,水65%配料,裝入較粗大的試管中,裝料量為試管的1/3~1/2,1.5千克/厘米2滅菌1.5小時(shí)。冷卻后,接入需保藏的菌種,在28℃下培養(yǎng),待菌絲長(zhǎng)滿(mǎn)木屑培養(yǎng)基時(shí)取出換上無(wú)菌橡皮塞,在0~5℃冰箱內(nèi)保藏1~2年轉(zhuǎn)管一次。
2.容器與裝量 采用容量250毫升的葡萄糖玻璃瓶,清洗潔凈,裝量一般不超過(guò)玻璃瓶容量的3/5,填料不能過(guò)滿(mǎn),瓶壁所殘留的顆粒須擦拭干凈,否則保藏的菌種易引起污染。3.滅菌和冷藏 滅菌時(shí)若采用棉塞封口,基質(zhì)表層易失水,接種成活率低,即使菌絲復(fù)活,生長(zhǎng)也很緩慢,所以最好采用聚丙烯膜封口,接種后換用無(wú)菌棉塞培養(yǎng),待菌絲長(zhǎng)滿(mǎn)后再換成有孔滅菌膠塞冰箱保藏。
用上述方法保藏的菌種經(jīng)3年貯放后,接出成活率均達(dá)90%以上,出菇驗(yàn)證產(chǎn)量及子實(shí)體形態(tài)特征均無(wú)明顯變化。因此,自然基質(zhì)保藏法具有保存期長(zhǎng),菌種遺傳性能相對(duì)穩(wěn)定的特點(diǎn)。
(三)木粒PDA斜面保藏 灰樹(shù)花在自然狀態(tài)下易發(fā)生于栗樹(shù)根部,這說(shuō)明其營(yíng)養(yǎng)需求較為特殊。根據(jù)灰樹(shù)花這種習(xí)性,在PDA基礎(chǔ)上添加適量的栗樹(shù)木粒制成母種培養(yǎng)基。
在多年的使用中發(fā)現(xiàn),用該培養(yǎng)基培養(yǎng)的母種生長(zhǎng)勢(shì)好,在轉(zhuǎn)接原種時(shí),適應(yīng)能力強(qiáng),萌發(fā)定植快;用作菌種保藏基質(zhì)時(shí),保藏時(shí)間長(zhǎng),并能很好保持菌種的優(yōu)良性狀。1.木粒PDA的制作 選取栗樹(shù)邊材,加工成0.3~0.5厘米的顆粒,及時(shí)烘干或曬干備用。
稱(chēng)取葡萄糖10克,KH2PO41克,1溶解于1升清水中配制成營(yíng)養(yǎng)液。將營(yíng)養(yǎng)液倒入盛有木粒的小鋁鍋中,營(yíng)養(yǎng)液以完全浸沒(méi)木粒為準(zhǔn)。
煮沸10分鐘,以加快木粒對(duì)營(yíng)養(yǎng)液的吸收速度,起鍋靜置30分鐘讓木粒吸足營(yíng)養(yǎng)液。撈出木粒,瀝掉表面的水,裝入試管,裝量為試管長(zhǎng)的1/6,最多不得超過(guò)試管長(zhǎng)的1/5,否則在擺制斜面時(shí),不易使木粒均勻分散于斜面的表面上。
選取新鮮的馬鈴薯,去皮并切成薄片,稱(chēng)取200克放入小鋁鍋中,加入1升清水,文火煮沸30分,趁熱過(guò)濾取汁,并補(bǔ)足1升的體積。稱(chēng)取瓊脂20克,葡萄糖20克,KH2PO4 2克,MgSO47H2O 2克。
先將瓊脂剪碎,加入到馬鈴薯濾液中,繼續(xù)用文火加熱,使瓊脂溶化。待瓊脂完全溶化后,加入稱(chēng)好的其他3種營(yíng)養(yǎng)成分,攪拌使這些物質(zhì)溶解均勻,趁熱裝入已裝有木粒的試管中,裝至試管長(zhǎng)的1/3處,塞上棉塞。
在0.8~1千克/厘米2蒸氣壓下滅菌40分,待氣壓降至0時(shí),開(kāi)蓋取出,趁熱輕輕抖拍試管,使木粒分散后即可擺制斜面,并使木粒呈半裸狀分布于斜面上,待凝固后便制成了木粒PDA培養(yǎng)基。2.生長(zhǎng)及保藏效果 木粒PDA斜面上培養(yǎng)的灰樹(shù)花母種,菌絲生長(zhǎng)迅速、良好,12天即可長(zhǎng)滿(mǎn)試管,但菌絲的后期生長(zhǎng)勢(shì)更為粗壯、濃密,后勁足。
轉(zhuǎn)接原種時(shí),菌種適應(yīng)力強(qiáng),定植快。這表明,灰樹(shù)花菌絲的生長(zhǎng)速度、生長(zhǎng)勢(shì)不僅取決于本身的遺。
有以下兩種: (1) 沙藏法:選擇空氣流通的瓦房,在地板上鋪一層15 ~ 20厘米厚的干凈細(xì)沙,然后在沙層上面將新鮮的橡膠種子和細(xì)沙混合并堆至50厘米高,最后在沙堆頂部和四周蓋15 ~20厘米厚的沙,并控制沙堆有一定的濕度。
此法貯藏種子3個(gè)月,發(fā)芽率仍達(dá)70% ~ 80%。 (2) 塑料袋貯藏法:新鮮種子經(jīng)過(guò)殺菌劑處理后,裝入聚乙烯薄膜袋中,每袋盛2 ~3千克,約占袋容量的3/4,封袋口后再用大頭針在袋身上刺5 ~6個(gè)小孔,然后置于室內(nèi)存放,并做好防鼠防蟲(chóng)(主要是蟑螂)工作。
據(jù)中國(guó)熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院的試驗(yàn),此法貯藏種子7個(gè)月,仍有50%以上的發(fā)芽率。
玉米種子 有條件的農(nóng)戶(hù)最好是帶貯存,在播種前再脫粒。用種量大的農(nóng)戶(hù)、場(chǎng)站,既可用玉米樓子貯穗,也可在住室火山
墻里邊吊穗貯藏。搭樓子貯藏的必須在低溫到來(lái)之前采取日曬、烘干、自然干燥等方法,把玉米穗的水分降至20%以下為宜,并
用草簾子將四周?chē)?yán)密?chē)?、蓋嚴(yán),避免嚴(yán)寒和風(fēng)雪的侵襲。
水稻種子 水稻種子冬季貯藏主要有兩種形式。一是倉(cāng)房貯存,要求在11月上旬前把種子水分降至18%以下,在12下旬前把
水分降至14%,倉(cāng)房溫度保持平穩(wěn)狀態(tài),避免忽冷忽熱。二是封閉保溫貯存。此方法適于含水量為14%—16¥的種子。方法有三
種。一是囤套囤貯方法:在裝滿(mǎn)稻種的囤子外面再套一圈囤子,在內(nèi)外兩層囤子間裝30—40厘米厚的稻殼或其他糧食等密閉保
存。二是圍堆貯存法:用裝滿(mǎn)其他糧食的袋子圍成“墻”,把稻種裝在中間,上面壓上糧袋。三是地窖貯存法:一般在凍化交
替時(shí)(約10月未至11月初)種子入窖,氣溫0—2℃時(shí)(翌年4月初)種子出窖。
花生種子 花生種子在含水量13%時(shí),在零下10℃條件下,發(fā)芽率開(kāi)始下降;含水量低于8.5%時(shí),才能安全越冬,所以,在
花生收獲后,一定要及時(shí)晾曬風(fēng)干。越冬一般采用小囤通風(fēng)貯存。選擇室外通風(fēng)高燥處,墊起35—50厘米,鋪上用樹(shù)條鋪成的
囤子盤(pán),再用樹(shù)條簾子圍成寬1米左右的小囤子,上面苫蓋嚴(yán)實(shí)。陰天或雪天在圍子草簾,晴天要拿掉草簾,使種子通風(fēng)干燥 高梁、谷子種子 高梁、谷子的種子貯存是在田間選穗割下時(shí),一定要留30厘米左右長(zhǎng)的稈,捆成小捆,晾干后搭掛在住房或倉(cāng)庫(kù)內(nèi),也可放在囤子里貯存。對(duì)已脫粒的種子必須要晾曬好,含水量達(dá)到要求的標(biāo)準(zhǔn)。數(shù)量大時(shí)可在倉(cāng)內(nèi)坐囤貯存,注意墊好囤衣,防止受潮。
大豆種子 大豆脫粒后,必須及時(shí)晾曬風(fēng)干,一般可采用小囤通風(fēng)貯存。選擇室外通風(fēng)高燥地方,用土墊起50厘米左右,鋪
上木頭,囤底鋪上席子,周?chē)惨獟焐舷?,裝完豆種后上面要苫蓋嚴(yán)實(shí)。
馬鈴薯 如果貯存不好,不僅引起種苗大批霉?fàn)€,喪失種子價(jià)值,而且也是引起馬鈴薯種薯退化的原因之一。貯藏馬鈴薯的
窖,溫度必須要保持在1—3℃之間,相對(duì)濕度要保持在85%以下,并且要保持空氣流通。
貯存期間要注重以下幾個(gè)事項(xiàng):一是要根據(jù)不作物、不同品種、不同用途的種子,分囤、分倉(cāng)貯存。要放好標(biāo)簽,注名品
種、名稱(chēng)和數(shù)量。二是種子和化肥、農(nóng)藥決不能混放在一起,也不要放在煙、氣較大的地方。三是做到經(jīng)常檢查,特別是在春
季要定期檢查種子的溫、濕度,做好發(fā)芽試驗(yàn),做到心中有數(shù),防止壞種。
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